早期糖尿病肾病泛素-核糖体融合蛋白52和尿微量清蛋白关系研究

目的探讨泛素-核糖体融合蛋白52(UBA52)在早期糖尿病肾病(DN)患者中的表达及其与尿微量清蛋白(MAU)的关系。方法选取2012年2月—2013年3月新疆医科大学第五附属医院收治的糖尿病患者20例(糖尿病组),DN患者59例(DN组)。另选取同期在本院体检健康者22例作为对照组。采用免疫透射比浊法检测3组受试者MAU,采用ELISA法检测血UBA52、尿UBA52。结果 3组性别、年龄、BMI比较,差异均无统计学意义(P>0.05);3组血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组血UBA52、尿UBA52、尿蛋白定量和MAU比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中DN组血UBA52、尿UBA52、尿蛋白定量和MAU均高于对照组和糖尿病组,糖尿病组尿蛋白定量、MAU均高于对照组(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,MAU和糖化血红蛋白影响DN患者尿UBA52水平(P<0.05)。结论 DN患者血UBA52、尿UBA52水平升高,MAU是尿UBA52水平的影响因素。

血清泛素-核糖体融合蛋白52联合α-klotho蛋白对早期糖尿病肾病的诊断价值

目的探讨血清泛素一核糖体融合蛋白52（UbA52）联合α-klotho蛋白测定对早期糖尿病肾病（DN）诊断的意义。方法选取2015年10月～2016年9月于我院住院的2型糖尿病（T2DM）患者77例，根据估算的肾小球滤过率（eGFR）并结合肾脏损害程度的Mogensen分级标准，将其分为单纯2型糖尿病组（T2DM组）35例和2型糖尿病早期肾病组（DN组）42例，另选取同期我院门诊体检的健康人群30例为对照组（NC组），检测各组的血清UbA52、d—klotho蛋白、24h尿微量白蛋白（mAlb）水平，计算eGFR并进行比较分析。结果T2DN组患者血清UbA52和24h尿mAlb水平明显高于NC组和T2DM组，且α-klotho蛋白和eGFR水平明显低于NC组和T2DM组（P〈0．05）。T2DN组患者血清UbA52与24h尿mAlb呈正相关（r=0．478，P〈0．05），与eGFR呈负相关（r=-0．529，P〈0．05）；α-klotho蛋白与24h尿mAlb呈负相关（r=-0．593，P〈0．05），与eGFR呈正相关（r=0．511，P〈0．05）。结论血清UbA52和α-klotho蛋白可能作为DN早期诊断的新标记物，对早期DN的发现和治疗有重要意义。

泛素-核糖体融合蛋白52——糖尿病肾病的早期生物标志物

目前,泛素-核糖体融合蛋白52(UbA52)是对早期糖尿病肾病(DN)有重要诊断价值的生物标志物。UbA52由一种泛素编码基因UbA52翻译表达,其可能通过参与氧化应激及泛素-蛋白酶体途径(UPP),从而参与早期DN的发病。UbA52水平与体内血糖水平呈正相关,并仅表达于肾小管;而尿中UbA52的水平直接与DN的关系密切。目前已被认为是DN早期诊断的标志物,并且基于尿蛋白组学技术的这一领域正在飞速发展。

