亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清泛素羧基末端水解酶-L1、低氧诱导因子-1α表达水平及神经发育结局的影响

目的探讨亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)患儿血清泛素羧基末端水解酶-L1(ubiquitin carboxy-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)、低氧诱导因子-1a(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)表达水平及预后的影响。方法选取2015年8月至2022年8月邯郸市妇幼保健院新生儿重症监护病房(neonatal intensive care unit,NICU)收治的110例中重度HIE患儿作为研究对象。根据家属是否同意患儿接受亚低温治疗,将患儿分为亚低温治疗组(n=70)和传统治疗组(n=40);亚低温治疗组患儿除常规治疗外,于出生后0~6 h实施选择性头部亚低温治疗。传统治疗组患儿给予常规治疗;治疗前和治疗后第3天,采用酶联免疫吸附实验双抗夹心法检测UCH-L1、HIF-1α表达水平。随访患儿出生后12~15个月神经发育结局。统计学方法采用独立样本t检验、配对t检验、χ^(2)检验或Fisher确切概率法。结果亚低温治疗组与传统治疗组治疗后血清UCH-L1[(1.9±0.4)与(3.1±0.3)μg/L,t=16.495,P<0.001]、HIF-1α表达水平[(1.40±0.22)与(2.75±0.19)μg/L,t=32.486,P<0.001]比较,亚低温治疗组明显低于传统治疗组;亚低温治疗组患儿治疗后血清UCH-L1表达水平低于治疗前[(1.9±0.4)与(3.3±0.5)μg/L,t'=18.293,P<0.01]。亚低温治疗组和传统治疗组在治疗3 d后,虽然两组血清中HIF-1α表达水平均出现高于治疗前[(1.40±0.22)与(1.23±0.29)μg/L,t'=3.907,P<0.001;(2.75±0.19)与(1.27±0.35)μg/L,t'=23.504,P<0.001],但是,亚低温抑制血清HIF-1α表达水平升高的效果明显优于传统治疗组。随访结果显示,亚低温治疗组患儿神经发育正常的比例高于传统治疗组[68.6%(48/70)与32.5%(13/40),χ^(2)=13.408,P<0.001];亚低温治疗组神经发育迟缓的比例低于传统治疗组[11.4%(8/70)与37.5%(15/40),χ^(2)=10.462,P<0.001]。结论亚低温治疗可以明显降低中重度HIE患儿血清UCHL1表达水平,抑制血清HIF-1a表达水平升高的作用明显优于传统治疗,这可能是低温治疗的神经保护机制之一。

血清泛素羧基末端水解酶L1联合APACHEⅡ评分对一氧化碳中毒患者认知功能障碍的预测价值

目的探讨血清泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)联合急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)对急性一氧化碳(CO)中毒患者认知功能障碍的预测价值。方法选取2020年7月至2023年7月期间在本院确诊的急性CO中毒患者135例为本研究对象,根据简易精神状态评分(MMSE)分为认知功能障碍组(n=28)和无障碍组(n=107)。采用ELISA法检血清UCH-L1水平,APACHEⅡ评分评估患者病情严重程度。采用Spearson检验分析血清UCH-L1水平与APACHEⅡ评分的相关性,Logistic回归分析急性CO中毒患者认知功能障碍的影响因素,受试者工作特性(ROC)曲线评估UCH-L1、APACHEⅡ评分及UCH-L1联合APACHEⅡ评分对急性CO中毒患者认知功能障碍的预测价值。结果认知功能障碍组APACHEⅡ评分、血乳酸、白细胞计数和UCH-L1水平明显高于无障碍组(P<0.05)。UCH-L1水平与APACHEⅡ评分、血乳酸和白细胞计数呈正相关(r值分别为0.565、0.428、0.403,P<0.05)。高APACHEⅡ评分(OR=2.512,95%CI:1.582~3.989),高血乳酸(OR=2.145,95%CI:1.311~3.508),高白细胞计数(OR=1.835,95%CI:1.054~3.195),高UCH-L1水平(OR=2.898,95%CI:1.727~4.862)是急性CO中毒患者认知功能障碍的危险因素(P<0.05)。UCH-L1、APACHEⅡ评分预测急性CO中毒患者认知功能障碍的AUC分别为0.798(95%CI:0.712~0.836)、0.749(95%CI:0.632~0.798),UCH-L1联合APACHEⅡ评分预测的AUC为0.844(95%CI:0.775~0.873)。结论UCH-L1、APACHEⅡ评分在急性CO中毒认知功能障碍患者中均呈高表达,可作为预测急性CO中毒患者有无发生认知功能障碍的重要指标,且联合检测具有较高敏感度和特异度,预测效能更佳。

