NPL4靶向抑制剂双硫仑对T细胞肿瘤泛素-蛋白酶体通路相关基因表达的影响

目的我们前期的研究表明,双硫仑(disulfiram,DSF)通过核蛋白定位蛋白4同源物(nuclear protein localization protein 4 homolog,NPL4)介导的泛素-蛋白酶体通路发挥抗T细胞肿瘤[主要包括急性T淋巴白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)和T细胞淋巴瘤(T-cell lymphoma,TCL)]的作用。本研究旨在探讨双硫仑对T细胞肿瘤中泛素-蛋白酶体通路相关基因表达的调节作用,为T细胞肿瘤的精准靶向治疗提供依据。方法应用0.4μM双硫仑处理T-ALL细胞株Jurkat 48 h,采用转录组测序分析显著性差异表达的基因,并采用10例T细胞肿瘤样本(GZFPH数据集)进行实时荧光定量PCR验证差异基因相对表达水平。最后,从TARGET和GSE58445数据库中下载262例T-ALL和140例TCL的转录组测序数据进行生存分析。结果0.4μM双硫仑处理Jurkat细胞48 h后,在泛素-蛋白酶体通路中,有86个下调和35个上调的基因;其中,单因素Cox回归和生存曲线分析发现,仅有泛素结合酶E2 J1(ubiquitin conjugating enzyme E2 J1,UBE2J1)基因的低表达与TARGET和GSE58445数据集中T-ALL和TCL患者的不良预后相关(P<0.05)。将UBE2J1的表达水平、年龄和性别纳入单因素和多因素Cox回归分析,结果提示UBE2J1的低表达是T-ALL和TCL患者的独立预后影响因子(P<0.05)。结论双硫仑可调控UBE2J1基因的表达,其低表达与T细胞肿瘤患者的不良预后相关,为进一步阐明双硫仑的抗肿瘤作用及其调控的UBE2J1基因作为T细胞肿瘤的危险分层的分子标志物提供理论依据。

泛素-蛋白酶体通路在动脉粥样硬化中的作用

泛素-蛋白酶体通路是体内的重要调节通路,降解短命或异常的蛋白质,与多种疾病的病理过程相关。近年来发现泛素-蛋白酶体通路参与了多种病因学说导致的动脉粥样硬化发病过程,干扰泛素-蛋白酶体通路可能成为防治动脉粥样硬化的重要靶标。

消瘀泄浊饮对慢性肾衰竭动脉粥样硬化大鼠主动脉泛素-蛋白酶体通路组分表达的影响

目的:观察消瘀泄浊饮对慢性肾衰竭(CRF)动脉粥样硬化大鼠主动脉泛素-蛋白酶体通路(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)组分的影响。方法:40只SD大鼠随机选取正常对照组10只,其余大鼠采用5/6肾切除同时予高脂饮食制作CRF动脉粥样硬化大鼠模型,造模10周后检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),造模成功的大鼠随机分为3组:模型组、阿托伐他汀(立普妥)组、消瘀泄浊饮组,每组10只;给药8周后再分别检测血SCr、BUN水平,免疫组化法检测主动脉基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、泛素C(Ubc)、泛素接酶E2B(Ube2b)、蛋白酶体亚基A1蛋白(PsmA1)的表达,实时荧光定量PCR法检测主动脉Ubc、Ube2b、PsmA1mRNA表达量。结果:与模型组比较,消瘀泄浊饮组SCr、BUN显著降低(P<0.01),消瘀泄浊饮组主动脉MMP-9、Ubc、Ube2b、PsmA1蛋白以及Ubc、Ube2b、PsmA1mRNA的表达明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:消瘀泄浊饮可通过抑制活化的泛素-蛋白酶体通路而起到防治CRF大鼠动脉粥样硬化作用。