糖尿病视网膜病变患者检测尿泛素-核糖体融合蛋白52的临床意义

目的探讨糖尿病视网膜病变患者检测尿泛素-核糖体融合蛋白52的临床意义。方法收集该院内分泌科、肾内科、眼科2016年1月—2019年12月住院的2型糖尿病患者共264例,将其分为非DR组(无视网膜病变的糖尿病患者)50例,NPDR(背景型糖尿病视网膜病变)组156例、PDR(增殖型糖尿病视网膜病变)组58例,NPDR组根据病变分期情况细分为3个亚组:NPDR1组(Ⅰ期)52例、NPDR2组(Ⅱ期)52例、NPDR3组(Ⅲ期)52例;并选取对照组(健康体检者)100名。通过检测各组患者的尿UbA52、尿白蛋白与肌酐比值(ACR)、尿微量白蛋白(Alb)、血CysC、血肌酐(Scr)等指标,比较不同组别各肾损害指标的差异情况,再将264例糖尿病患者的尿UbA52根据4分位距分为4个等级,采用Spearman秩相关分析方法探讨尿UbA52与糖尿病视网膜病变程度之间的相关关系。结果尿ACR、尿Alb、血CysC及血Scr均只在NPDR3组和PDR组与对照组相比组间均数差异有统计学意义(P<0.05)。而尿UbA52在NPDR1组、NPDR2组、NPDR3组及PDR组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),同时各组间的均数采用LSD多重比较后差异有统计学意义(P<0.05),从均值上看,随着糖尿病视网膜病变程度的加重,各组尿UbA52的均数逐渐升高。糖尿病患者的尿UbA52与视网膜病变程度的Spearman秩相关分析结果显示Spearman秩相关系数为0.681,呈显著正相关(P<0.001)。结论糖尿病患者尿UbA52随视网膜病变程度的加重而逐渐升高,提示其与糖尿病视网膜病变呈现较好的平行关系,尿UbA52与DR的发生具有显著的相关性,故而尿UbA52是可作为预测DR、DN发生发展的一个临床生物指标。尿标本易于取得,尿UbA52检测方法成熟,易于临床推广。

泛素-核糖体融合蛋白52基因沉默对高糖环境下大鼠肾小管上皮细胞转化生长因子β1/Smad信号通路的影响

目的 探讨RNA干扰（RNAi）介导泛素-核糖体融合蛋白52（UBA52）基因沉默对高糖环境下鼠肾小管上皮细胞NRK-52E转分化信号通路转化生长因子β1（TGF-β1）/Smad的影响.方法 首先根据培养基葡萄糖浓度将NRK-52E细胞分为4组：正常对照组（5.6 mmol/L葡萄糖）、高渗对照组（5.6 mmol/L葡萄糖＋24.4 mmol/L甘露醇）、葡萄糖中浓度组（20 mmol/L葡萄糖）、葡萄糖高浓度组（30 mmol/L葡萄糖）并分别干预48 h,通过实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测并比较各组UBA52、Smad7、TGF-β1水平,观察葡萄糖浓度对上述指标的表达影响.然后采用三个不同基因序列的UBA52小干扰RNA（UBA52 siRNA）分别转染NRK-52E细胞,通过荧光定量PCR筛选出最佳转染效果的UBA52 siRNA基因序列,并确定最佳转染时间及转染剂量.然后将NRK-52E细胞分为3组：空白对照组（30 mmol/L葡萄糖）、阴性对照组（30 mmol/L葡萄糖＋无关RNA转染组）及转染组（30 mmol/L葡萄糖＋UBA52 siRNA转染）.48 h后实时荧光定量PCR法分别检测各组UBA52、TGF-β1、Smad7的mRNA表达变化,Western blotting法检测TGF-β1、Smad2/3、Smad7的蛋白表达.通过随机区组方差分析对上述指标进行统计学分析.结果 葡萄糖干预实验中正常对照组、高渗对照组、葡萄糖中浓度组、葡萄糖高浓度组肾小管上皮细胞UBA52、TGF-β1、Smad7 mRNA的表达量差异均有统计学意义（F=60.914、65.112、29.390,均P〈0.05）;葡萄糖中浓度组及高浓度组的UBA52、TGF-β1表达均明显高于正常对照组及高渗对照组,而Smad7的表达则明显低于正常对照组及高渗对照组.转染实验中空白对照组、阴性对照组及转染组TGF-β1 mRNA表达量分别为1.00±0.04、0.98±0.04、0.49±0.14,差异有统计学意义（F=26.364,P〈0.001）,转染组明显低于其他2组;3组Smad7 mRNA表达量分别为1.00±0.12、1.05±0.17、2.24±0.31,差异有统计学意义（F=22.816,P〈0.001）,转染组明显高于其他2组.3组TGF-β1蛋白表达量分别为0.676±0.357、0.613±0.011、0.184±0.073,差异有统计学意义（F=96.433,P〈0.01）,转染组表达量最低;Smad2/3的蛋白表达量分别为0.68±0.10、0.63±0.05、0.27±0.15,差异有统计学意义（F=12.194,P〈0.05）,转染组明显低于其他2组;Smad7的蛋白表达量分别为0.52±0.05、0.55±0.12、0.83±0.06,3组差异有统计学意义（F=12.154,P〈0.05）,转染组表达量最高.结论 干预高糖环境下鼠肾小管上皮细胞转分化信号通路TGF-β/Smad可能成为糖尿病肾病肾间质纤维化新的干预靶点.