急性脑梗死患者血清泛素羧基末端水解酶-1和胶质纤维酸性蛋白的表达及其临床意义

目的:观察急性脑梗死患者血清泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin C-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)和血清胶质纤维酸性蛋白(serum glial fibrillary acidic protein,GFAP)的临床表达水平,并探讨二者对脑梗死患者的临床意义。方法:选取重庆市肿瘤医院在2014年1月至2016年2月期间收治的80例急性脑梗死患者作为观察组,另选取同时段来院做体格检查的80例健康者作为对照组。分别检测两组研究对象的血清UCH-L1和GFAP的表达水平。结果:UCH-L1诊断脑梗死的敏感度为75.0%,特异度为87.5%;GFAP诊断脑梗死的敏感度为81.3%,特异度为90.0%。UCH-L1和GFAP的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积分别为0.670及0.757。两组研究对象在年龄、性别、饮酒、吸烟、糖尿病、高脂血症等一般情况中比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者患高血压的比例明显高于对照组(P<0.05);经Spearson/Pearson分析显示血清UCH-L1与GFAP水平与高血压呈正比,与性别、年龄、糖尿病、高血脂、饮酒、吸烟等因素无相关性;观察组患者不同发病时间一般资料的比较,差异无统计学意义(P>0.05),血清UCH-L1和GFAP表达水平明显高于对照组(P<0.05);在不同发病时间两组患者血清UCH-L1和GFAP表达水平差异无统计学意义(P>0.05);轻、中、重型3组患者的血清UCH-L1和GFAP表达水平高于对照组(P<0.05);中、重型患者血清UCH-L1和GFAP表达水平高于轻型(P<0.05);观察组患者在不同发病时间里血清UCH-L1和GFAP表达水平与梗死灶大小差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果示血清UCH-L1和GFAP表达水平呈正相关(r=0.634,P=0.001)。结论:在急性脑梗死患者中早期血清UCH-L1和GFAP的表达水平明显升高,与脑梗死的病情严重程度有一定的相关性,可为临床上早期诊断及治疗提供依据。

pH值、乳酸、神经烯醇化酶及泛素羧基末端水解酶L1在早产儿脑损伤中的意义

目的探讨动脉血气pH值、乳酸、神经烯醇化酶(NSE)及泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)水平在早产儿脑损伤中的意义。方法选择符合早产儿脑损伤诊断标准的45例作为观察组,50例无脑损伤早产儿为对照组,所有病例均在生后第1、7天取动脉血查血气分析,并留取静脉血标本检测NSE和UCH-L1。结果生后第1天和第7天两组间pH值的异常率差异有统计学意义(P<0.05),观察组第1天与第7天pH值异常比例比较,差异有统计学意义(P<0.05),对照组第1天与第7天pH值异常比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组第1天乳酸值比较差异有统计学意义(P<0.05),两组第7天乳酸值比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组第1天和第7天乳酸值比较,差异有统计学意义(P<0.01)。生后第1天和第7天两组间NSE和UCH-L1差异有统计学意义(P<0.01),观察组第1天NSE、UCH-L1和第7天比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论检测动脉血气、NSE及UCH-L1能够反映早产儿脑损伤,为早期干预提供理论依据。

