喉鳞状细胞癌中泛素结合酶E2C、胞浆磷蛋白-1表达与预后相关性

目的探讨泛素结合酶E2C(UBE2C)、胞浆磷蛋白-1(STMN1)在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)中的表达水平及与预后的相关性。方法选取2015年2月至2017年2月在该院进行手术治疗中取得的97例喉鳞癌组织标本作为喉鳞癌组,另外选取对应的癌旁组织标本作为癌旁组。采用免疫组化法检测UBE2C和STMN1在不同组织标本中的表达情况;通过χ^(2)检验分析UBE2C、STMN1表达与喉鳞癌患者临床病理特征的关系;采用多因素Cox回归分析影响喉鳞癌患者预后的相关因素。结果喉鳞癌组UBE2C阳性率高于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05);喉鳞癌组STMN1阳性率高于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、T分期为T_(3)~T_(4)期、有淋巴结转移的喉鳞癌患者UBE2C、STMN1阳性率均高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、T分期为T_(1)~T_(2)期、无淋巴结转移的喉鳞癌患者(P<0.05)。UBE2C阴性的喉鳞癌患者5年生存率明显高于UBE2C阳性的喉鳞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);STMN1阴性的喉鳞癌患者5年生存率明显高于STMN1阳性的喉鳞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、UBE2C阴性、STMN1阴性的喉鳞癌患者5年生存率明显高于临床分期分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、UBE2C阳性、STMN1阳性的喉鳞癌患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、UBE2C阳性、STMN1阳性表达是喉鳞癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论UBE2C、STMN1在喉鳞癌患者中主要呈阳性表达,且与喉鳞癌患者预后密切有关,有望成为喉鳞状细胞癌预后评估的指标。

泛素结合酶E2C通过特异性结合β-微管蛋白参与调控肝细胞癌进展

目的筛选泛素结合酶E2C(UBE2C)的底物蛋白,并探讨其在肝细胞癌进展中的作用。方法构建带有Halotag标签的UBE2C过表达质粒,将UBE2C与Halotag在人高转移肝癌细胞系HCCLM3中融合表达,通过Halolink树脂沉淀UBE2C结合的底物蛋白,并联合SDS-PAGE和质谱对底物蛋白进行鉴定。在人肝癌细胞系Huh-7中过表达UBE2C,通过qRT-PCR、蛋白质印迹分析和细胞免疫荧光实验检测UBE2C过表达对其底物蛋白表达的影响,利用细胞核质分离结合蛋白质印迹分析及TOP flash/FOP flash荧光素酶报告基因实验检测UBE2C过表达对Wnt信号通路的影响,并进一步通过qRT-PCR和蛋白质印迹分析验证UBE2C过表达对Wnt信号通路下游基因表达的影响。结果Halotag共沉淀产物经SDS-PAGE和银染后所获得差异条带的质谱鉴定结果显示,β-微管蛋白是UBE2C结合的底物蛋白。与对照组相比,过表达UBE2C降低了Huh-7细胞中β-微管蛋白在蛋白水平的表达(P<0.01),但对其在mRNA水平的表达没有影响(P>0.05)。同时,过表达UBE2C促进了β-联蛋白入核(P<0.05),提高了TOP flash/FOP flash荧光素酶活性(P<0.01),增强了Wnt信号通路下游基因JNK、细胞周期蛋白D1和基质金属蛋白酶7的表达(P均<0.05)。结论UBE2C通过特异性结合β-微管蛋白降低肝癌细胞中β-微管蛋白水平,从而提高Wnt信号通路活性,促进其下游基因表达,进而参与调控肝细胞癌的进展。

泛素结合酶E2C与肿瘤发生的研究进展

泛素结合酶E2C(UBE2C)属于E2酶家族中的成员,它在泛素-蛋白酶体途径中具有重要的生物学作用,泛素结合酶E2C是细胞周期进展和周期蛋白降解所必需的。泛素结合酶E2C在多种肿瘤组织中高度表达,与肿瘤的发生发展密切相关。本文就结合国内外最新报道,对泛素结合酶E2C与肿瘤相关性研究进展作一综述。