尿泛素-核糖体结合蛋白52、尿微量清蛋白、尿视黄醇结合蛋白联检在早期糖尿病肾损伤诊断中的价值

目的探讨尿泛素-核糖体结合蛋白(UBA)-52、尿微量清蛋白(U-m Alb)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)在评估早期糖尿病肾损伤的价值。方法选择224例糖尿病患者及同期50名健康体检老年人,依照临床诊断结果分为糖尿病肾损伤尿蛋白阳性组(A组)、糖尿病肾损伤尿蛋白阴性组(B组)、糖尿病无肾损伤组(C组),健康体检者为对照组;采集患者晨尿,检测UAB-52、Um Alb及RBP水平。结果 A组尿中UAB-52、U-m Alb、RBP水平均显著高于其余3组,B组均显著高于C组及对照组(P<0.05);A组尿中UAB-52、U-m Alb、RBP阳性检出率显著高于其余3组,B组均显著高于C组及对照组(P<0.05);单独检测尿中UAB-52、Um Alb、RBP水平的标准误显著高于三指标联合检测,且三指标联合检测敏感性显著高于单独检测一指标(P<0.05)。结论联合检测尿中UBA52、U-m Alb及RBP水平,可自多角度评估肾功能受损情况,弥补单一评估指标的局限性,明显提高诊断效能。

高糖对肾小管上皮细胞泛素-核糖体蛋白52与TGF-β/Smad信号通路mRNA表达的影响

目的探讨高糖对肾小管上皮细胞泛素-核糖体蛋白(ubiquitin-ribosomal protein 52,UBA52)与TGF-β/Smad信号通路mRNA表达的影响及其UBA52在肾小管上皮细胞转分化中的作用与可能机制。方法根据培养基葡萄糖浓度不同分成葡萄糖低浓度组(5.6 mmol/L葡萄糖)、葡萄糖+甘露醇组(5.6 mmol/L葡萄糖+24.6 mmol/L甘露醇)、葡萄糖中浓度组(20 mmol/L葡萄糖)、葡萄糖高浓度组(30 mmol/L葡萄糖),分别干预48 h。观察不同糖浓度对鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)形态的影响;实时荧光定量PCR检测并比较不同葡萄糖浓度下UBA52、Smad7、转化生长因子β1(TGF-β1)与α-SMA mRNA水平。结果高糖可致NRK-52E向成纤维细胞转分化;葡萄糖低浓度组、葡萄糖+甘露醇组、葡萄糖中浓度组、葡萄糖高浓度组肾小管上皮细胞UBA52 mRNA的表达分别为(1.002±0.075)、(0.092±0.083)、(1.994±0.146)、(2.160±0.210),差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1的表达分别为(1.003±0.089)、(1.180±0.060)、(1.214±0.169)、(2.158±0.266),差异有统计学意义(P<0.05);Smad7mRNA表达分别为(1.002±0.078)、(1.106±0.049)、(0.952±0.044)、(0.332±0.110),差异有统计学意义(P<0.05);α-SMA mRNA表达分别为(1.002±0.007)、(1.046±0.091)、(1.720±0.032)、(2.885±0.254),差异有统计学意义(P<0.05);伴随着葡萄糖浓度的升高,UBA52、TGF-β1、α-SMA mRNA表达逐渐增加,而Smad7 mRNA的表达逐渐下降。UBA52与TGF-β1 mRNA表达量呈正相关(r=0.58,P<0.05),与Smad7mRNA表达量呈负相关(r=-0.61,P<0.05)。结论肾小管上皮细胞泛素前体UBA52、TGF-β1、α-SMA mRNA表达呈葡萄糖浓度依赖性增加,而Smad7基因表达呈葡萄糖浓度依赖性下降,UBA52可能参与了高糖环境下肾小管上皮细胞TGF-β/Smad信号通路的调控,实现肾小管上皮细胞转分化。