脑梗死患者急性期血清泛素羧基末端水解酶-1及神经胶质原纤维酸性蛋白水平的变化

目的探讨泛素羧基末端水解酶-1（UCH-L1）、神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）在脑梗死急性期水平的变化。方法回顾性纳入2011年3月至2012年6月于首都医科大学宣武医院神经内科门诊、急诊和卒中筛查工程基地及北京市仁和医院神经内科病房就诊的早期脑梗死患者95例作为脑梗死组,并选择同期在体检中心接受体检的61名非卒中对象作为对照组。测定脑梗死组及脑梗死发病不同时间组（发病〈12 h组和发病12-24 h组）及美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）不同评分组（NIHSS 0-4分组和NIHSS 5-19分组）和对照组人群的血清UCH-L1、GFAP水平并进行各组间比较。构建受试者工作特征（ROC）曲线,获取相关参数在脑梗死诊断中的阳性与阴性的临界值及诊断敏感度与特异度。结果脑梗死组血清UCH-L1、GFAP均高于对照组[0.13（0.09,0.21）μg/L比0.05（0.02,0.13）μg/L,0.030（0.008,0.130）μg/L比0.004（0.004,0.020）μg/L;Z值分别为3.62、4.95,均P〈0.01];NIHSS评分5-19分组血清UCH-L1、GFAP水平高于NIHSS评分0-4分组[0.12（0.08,0.21）比0.09（0.08,0.18）,0.07（0.01,0.11）比0.04（0.01,0.10）;均P〈0.05]。发病12-24 h组血清UCH-L1、GFAP水平与发病〈12 h组差异无统计学意义[0.12（0.08,0.21）μg/L比0.09（0.08,0.18）μg/L,0.030（0.010,0.110）μg/L比0.040（0.008,0.100）μg/L;均P〉0.05]。UCH-L1、GFAP诊断急性脑梗死的ROC曲线分析结果显示,当血清UCH-L1≥0.18μg/L时,UCH-L1的敏感度、特异度分别为68%、74%;当血清GFAP≥0.11μg/L时,GFAP的敏感度和特异度分别为70%、86%;UCH-L1、GFAP诊断脑梗死的ROC曲线下面积分别为0.64及0.71。结论血清UCH-L1、GFAP水平在脑梗死急性期时有明显变化。血清UCH-L1、GFAP水平与卒中的严重程度可能具有一定相关性。

泛素C末端水解酶L1对神经元的保护作用

泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)是一种在脑内高度表达,具有泛素水解酶、泛素连接酶和稳定泛素单体功能的去泛素化酶.UCH-L1参与维持神经元突触的正常形态及功能,并能够缓解β-淀粉样蛋白诱导的长时程增强(LTP)缺失及记忆障碍;此外,UCH-L1的突变体I93M与家族性帕金森氏病相关,而UCH-L1的S18Y多态性则对神经元具有保护作用.通过研究UCH-L1的结构、功能及其在神经系统的作用机制,可以为阿尔茨海默病、帕金森氏病等神经退行性疾病的治疗提供相关思路和借鉴.

高压氧治疗创伤性脑损伤的临床疗效及对血清NGAL和泛素羧基末端水解酶L1表达的影响

目的评价高压氧辅助治疗创伤性脑损伤患者的临床疗效及对血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)和泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)表达的影响。方法选择2018年4月至2019年4月入新疆医科大学第一附属医院诊断创伤性脑损伤患者68例,其中其中男性46例,女性22例;年龄23~69岁,平均年龄45.9岁;体质量(68.6±8.9) kg;格拉斯哥昏迷评分(GCS)3~11分,平均GCS为8.4分;发病时间为(6.8±2.5) h。随机分为对照组和观察组,每组34例。对照组常规外科手术和药物治疗,观察组联合高压氧辅助治疗,疗程为1个月。对比两组临床疗效,治疗前后血清氧化应激指标包括NGAL、基质金属蛋白酶(MMP)-9、脑氧摄取率(CERO2)和活性氧(ROS)水平,神经营养因子包括UCHL1、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S100-β水平。结果观察组总有效率显著高于对照组(94.1%vs 76.5%;P <0.05)。两组治疗后血清氧化应激指标NGAL、MMP-9和ROS水平较治疗前降低[观察组:(63.5±22.4) ng/mL vs (125.3±45.6) ng/mL;(68.5±21.2) ng/mL vs (168.8±55.6) ng/mL;(16.8±6.3) U/mL vs (27.4±7.9) U/mL。对照组:(88.9±23.5) ng/mL vs (123.8±44.9) ng/mL;(96.3±25.7) ng/mL vs (165.8±52.3) ng/mL;(21.2±6.6) U/mL vs (26.8±7.5) U/mL],CERO2增加[观察组:(39.6±12.2)%vs (30.3±9.2)%;对照组:(35.2±10.3)%vs (30.6±9.5)%],神经营养因子UCH-L1、NSE和S100-β水平较治疗前降低[观察组:(201.3±46.8) ng/mL vs (328.6±75.4) ng/mL;(167.8±35.8) ng/mL vs (267.9±65.3) ng/mL;(85.6±25.7) ng/mL vs (168.9±48.7) ng/mL。对照组:(256.4±53.2) ng/mL vs (326.5±65.8) ng/mL;(203.2±46.3) ng/mL vs (265.3±52.7) ng/mL;(112.3±35.6) ng/mL vs (165.9±45.3) ng/mL],且观察组较对照组改善更明显(P <0.01)。结论高压氧辅助治疗创伤性脑损伤患者有较好的安全性和有效性,可明显抑制中枢神经氧化应激和神经营养因子释放和表达。