血液外泌体携带miR-140-3p负调控泛素结合酶E2C抑制小细胞肺癌的增殖和上皮-间质转化

目的探究血液外泌体携带miR-140-3p是否能够通过靶向泛素结合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C)调控小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)的恶性进展。方法该研究由生物信息学分析、临床研究、细胞分析和动物实验构成。从GEO数据库下载SCLC相关的微小RNA(microRNA,miRNA)数据集GSE19945、mRNA数据集GSE40275和GSE60052。采用T-test检测miR-140-3p在数据集中的正常组织和SCLC组织中的表达差异,并通过数据库分析miR-140-3p在不同组织和细胞外泌体中的表达情况。收集2021年12月—2022年12月在永州市中心医院切除的SCLC组织和配对癌旁组织,并于研究开始前7 d选择健康志愿者。通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测SCLC患者和健康志愿者组织样本中miR-140-3p和UBE2C的表达水平分布情况,并根据表达量的中位数将SCLC患者分为低表达组和高表达组,分析miR-140-3p和UBE2C的表达水平与患者病理参数的相关性。选择20只雄性裸鼠,随机分为miR-140-3p、UBE2C的模拟物阴性对照组和模拟物对照组4组,每组5只。采用免疫组化检测系统对裸鼠肿瘤组织切片进行检测。结果共纳入患者45例,健康志愿者30人。SCLC恶性进展与miR-140-3p和UBE2C的表达量显著相关。SCLC患者血液来源的外泌体中的miR-140-3p表达较低。过表达miR-140-3p可抑制SCLC细胞的增殖(47.33±2.52 vs.107.67±10.69,P<0.05)、迁移[(11.63±2.62)%vs.(31.77±4.30)%,P<0.05]和侵袭(44.33±3.06 vs.102.67±8.50,P<0.05),并促进其凋亡[(14.48±1.20)%vs.(10.14±1.21)%,P<0.05]。生物信息学分析得到miR-140-3p的靶基因UBE2C。体外实验进一步表明,miR-140-3p可直接靶向UBE2C来抑制SCLC细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化并促进其凋亡。小鼠异种移植实验表明,miR-140-3p mimic能显著抑制肿瘤生长。结论血液外泌体miR-140-3p和促癌基因UBE2C可能是潜在的抑制SCLC恶性进程的靶点。

UBE2C在乳腺癌MCF-7细胞增殖中的作用及机制研究

目的研究沉默泛素结合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme2C,UBE2C)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响,并初步研究其作用机制。方法利用小干扰RNA(si-RNA)沉默MCF-7细胞中UBE2C基因。利用CCK-8实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、Western blot法分别在mRNA、蛋白水平检测细胞周期相关蛋白激酶抑制蛋白p21以及细胞周期促进蛋白细胞周期蛋白D1(cellcycle protein D1,CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase4,CDK4)、细胞周期蛋白依赖性激酶6(cyclin-depend-ent kinase 6,CDK6)的表达。结果与空白对照组及阴性对照(si-NC)组细胞比较,si-UBE2C组细胞UBE2C表达下调。CCK-8实验以及克隆形成实验结果显示,si-UBE2C组细胞增殖能力明显降低;与空白对照组及si-NC组细胞比较,si-UBE2C组细胞周期相关蛋白激酶抑制蛋白p21在mRNA及蛋白水平的表达均上调,而细胞周期促进蛋白CyclinD1、CDK4、CDK6在mRNA及蛋白水平的表达均下调。结论UBE2C可以通过介导CyclinD1/CDK4/CDK6复合物及p21的表达来调控MCF-7细胞的增殖能力,促进乳腺癌的进展。

泛素结合酶E2C在脑肿瘤中的相关研究进展

泛素结合酶E2C(UBE2C)是泛素蛋白酶系统的重要组成部分,参与细胞周期的调控。UBE2C高表达于脑肿瘤组织中,且表达水平与肿瘤的恶性程度及患者的预后状况密切相关,有可能成为监测脑肿瘤进展的生物标记物。笔者现围绕UBE2C在脑肿瘤发生发展、预后及分子机制中的研究进展进行综述,以期为脑肿瘤的临床防治研究提供新的思路。