酵母双杂交筛选与蛋白激酶CK2α′相互作用蛋白--泛素-52氨基酸融合蛋白的鉴定

蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶.为研究CK2α′亚基在精子发生中的作用机制,将构建于pACT2质粒的人睾丸cDNA文库和人蛋白激酶CK2α′为诱饵蛋白进行酵母双杂交实验.以初步筛选与人蛋白激酶CK2α′相互作用蛋白的阳性候选克隆,筛选获得8个阳性克隆,其中1个与人泛素-52氨基酸融合蛋白基因(UBA52)的cDNA序列有高度同源性(100%).GST pull-down实验在细胞外进一步证实了CK2α′与UBA52之间存在相互作用.本实验证明,人泛素-52氨基酸(UBA52)融合蛋白是人CK2α′亚基的相互作用蛋白,它们之间的相互作用对精子发生机制的影响尚不清楚,进一步分子机制研究正在进行中.

眼镜王蛇泛素融合蛋白基因和核糖体蛋白L30基因的克隆及分析

从广西产眼镜王蛇(Ophiophagushannah)毒腺中抽提总RNA,经mRNA纯化后构建眼镜王蛇毒腺cDNA文库。从所构建的cDNA文库中,随机筛选200个克隆测序,得到两个在进化上高度保守的基因:泛素融合蛋白基因(GenBank登录号为AF297036)和核糖体蛋白L30基因(GenBank登录号是AF297033)。前者cDNA的开放阅读框为387bp,后者为348bp。前者编码128个氨基酸残基组成的泛素融合蛋白前体;后者编码115个氨基酸残基组成的核糖体蛋白L30前体。由cDNA序列推导出的氨基酸序列分析表明,泛素融合蛋白前体包括N-末端的泛素结构域(76个氨基酸残基)和C-末端的核糖体蛋白L40结构域(52个氨基酸残基)。该蛋白为一高碱性蛋白,C末端含有一个“锌指”模式结构。与16个物种比较的结果表明,眼镜王蛇与脊椎动物的泛素融合蛋白氨基酸序列相似度较高,具有高度的保守性。

栗疫病菌泛素核糖体L40融合蛋白基因的克隆与分析

用酿酒酵母(Saccharyomyces cerevisae)泛素融合蛋白基因从COGEME(Consortium for the functional ge-nomics of microbial eukaryotes)植物病原菌EST(Expressed sequence tag)库中BLAST(Basic local alignment searchtool)得到栗疫病菌的泛素融合蛋白EST,设计引物从栗疫病菌cDNA中克隆到该基因并测序,得到在进化上高度保守的基因,该基因开放阅读框为387 bp,编码128个氨基酸残基组成的泛素融合蛋白前体;由cDNA序列推定的氨基酸序列分析结果表明,泛素融合蛋白前体包括氮末端的泛素结构域(76个氨基酸残基)和碳末端的核糖体蛋白L40结构域(52个氨基酸残基)。该蛋白为高碱性蛋白,碳末端含有一个"锌指"模式结构。与19个物种比较的结果表明,栗疫病菌与真菌泛素融合蛋白氨基酸序列相似度较高,具有高度的保守性。

人泛素-核糖体蛋白27a原核表达载体构建及表达

目的构建并表达携带谷胱甘肽S-转移酶(GST)标签的人泛素-核糖体蛋白S27a(UBRPS27a)原核表达载体。方法利用反转录聚合酶链反应从HL-60细胞中扩增RPS27A基因全长,克隆至pMD-19T载体中,酶切回收后插入原核表达载体pGEX4T-1,构建重组表达载体pGEX4T1-RPS27A,转化大肠埃希菌BL21,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达GST-UBRPS27a融合蛋白。结果经测序与酶切鉴定,重组质粒pGEX4T1-RPS27A构建正确;经重组质粒转化的BL21细菌诱导4h后可高效表达UBRPS27a融合蛋白。结论成功构建UBRPS27a原核表达载体,为进一步研究其结构、功能及其在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。