3%高渗盐水对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶与泛素羧基末端水解酶-L1水平的影响

目的分析3%高渗盐水对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)与泛素羧基末端水解酶(UCH)-L1水平的影响。方法重型颅脑损伤患者76例按抽签法随机分为试验组[采用静脉输注3%高渗盐水(HTS)]和对照组[采用静脉输注20%甘露醇(MT)]各38例,比较两组血清NSE与UCH-L1蛋白含量水平及预后。结果试验组入院后1、3、5和7 d的颅内压、NSE、UCH-L1含量显著低于对照组(P<0. 05)。试验组良好和中残的预后病例数显著高于对照组,重残、植物状态和死亡的预后病例数显著低于对照组(P<0. 05)。试验组肺部感染、消化道出血、电解质紊乱、肾功能障碍、心律不齐和血糖的并发症病例数显著低于对照组(P<0. 05)。结论与20%MT相比,3%HTS能降低重型颅脑损伤患者血清NSE与UCH-L1含量水平,提高患者预后恢复情况。

小儿主动脉缩窄围术期泛素羧基末端水解酶L1的变化与临床意义

目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)和非CPB下行手术的主动脉缩窄患儿中血清泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin carboxyl-terminal esterase-L1,UCH-L1)浓度变化,评价UCH-L1是否是一个主动脉弓部手术后CPB相关脑损伤的预测指标。方法 2012年1月和2013年6月首都医科大学附属北京儿童医院共39例主动脉缩窄患儿接受了主动脉成型手术;其中A组17例未行CPB,B组22例应用选择性脑灌注分别在6个时间点(麻醉诱导后,关胸,术后2、8、24、48 h)收集血清标本,采用酶联免疫吸附法分别测定UCH-L1、神经胶质蛋白S-100β和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)浓度。在术后8 h,拔除气管插管后6 h和出院前进行神经系统功能评分。结果 2组血清中UCH-L1浓度在术前基本相同[A组(0.184±0.066)μg/L vs B组(0.194±0.067)μg/L]。B组术后2 h后血清UCH-L1浓度较A组明显升高[A组(0.238±0.067)μg/L vs B组(0.327±0.151)μg/L,P<0.05],并于术后8 h达到高峰。在术后24 h,2组血清UCH-L1浓度差异无统计学意义[A组(0.208±0.078)μg/L vs B组(0.201±0.081)μg/L,P>0.05]。B组血清UCH-L1的峰值浓度和CPB时间明显相关(r=0.575,P=0.005)。术后所有患者均未出现持续存在的严重神经系统合并症。结论与非CPB手术相比,应用选择性脑灌注的小儿主动脉弓部手术可引起血清UCH-L1浓度显著升高,并且与CPB时间密切相关。UCH-L1可以作为一个CPB相关脑损伤诊断的潜在生物标志物。

重症缺血性脑卒中病人血清泛素羧基末端水解酶1的变化趋势及其临床意义

目的探讨重症缺血性脑卒中病人血清泛素羧基末端水解酶1(UCH-L1)的变化趋势及其临床意义。方法收集33例重症缺血性脑卒中病人(SIS组)和26例非重症缺血性脑卒中病人(Non-SIS组),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测病人入院时、第1天、第3天、第5天、第7天血清UCH-L1浓度;分析UCH-L1与急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)的相关性;比较重症缺血性脑卒中组30 d后预后不良组和预后良好组UCH-L1的变化。结果两组血清UCH-L1均从入院时开始增高,到第3天达高峰,之后开始下降。SIS组入院时、入院第1天、第3天、第5天UCH-L1浓度均高于Non-SIS组,差异有统计学意义(P<0.05)。病情越重,APACHEⅡ评分越高,UCH-L1与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.878,P=0.000)。重症缺血性脑卒中病人30 d后预后不良组入院时、第1天、第3天UCH-L1浓度均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);第5天、第7天UCH-L1浓度仍高于预后良好组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论结合APACHEⅡ评分和外周静脉血UCH-L1浓度可以较好地早期判断重症缺血性脑卒中病人的病情发展及预后。