基于生物信息学分析UBE2C与乳腺癌患者预后及免疫治疗反应的关系

目的探讨泛素结合酶E2C(UBE2C)与乳腺癌患者预后及免疫治疗反应的关系。方法通过生物信息学对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中1066例乳腺癌组织和112例癌旁正常乳腺组织中的UBE2C基因表达水平进行差异分析,通过Kaplan-Meier法分析研究UBE2C高低表达乳腺癌患者总生存期(OS)的差异。筛选UBE2C高低表达两组乳腺癌患者之间的差异基因,并进行基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。通过CIBERSORT分析UBE2C与免疫细胞浸润,并利用癌症免疫组图谱(TCIA)数据库分析UBE2C与免疫治疗反应的相关性,最后通过芯片数据及免疫组化验证UBE2C在乳腺癌中的作用。结果与癌旁正常乳腺组织相比,UBE2C在乳腺癌组织中表达明显上调,并且UBE2C高表达的乳腺癌患者OS显著缩短。UBE2C高低表达组间的差异基因主要在细胞增殖、分裂和细胞因子活性等发挥作用,且明显富集于细胞因子相关的信号通路。UBE2C高低表达组间免疫细胞浸润模式具有明显差异,UBE2C高表达组的免疫治疗效果可能更好。乳腺癌芯片与免疫组化数据均证实了UBE2C在乳腺癌中的作用。结论UBE2C与乳腺癌患者的预后及多种免疫细胞浸润有关,可以作为预测乳腺癌免疫治疗反应的标志物。

UBE2C基因在肾透明细胞癌中的临床预后价值及分子机制探究

目的 探讨泛素结合酶E2C(UBE2C)在肾透明细胞癌(KIRC)中的表达模式、临床预后价值以及调节KIRC的分子机制。方法 通过肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)和人类蛋白质表达图谱数据库(HPA)分析UBE2C基因在KIRC组织和正常组织中的表达差异。结合KIRC患者的临床信息,利用单因素及多因素Cox回归模型分析UBE2C基因在KIRC患者中的预后价值。通过基因富集分析(GSEA)了解UBE2C基因调控KIRC的分子机制。计算KIRC患者中的浸润免疫细胞含量,并评估UBE2C基因表达水平与免疫细胞浸润含量的相关性。结果 KIRC组织中的UBE2C基因和蛋白表达水平均高于正常肾组织(P<0.05)。KIRC组织中UBE2C表达与肿瘤位置、组织学分级、病理分期及TNM分期有关(P<0.05)。单因素及多因素Cox回归分析结果显示,UBE2C可作为预测KIRC患者总生存期(OS)的独立预后因素(P<0.05)。GSEA结果表明,UBE2C可能参与调节细胞因子-细胞因子受体相互作用、细胞周期检查点、ECM糖蛋白等多条信号通路。UBE2C基因表达水平与KIRC肿瘤微环境中Treg细胞、T细胞、Th17细胞、B细胞、CD8+T细胞和巨噬细胞浸润等显著相关。UBE2C同免疫检查点分子PDCD1(PD1)、CTLA4、CD27、LAG3等表达水平也显著相关。结论 UBE2C可作为KIRC患者的一个风险预后因子,同时UBE2C可能作为KIRC治疗的潜在靶点。

UBE2C表达对肝内胆管癌细胞增殖侵袭的影响及其预后评估价值

目的:探究泛素结合酶E2C(UBE2C)表达对肝内胆管癌(iCCA)细胞增殖与侵袭的影响及其预后评估价值。方法:收集12例iCCA患者肿瘤组织和癌旁正常组织,检测UBE2C转录水平。选取58例根治性切除术后iCCA患者的肿瘤组织标本,通过免疫组化检测UBE2C的表达情况,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。使用siRNA沉默RBE细胞中UBE2C的表达,通过MTT与Transwell实验检测UBE2C对细胞增殖及侵袭的影响。结果:iCCA组织中UBE2C表达上调,其表达与低分化、淋巴结转移、术后复发以及TNM分期等临床病理特征密切相关,UBE2C阳性患者预后明显不良。细胞学实验发现沉默UBE2C后,iCCA细胞的增殖及侵袭能力均下降。结论:UBE2C表达具有评估iCCA预后的价值,其能够诱导肿瘤细胞的增殖侵袭从而发挥促癌作用,有可能成为iCCA治疗的潜在分子靶点。

UBE2C对肺癌PC9细胞增殖及迁移能力的影响

目的探讨泛素结合酶E2C(UBE2C)对肺癌PC9细胞增殖、迁移能力的影响。方法构建pcDNA3.1-Flag-UBE2C真核表达载体,经脂质体转染进入肺癌细胞PC9(重组质粒组)中,并以空质粒(pcDNA3.1)转染的人肺癌细胞PC9为对照组。采用RT-PCR和Western blotting法检测转染后细胞中UBE2C mRNA和蛋白表达,CCK8法及细胞划痕试验检测转染后细胞的增殖和迁移能力。结果转染后,空质粒组、重组质粒组UBE2C mRNA相对表达量分别为0.679±0.024、2.349±0.154,二者比较,P<0.01; UBE2C蛋白相对表达量分别为0.581±0.018、2.284±0.017,二者比较,P<0.01;培养60 h时,空质粒组、重组质粒组OD450分别为1.201±0.123、1.627±0.01,重组质粒组的增殖能力高于空质粒组(P<0.05);重组质粒组和空质粒组在划痕后培养24 h时的伤口愈合率分别为46.322%±3.388%、29.576%±3.229%,48 h的愈合率分别为76.995%±3.338%、38.362%±3.358%,重组质粒组的迁移能力高于空质粒组(P均<0.01)。结论 UBE2C能够增强PC9细胞的增殖和迁移能力。