泛素—核糖体蛋白S27a基因的克隆、测序及其原核GST融合表达和纯化

目的:克隆泛素—核糖体蛋白S27a基因并在大肠杆菌细胞内高效表达,并纯化该蛋白。方法:从HL-60细胞中提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得泛素/核糖体蛋白S27a的编码区cDNA,将HindⅢ/NdeⅠ双酶切的PCR产物连接到同样双酶切的GST融合表达载体pGEXGST构建为融合表达质粒pGEXGST-S27a,转化感受态的大肠杆菌JM109实现质粒的扩增与纯化,经DNA测序确证后再转化感受态表达菌BL21,表达并纯化出融合蛋白。结果:(1)PCR扩增获得长约560bp的泛素—核糖体蛋白S27a基因片段。(2)SDS-PAGE证明,泛素—核糖体蛋白S27a-GST融合蛋白的分子量为43kDa。(3)通过过柱法纯化出泛素—核糖体蛋白S27a-GST融合蛋白。结论:成功克隆出泛素-核糖体蛋白S27a的基因,并在表达菌BL21中可见GST融合表达,并纯化出该融合蛋白,为进一步研究其功能获得了候选蛋白分子。

重组融合蛋白大肠杆菌不对称合成(R)-2-羟基-3-苯基丙酸

将来自于Lactobacillus plantarum的突变D-乳酸脱氢酶(D-LDH^(Y52V))和Candida boidinii的甲酸脱氢酶(FDH)进行融合,重组成双功能融合蛋白,为生物法合成(R)-2-羟基-3-苯基丙酸(D-PLA)提供新的方法。利用重叠延伸PCR技术,将对底物苯丙酮酸(PPA)亲合力更高的突变蛋白D-LDH^(Y52V)与FDH通过连接肽(Gly4Ser)3融合,将融合基因克隆至表达载体p ET-28a(+),并转化Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导得到高效表达。SDS-PAGE电泳分析结果表明,融合蛋白分子质量为79.7 k Da,在重组菌中获得了正确表达;酶活性测定结果表明,融合蛋白具有D-LDH和FDH的双重生物学活性。在不对称转化PPA合成(R)-2-羟基-3-苯基丙酸(DPLA)的应用中,融合蛋白体系比D-LDH^(Y52V)单独表达体系的D-PLA产量提高了40.71%。通过5 h底物分批补加发酵,D-PLA产量为17.34 g/L,底物转化率为77.64%,生产强度3.47 g/(L·h)。双功能融合蛋白增强了辅酶再生的效率,有效促进了(R)-2-羟基-3-苯基丙酸的不对称合成。

缺血性中风病急性期泛素融合降解蛋白的临床意义

在脑缺血发生的急性期,缺血、缺氧的程度越严重,神经元细胞死亡越多,细胞内重要非溶酶体蛋白水解途径泛素-蛋白酶体系统(UPS)功能受损越严重,泛素融合降解蛋白(UFD1)是UPS的重要组成部分,其作为与神经细胞凋亡相关的生物学指标则表现的相关性就越强,UFD1可能与缺血性中风病急性期神经功能缺损程度及证候程度、证候变化密切相关。在缺血性中风病急性期动态监测血清UFD1变化时同步利用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、缺血性中风证候评价量表进行中风病疾病、证候疗效动态评价,探讨生物学指标UFD1血清水平与NIHSS评分、证候评分的相关性,即可明确UFD1在中风病急性期中"病证"疗效评价中的价值。

β-1,3葡聚糖酶与糖体失活蛋白融合基因的制备及表达载体的构建

将大豆的 β - 1,3葡聚糖酶基因与玉米的核糖体失活蛋白基因通过一个 6个氨基酸的柔性短肽链连接起来 ,形成 1个融合蛋白。其中编码区基因长 1830bp ,共编码 60 9个氨基酸和 1个终止密码子。经过使用蛋白质分析软件Antheprot4 .3和Prosis(v5.0 0 )对融合蛋白的二级结构、理化特性、潜在信号肽断裂位点等方面进行分析表明 :融合蛋白较好的保持了原来的两个蛋白的各项理化特性 ,维持了两种蛋白的二级结构。将此基因克隆到质粒PBI12 1上 ,构建成植物表达载体PBI/GR。