泛素羟基末端水解酶L1在蛛网膜下腔出血患者脑脊液中的表达变化及预后意义

目的泛素羟基末端水解酶L1（ubiquitin carboxyl hydrolase L1,UCH-L1）是一种神经元细胞质蛋白。脑脊液中UCH-L1的升高提示着脑损伤的发生。文中探讨蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）后脑脊液中UCH-L1浓度的变化及预后意义。方法回顾性分析2014年8月至2015年2月期间南京军区南京总医院神经外科收治的40例动脉瘤性SAH患者临床资料。分别统计分析患者蛛网膜下腔出血后1～3 d、5～7 d以及8～10 d通过腰椎穿刺采集的脑脊液报告结果;另以10例无神经系统病史且接受椎管内麻醉患者的脑脊液结果作为对照。比较ELASA法测定的脑脊液中UCH-L1含量。分析UCH-L1浓度的变化水平与患者6个月改良Rankins评分（MRS）之间关系。结果与对照组相比,SAH患者脑脊液中UCH-L1含量在1～3 d、5～7 d以及8～10 d均显著升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。患者SAH后与6个月时预后比较,脑脊液中UCH-L1水平在5～7 d（CC=0.691,P=0.001）和8～10 d（CC=0.583,P=0.03）均呈明显相关,1～3 d脑脊液中UCH-L1水平与预后无明显相关（CC=0.364,P=0.08）;与不良预后患者相比,预后良好的患者在5～7 d及8～10 d时UCH-L1水平较低,且差异有统计学意义（P〈0.05）。二元logistic回归分析结果显示,SAH后5～7 d较高的UCH-L1水平提示不良预后（P=0.003）。结论 SAH后脑脊液UCH-L1水平升高,且5～7 d脑脊液UCH-L1水平可能预示了病情的严重程度和预后。

泛素羧基末端水解酶L1在氟西汀抑制大鼠肺动脉高压中的作用

目的研究泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)在氟西汀抑制野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压中的作用。方法用野百合碱(60 mg·kg-1)建立肺动脉高压大鼠模型,用低剂量(2 mg·kg-1·d-1)或高剂量(10 mg·kg-1·d-1)的氟西汀进行干预,观察各组大鼠血流动力学,肺组织与肺小动脉形态,以及UCH-L1蛋白表达与核因子κB(NF-κB)核转位的变化。结果野百合碱诱导大鼠肺动脉压力升高、肺动脉重构、肺组织炎症反应、肺组织UCH-L1表达减少以及NF-κB活性增加。氟西汀剂量依赖地抑制这些变化。但是各组之间大鼠肺动脉UCH-L1蛋白表达差异无显著性。结论氟西汀抑制野百合碱诱导的大鼠肺组织炎症反应,与上调的UCH-L1蛋白抑制NF-κB活性有关。

泛素羧基末端水解酶L1基因S18Y多态性与散发性阿尔茨海默病的相关性分析

目的探讨泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)基因的S18Y多态性在散发性阿尔茨海默病(AD)发病机制中的作用。方法利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测116例散发性AD患者和123例正常人UCH-L1基因S18Y多态性分布后,进行病例-对照相关分析。结果S18Y多态性等位基因及基因型频率在AD组和正常对照组差别无统计学差异;按发病年龄对AD组进行分层后,亦未显示S18Y多态性与散发性AD相关;按性别分层后,女性AD组Y等位基因和YY基因型频率明显低于女性正常对照组(分别为P=0.003和P=0.015)。结论Y等位基因和YY基因型在女性对散发性AD的发病可能有一定的保护作用,机制可能与多态性引起的UCH-L1功能改变及不同的危险因素相互作用有关。