UBE2C和UBE2T与胰腺癌患者预后及免疫细胞浸润的关系

目的探讨泛素结合酶E2C(UBE2C)和E2T(UBE2T)与胰腺癌患者预后及免疫细胞浸润的关系。方法检索Oncomine、GEPIA2.0、EMBL-EBI数据库分析两基因在胰腺癌中的表达情况,利用GEPIA、Kaplan-Meierplotter数据库探索两基因的表达与胰腺癌患者预后的相关性。利用Oncomine及cBioPortal数据库筛选共表达基因,使用FunRich软件进行富集分析。利用String数据库和Cytoscape软件综合分析与两基因相互作用的蛋白及调控网络。使用Cytoscape筛选核心(Hub)基因,并利用GEPIA进行预后分析。使用TIMER数据库分析两基因的表达与免疫细胞浸润的相关性。结果UBE2C和UBE2T在胰腺癌中表达上调,高表达两基因的患者总生存期和无病生存期显著缩短(P均<0.05)。两基因的表达与患者的分期、分级、巨噬细胞浸润等有关(P均<0.05)。在胰腺癌中UBE2C与UBE2T的表达显著相关(P<0.05),与两基因共表达的基因主要富集于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶激活功能;主要参与细胞周期、纺锤体组装过程;主要位于染色体结构中;在细胞周期、Aurora-B信号通路中富集。筛选的10个Hub基因为PBK、CEP55、BIRC5、MELK、CDK1、NUSAP1、TPX2、BUB1、TOP2A和BUB1B,与胰腺癌患者预后相关(P<0.05)。两基因的表达与巨噬细胞浸润呈负相关关系(P<0.05)。结论UBE2C和UBE2T与胰腺癌患者的预后及多种免疫细胞如T细胞、巨噬细胞的浸润有关,可能通过调控细胞周期、DNA复制过程进而调控胰腺癌的进程。

UBE2C对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:研究泛素结合酶E2C(ubiquitin-conjugating enzyme E2C,UBE2C)在宫颈癌细胞中的表达情况,并明确UBE2C对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:首先查阅GEPIA数据库,了解UBE2C在宫颈癌中的表达;其次通过qRT-PCR和Western blotting法明确UBE2C在宫颈癌HeLa细胞及正常宫颈上皮细胞End1/E6E7中表达差异,然后分别构建si-UBE2C及si-NC转染宫颈癌HeLa细胞,检测转染后细胞中UBE2C mRNA和蛋白表达;最后采用CCK-8实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化,并鉴定UBE2C下游靶基因PTEN、P-p53的表达情况。结果:UBE2C在宫颈癌中高表达,能够促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并下调抑癌基因PTEN、P-p53的表达。结论:UBE2C能够加重宫颈癌细胞恶性表型;UBE2C可能作为宫颈癌诊断及治疗的判定指标之一。

血清lncRNA UBE2CP3在肝细胞癌筛查中的应用价值

目的检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清中lncRNA泛素结合酶E2C(VBE2C)假基因3 (UBE2CP3)的表达水平,并分析其临床应用价值。方法收集79例健康人对照者、92例HCC患者以及23例HCC合并肝内外转移HCC患者的血清标本,另收集18例接受HCC根治术的患者术前及术后30 d的血清标本;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组血清中UBE2CP3的表达水平。结果血清UBE2CP3在健康人对照组(12.90±4.96)、HCC未转移组(17.39±3.11)、HCC转移组(22.54±3.96)中的表达水平差异具有统计学意义(F=59.23,P<0.01);UBE2CP3筛查HCC的ROC曲线面积(AUCROC)为0.794,95%CI为0.728~0.859,当cut-off值为14.035时,其敏感性为56.96%,特异性为90.35%;术后30 d HCC患者血清UBE2CP3的表达水平显著低于术前水平,差异具有统计学意义(t=3.934,P<0.01)。结论血清lncRNA UBE2CP3对HCC的诊断、预后及疗效判断具有一定的价值。