核糖体蛋白S9在多发性骨髓瘤中的表达及对其细胞生物学功能的影响

目的明确核糖体蛋白S9(RPS9)在多发性骨髓瘤中的表达情况,并明确其对骨髓瘤细胞生物学特性的影响及相应机制。方法 选取10例健康志愿者骨髓单个核细胞(CON组)与30例多发性骨髓瘤患者骨髓CD138+细胞(CD138+组),实时荧光定量PCR检测RPS9在mRNA水平的表达,并选取3例CON与11例CD138+细胞,Westernblot检测RPS9在蛋白水平的变化,同时选取GSE19784数据集,检测RPS9的表达与患者总体生存率、核因子-κB(NF-κB)、类泛素蛋白修饰分子(SUMO)、泛素通路之间的关系。随后构建RPS9-短发夹RNA(shRNA)敲低载体,使用流式细胞仪检测感染效率、实时荧光定量PCR与Westernblot检测敲低效率后。RPMI8226分为CON与RPS9-shRNA组,使用膜联蛋白V别藻青蛋白/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡的变化、CCK8法检测细胞增殖的变化、PI染色法检测细胞周期的变化。并构建类泛素蛋白修饰分子特异蛋白酶1(SENP1)过表达载体,Westernblot确定过表达效率后,检测RPS9抑制后SENP1表达的变化,并在RPS9-shRNA中转染SENP1过表达载体,Westernblot检测CON、RPS9-shRNA、RPS9-shRNA-SENP1细胞中NF-κB通路P65、抑制因子κBα(IκBα)磷酸化水平的变化,膜联蛋白V/PI双染法检测细胞凋亡的变化。结果 RPS9在10例健康志愿者骨髓单个核细胞(CON)以及30例多发性骨髓瘤患者骨髓CD138+细胞中相对表达量分别为1.00±0.12和5.45±0.71(t=4.291,P=0.0036),Westernblot中大多数骨髓瘤CD138+细胞中RPS9呈现高表达,RPS9的高表达同时与患者髓外浸润相关,并在GSE19784数据集中与患者总体生存率相关。RPMI8226在感染CON与RPS9-shRNA慢病毒48h后,流式细胞仪证实两组细胞感染效率均在90%以上,实时荧光定量PCR与Westernblot证实RPS9在mRNA与蛋白水平的表达均受到抑制。RPMI8226CON与RPS9-shRNA感染病毒48h后,CON与RPS9-shRNA组细胞膜联蛋白V阳性细胞比例分别为3.47±0.37和18.60±1.64,RPS9-shRNA组显著高于CON组(t=9.015,P=0.0008)。在增殖中,CON组与RPS9-shRNA组在72h时增殖指数差异有统计学意义(t=6.846,P=0.0024)。而在细胞周期中,CON与RPS9-shRNA组在感染病毒48h时,G2期细胞比例分别为(29.28±3.42)%和(10.43±1.43)%,CON组显著高于RPS9-shRNA组,差异有统计学意义(t=9.329,P=0.0007)。RPS9的表达在GSE19784数据集中与SENP1正相关,并与IκBα编码基因NFKBIA呈负相关,Westernblot进一步证实RPS9的敲低能够抑制SENP1的表达,并抑制NF-κB亚基P65、抑制因子IKBα的磷酸化,促进IKBα的表达,而SENP1的过表达不仅能够阻碍这一效应,也能够使RPS9诱导的凋亡减少。结论 RPS9在多发性骨髓瘤CD138+细胞中高表达,且与患者总体生存率、髓外浸润相关。RPS9的抑制能够促进骨髓瘤细胞凋亡、细胞周期阻滞并抑制增殖。RPS9能够通过SENP1影响NF-κB通路的活化,并影响细胞的凋亡,提示SENP1可能为RPS9生物学效应的关键因素。

过表达血红素加氧酶-1、金属硫蛋白2A、泛素蛋白B、核糖体蛋白S27a对HepG2细胞增殖和侵袭力的影响

目的研究过表达目标蛋白(HMOX-1、MT2A、UBB、RPS27a)对人肝癌HepG2细胞增殖和侵袭力的影响。方法用目标蛋白的过表达质粒转染HepG2细胞株,用空载体转染HepG2作为对照组。应用MTT法测定细胞体外增殖能力;Transwell实验检测各组细胞的体外侵袭力。结果 MTT法结果提示过表达目标蛋白后,HepG2细胞株增殖能力较对照组明显增强,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell实验结果表明,过表达HMOX1、RPS27a后,HepG2细胞侵袭能力较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);过表达MT2A、UBB后,HepG2细胞侵袭能力与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论过表达目标蛋白可增强HepG2细胞的增殖和侵袭能力。