大骨瓣开颅减压术联合银杏达莫注射液治疗重型颅脑损伤临床疗效及其对血清泛素羧基末端水解酶L1、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体水平影响

目的探讨大骨瓣开颅减压术联合银杏达莫注射液治疗重型颅脑损伤患者的临床疗效及其对血清泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)水平的影响。方法选取自2018年1月至2020年2月收治的86例重型脑损伤患者为研究对象。采用随机数字表法将患者分为A组与B组,每组各43例。两组患者均给予大骨瓣开颅减压术治疗,B组患者在A组治疗基础上联合银杏达莫注射液治疗,比较两组患者的临床疗效,神经功能及血清UCH-L1、suPAR水平等;观察患者不良反应的发生情况。结果B组患者的良好预后率为69.8%(30/43),显著高于A组的37.2%(16/43),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者的格拉斯哥昏迷评分(GCS)、格拉斯哥预后评分(GOS)、日常生活活动能力(ADL)量表、爱泼沃斯嗜睡量表(ESS)均显著升高,且B组患者GCS、GOS、ADL、ESS高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者的UCH-L1、suPAR水平均显著下降,且B组患者的UCH-L1、suPAR水平显低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者的白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)均显著下降,且B组患者的IL-1β、TNF-α、IL-6水平明显低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的不良反应(恶心、头晕以及皮肤过敏等)发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论大骨瓣开颅减压术联合银杏达莫注射液治疗重型颅脑损伤,临床疗效较佳,安全性较好,患者血清UCH-L1、suPAR水平均明显下降。

泛素羧基末端水解酶1基因缺失对雌性小鼠生殖系统发育的影响

目的研究泛素羧基末端水解酶L1 (ubiquitin C-terminal hydrolase L1,UCH-L1)基因缺失对雌性小鼠生殖系统的影响。方法利用阴道涂片、免疫组织化学、蛋白质印迹和RNA干扰等方法,分析UCH-L1基因缺失对小鼠卵巢功能及卵泡发育的影响。结果 UCH-L1基因缺失纯合子成年雌性小鼠的体质量降低,运动困难,且子宫偏细。在UCH-L1基因缺失纯合子小鼠的卵巢和子宫中检测不到UCH-L1蛋白表达,卵巢体积明显小于杂合子小鼠,其卵巢皮质层存在一些原始卵泡或闭锁卵泡,没有成熟卵泡和黄体。雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)、黄体生成素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)及孕酮受体(progesterone receptor,PR)等生殖关键受体在UCH-L1缺失纯合子小鼠和杂合子小鼠卵巢中都有表达,其中纯合子小鼠卵巢中ER的表达水平明显低于杂合子小鼠。通过RNA干扰的方法下调生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞中UCH-L1的表达,能明显降低卵母细胞的成熟率。结论 UCH-L1基因缺失雌性小鼠不具备形成成熟卵泡及排卵的能力,卵巢中ER表达量显著降低。推测UCH-L1有可能通过下调卵巢中ER的表达,影响卵母细胞成熟及排卵过程。

泛素羧基末端水解酶L1C90S和I93M点突变不影响小鼠卵母细胞成熟

目的通过观察泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)点突变蛋白与野生型蛋白过量对小鼠卵母细胞成熟的影响,并分析其在小鼠卵母细胞离体成熟过程中的作用及作用方式。方法通过原核重组蛋白技术制备UCHL1点突变(C90S和I93M)和野生型蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白,通过显微注射技术将UCHL1野生型蛋白与GST的融合蛋白、UCHL1点突变蛋白与GST的融合蛋白、GST、PBS分别注射到小鼠未成熟卵母细胞,或在体外培养基中添加UCHL1野生型蛋白与GST的融合蛋白,分析野生型UCHL1过量、UCHL1(I93M)点突变蛋白添加及泛素水解酶活性缺失的UCHL1(C90S)点突变蛋白添加对卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率的影响。分离UCHL1(I93M)点突变小鼠与野生型小鼠的生发泡期卵母细胞,体外培养3 h后比较其GVBD率。结果显微注射UCHL1野生型蛋白及其点突变体与GST的融合蛋白的各组之间、注射GST组、注射PBS组卵母细胞GVBD率差异均无统计学意义,在培养基中添加UCHL1蛋白与GST的融合蛋白组卵母细胞GVBD率与无注射无添加对照组相比差异也无统计学意义(P均>0.05)。注射UCHL1(C90S)与GST的融合蛋白组有少量生发泡期卵母细胞体外发育为MⅡ期卵母细胞后呈现极体较对照组偏大的现象。UCHL1(I93M)点突变小鼠生发泡期卵母细胞体外GVBD率与野生型小鼠比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在小鼠卵母细胞中添加外源性UCHL1、有致病作用的UCHL1(I93M)突变体或泛素水解酶活性丧失的UCHL1(C90S)突变体均不影响卵母细胞成熟的GVBD进程,UCHL1(I93M)点突变小鼠卵母细胞GVBD率亦无异常,但UCHL1(C90S)点突变可能影响极体的形成。