泛素-蛋白酶体抑制剂对血管平滑肌细胞凋亡和动脉粥样硬化的影响

泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin proteasome system,UPS)是真核细胞内蛋白质降解的核心途径,对细胞周期、炎症反应、细胞凋亡的调节起十分重要的作用。血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSM C)作为血管壁的重要细胞成分,其增殖与凋亡的失平衡是决定动脉粥样硬化发生、发展的关键环节。在VSM C中,细胞凋亡与UPS活性密切相关,且UPS对动脉粥样硬化各个阶段有显著的调节作用。泛素-蛋白酶体抑制剂(Ubiquitin-proteasome inhibitors,UPI)通过抑制凋亡相关蛋白的降解,从而调控VSMC的凋亡,影响动脉粥样硬化形成的各个阶段。本文综述了UPI对VSMC凋亡的影响及其在动脉粥样硬化各阶段的调节作用。

泛素-蛋白酶体系统与动脉粥样硬化性疾病的发生

泛素-蛋白酶体系统(ubiqutin proteasome system,UPS)广泛存在于真核细胞中,在维持细胞的生理功能方面,UPS起着非常重要的作用。它除了降解损伤的蛋白质,还与炎症、增殖和细胞凋亡相关,其在动脉粥样硬化性疾病中的作用涉及了动脉粥样硬化斑块发展的各个阶段。本文综述了UPS与动脉粥样硬化的关系以及蛋白酶体抑制剂在动脉粥样硬化疾病中的治疗前景。

泛素蛋白酶体通路及其与动脉粥样硬化斑块关联研究进展

泛素蛋白酶体系统(UPS)是细胞内非溶酶体途径蛋白降解通路,在生物体内负责大多数细胞周期过程中蛋白降解及异常蛋白降解,可维持蛋白质稳定状态、调节细胞程序性死亡、控制细胞周期、条件信号转导通路、介导受体内吞、I型抗原加工呈递和炎症反应等。当前相关研究显示,泛素蛋白酶体通路通过炎症机制促进动脉粥样硬化相关疾病的发生发展。故本文就UPS的组成及其在动脉粥样硬化发生发展中作用的新进展、前景做一综述。

泛素-蛋白酶体抑制剂对动脉粥样硬化的影响

目前很多研究证实,动脉粥样硬化是血管壁对各类损伤刺激的异常反应,是动脉壁的慢性炎症性疾病。炎性反应贯穿动脉粥样硬化形成和发展的每个阶段,且炎症机制还与动脉粥样硬化的多种并发症的产生存在密切关系。血管平滑肌细胞为血管壁的重要组成部分,在血管收缩及舒张方面起着重要的调节作用,它同时也分泌多种细胞因子和炎性介质。血管平滑肌细胞的炎症可诱导平滑肌细胞的增殖与迁移,最终导致血管动脉粥样硬化病变和血管外科手术后再狭窄等问题。泛素-蛋白酶体系统参与机体内炎性反应过程,且泛素-蛋白酶体抑制剂可通过抑制血管平滑肌的炎性反应,从而抑制动脉粥样硬化的发生。目前已证实,多种抗动脉粥样硬化药物具有抗炎功能,抗炎治疗已成为防治动脉粥样硬化的一种新策略。本文对泛素-蛋白酶体抑制剂对动脉粥样硬化的影响机制做一综述。

泛素蛋白酶体通路与动脉粥样硬化

泛素-蛋白酶体通路(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)是广泛存在于真核细胞中的,依赖ATP的选择性蛋白质降解的主要途径。泛素的主要功能是标记细胞中需要降解的蛋白质,使其被26S蛋白酶体识别和降解。UPP主要通过介导细胞中蛋白的降解而发挥调节作用。该通路的异常与许多疾病诸如肿瘤、遗传性疾病、神经退行性疾病、心血管疾病等密切相关。本文主要综述了UPP在动脉粥样硬化的发生,发展和复合病变中的作用。