早期糖尿病肾病患者UBA52与ACR的关系

目的探讨早期糖尿病肾病患者血尿泛素核糖体融合蛋白52(UBA52)与尿白蛋白/尿肌酐比值(ACR)的关系。方法选择新疆医科大学第五附属医院2010年9月至2012年9月收治的糖尿病肾病患者59例(糖尿病肾病组),糖尿病患者20例(糖尿病组),另外选取同期健康体检者22例(正常对照组),检验各组受试者身高、体质量、尿肌酐、血尿UBA52、尿微量白蛋白、ACR、β2微球蛋白、α1微球蛋白及N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷(NAG)酶,计算ACR,比较血尿UBA52及各个相关指标在不同组间的差异,并采用相关分析及偏相关分析方法考察血尿UBA52与ACR的关系。结果糖尿病肾病组ACR、血尿Ub A52、尿α1微球蛋白、NAG酶高于正常对照组(P<0.05),糖尿病组尿α1微球蛋白、NAG酶高于正常对照组(P<0.05),糖尿病肾病组ACR、血尿Ub A52高于糖尿病组(P<0.05)。一般相关分析显示,尿UBA52与ACR、β2微球蛋白及NAG酶呈正相关,血UBA52与ACR呈正相关。剔除β2微球蛋白、α1微球蛋白及NAG酶干扰,偏相关分析结果显示,血尿UBA52与ACR仍呈正相关。结论早期糖尿病肾病患者血尿UBA52增多、ACR增高,两者呈正相关,提示早期糖尿病肾病患者UBA52表达增多与尿白蛋白增加有一定相关性。

UBA52在早期糖尿病肾病中的诊断价值

目的:探讨泛素核糖体融合蛋白52(UbA52)在糖尿病肾病早期中的诊断价值。方法:将收集到的59例早期糖尿病肾病患者作为DN组、20例单纯糖尿病患者作为DM组、22例健康人群作为对照组,分别测定3组研究对象的白蛋白/肌酐比值(ACR)、血UbA52、尿UbA52、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖甘酶(NAG)、α1微球蛋白、24h尿蛋白定量值,并分析相互之间的相关性。结果:3组研究对象的ACR、血UBA52、尿UBA52、NAG酶、α1微球蛋白、尿蛋白定量测定值差异均具有统计学意义(P<0.05)。对ACR值校正后进行偏相关分析,得出血UBA52与尿UBA52值呈显著的正相关关系(r=0.403,P<0.001)。结论:糖尿病肾病患者的血、尿UBA52测定值与ACR、24h尿蛋白定量具有显著的相关性,通过检测UBA52值对糖尿病肾病患者的疾病情况进行判断。

苦碟子注射液静滴辅助替米沙坦口服治疗早期糖尿病肾病效果观察

目的观察苦碟子注射液静滴辅助替米沙坦口服治疗早期糖尿病肾病的疗效。方法将148例早期糖尿病肾病患者随机分为观察组和对照组各74例。两组均接受糖尿病的常规治疗并口服替米沙坦;观察组加用苦碟子注射液30 m L,加入250 m L生理盐水静滴,1次/d。观察两组临床疗效,检测两组患者治疗前后血肌酐、24 h尿微量白蛋白泛素-核糖体融合蛋白52(Ub A52)、a-Klotho蛋白。结果观察组显效59例、有效14例、无效1例,总有效率98.6%。对照组分别为40、25、9例,总有效率87.8%。观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后血清肌酐和24 h尿微量白蛋白均较治疗前下降(P均<0.05)。观察组患者治疗后血清肌酐和24h尿微量白蛋白均低于对照组治疗后(P均<0.05)。与治疗前相比,两组患者治疗后血清Ub A52水平下降,a-Klotho蛋白水平升高(P均<0.05)。与对照组治疗后相比,观察组患者治疗后血清Ub A52水平更低,a-Klotho蛋白水平更高(P<0.05)。结论苦碟子注射液静滴辅助替米沙坦治疗早期糖尿病肾病效果好于单用替米沙坦。