抑制泛素羧基末端水解酶L1对小鼠脑缺血/再灌注损伤的影响

目的评估抑制泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)对小鼠脑缺血/再灌注损伤的影响。方法将雄性BALB/c小鼠随机分为假手术(sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、UCHL1小干扰RNA(siRNA)组和scramble si RNA(control)组,每组10只小鼠。采用小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)60 min后再灌注24 h建立I/R模型。其中si RNA组和control组在MCAO前24 h将10μl UCHL1 si RNA或scramble si RNA通过侧脑室注入脑内。采用RTPCR和Western blotting方法检测各组小鼠脑组织中UCHL1表达;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法评估各组小鼠脑梗死体积和水肿率;采用神经行为学评分法评估各组小鼠神经症状评分。结果与sham组相比,I/R组缺血半影区UCHL1 m RNA和蛋白水平显著增高(P<0.05);而si RNA组UCHL1蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);与此同时,I/R组小鼠脑梗死体积、水肿率及神经行为学损伤明显增加,而si RNA组小鼠脑梗死体积和水肿率及神经行为学损伤进一步加重(P<0.05)。结论抑制UCHL1可加重小鼠脑缺血/再灌注损伤。提示,MCAO后诱导UCHL1表达对小鼠脑缺血/再灌注损伤具有保护作用。

泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)和阿尔茨海默病(AD)的关系

阿尔茨海默病(AD),又名老年性痴呆,是在老年期发生的一种中枢神经系统变性疾病,其发病机制尚未完全明确。在阿尔茨海默病疾病环境下,神经细胞中蛋白的降解是受损的。本文拟讨论对维持蛋白酶体系统正常功能起重要作用的泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)在阿尔茨海默病发病机制中的作用。

泛素羧基末端水解酶L1基因S18Y多态性与脑淀粉样血管病的关系

目的探讨中国汉族人群泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)基因的S18Y多态性在脑淀粉样血管病(CAA)发病机制中的作用。方法利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测40例经病理学证实的CAA患者和40例健康人UCH-L1基因S18Y多态性分布后,进行病例-对照相关分析。结果 S18Y多态性YY基因型频率在CAA组(22.5%)和健康对照组(12.5%)差异无统计学意义(χ2=1.385,P=0.205);SY基因型频率在CAA组(47.5%)和对照组(25.0%)差异有统计学意义(χ2=4.381,P=0.033);Y等位基因频率在CAA组(46.2%)和对照组(25.0%)差异有统计学意义(χ2=7.876,P=0.005);SY基因型频率、Y等位基因频率与CAA呈正相关(OR=1.900,95%CI:1.036～4.595;OR=1.850,95%CI:1.143～2.140)。结论中国汉族人群L1(UCH-L1)基因的S18Y多态性的杂合子SY可能是CAA的遗传易感性基因型,Y等位基因携带者也对CAA有较高的遗传易感性。

重型颅脑损伤急性期颅内压变化与泛素C末端水解酶L1、神经元特异性烯醇化酶血清浓度的关系

目的探讨重型颅脑损伤患者急性期颅内压(ICP)变化与泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达的关系。方法选择32例重型颅脑损患者,记录其6、12、24、48及72 h ICP变化,以及UCHL1、NSE浓度。结果 72 h内UCH-L1血浆浓度与ICP呈正相关(≥0.466,均<0.05),48 h内NSE血浆浓度与ICP呈正相关(≥0.417,均<0.05)。结论早期检测UCH-L1、NSE对ICP变化的判断有重要的临床意义。