阻断泛素-蛋白酶体通路诱导白血病细胞凋亡及机制探讨

泛素 蛋白酶体系统是真核细胞内降解调节因子等各种短寿蛋白的重要途径。本实验就阻断泛素化通路诱发白血病细胞凋亡及其机制进行了初步探讨。应用MTT法显示蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对多种白血病细胞系呈剂量依赖性的细胞杀伤作用。流式细胞仪检测提示细胞出现凋亡 ,并经DNA琼脂糖凝胶电泳和形态学观察得到进一步证实。通过对M 0 7e细胞裂解物做免疫印迹检测 ,发现在Z LLL CHO作用过程中Bcl 2蛋白被酶解及caspase 3酶原发生降解 ,色敏比色法检测显示caspase 3在凋亡过程中被激活。而同为bcl 2高表达的白血病细胞系KG 1a对Z LLL CHO诱导凋亡不敏感 ,提示不同细胞对阻断泛素化通路敏感与否与Bcl 2蛋白表达量无关 ,而可能与细胞内caspase 3的激活及bcl

泛素-蛋白酶体通路在细胞生存和肿瘤发生中的作用

泛素-蛋白酶体通路在正常细胞和病变细胞的蛋白降解中起着十分重要的作用。在肿瘤的发生发展中,该通路与肿瘤细胞周期失控和自噬等方面有着紧密的内在联系。该文综述了最近几年在肿瘤发生和发展中与泛素—蛋白酶体通路相关的最新研究进展,通过对泛素—蛋白酶体通路某些异常蛋白的深入探讨,为肿瘤的药物治疗提供新的思路,为抗肿瘤新药研发提供更多的分子理论依据。

泛素-蛋白酶体通路在神经系统中的生物学功能

概述了泛素-蛋白酶体通路(ubiquitin-proteasome system,UPS)的组成及其作用机理,着重阐述了其在神经系统中的生物学功能,主要包括UPS在神经元发育、突触的功能、突触的可塑性以及神经性疾病等方面的研究现状,为进一步揭示神经元的生长发育机理以及神经性疾病的研究提供参考。

泛素-蛋白酶体通路

泛素 蛋白酶体通路介导的细胞蛋白降解是一个复杂、缜密的调控过程 ,同时在细胞周期、基因转录及表达、抗原提呈和炎症演进等方面发挥调控作用 ,尤其是通过降解细胞各通路的抑制因子或 /和激活因子发挥上调或下调作用 ;而且泛素 蛋白酶体通路的异常与诸多疾病如恶性肿瘤、神经变性疾病、遗传性疾病、炎症、心肌病的致病机制有关。对于细胞应用该通路降解靶蛋白机制的阐明 。

泛素-蛋白酶体通路的转化研究进展

泛素-蛋白酶体通路(UPP)负责细胞内大部分蛋白质的降解,在调整细胞周期、控制信号转导和调节细胞凋亡过程中起着至关重要的作用,并成为肿瘤治疗的靶标。该通路的转化研究促成第一代蛋白酶抑制剂的研发,以及临床应用治疗血液系统恶性肿瘤患者。

地塞米松对COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路调控机制的研究

目的:探讨地塞米松对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白表达的影响,分析其调控机制。方法:SD大鼠42只,随机分为对照组13只、模型组15只及干预组14只。采用气管内注入脂多糖加反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。蛋白免疫印记方法测定大鼠膈肌内E2-14K、MAFbx、MuRF-1的表达。酶联免疫吸附法测定大鼠血清及膈肌中的TNF-α水平。分析TNF-α及与E2-14K、MAFbx、MuRF-1的相关性。结果:成功建立COPD大鼠模型;COPD大鼠膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白的表达均较对照组明显升高(P<0.01),干预组膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1较模型组降低(P<0.01);TNF-α水平与E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(P<0.01)。结论:COPD大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体通路的表达与TNF-α水平有关,地塞米松降低COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体表达可能与下调TNF-α的抗炎作用有关。

蛋白酶体抑制剂MG132对动脉粥样硬化的影响

目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对动脉粥样硬化的影响。方法将新西兰白兔30只随机分成高脂组、MG132(1)组和MG132(2)组。3组兔普通饲料喂养1w后行颈动脉球囊损伤术,术后高脂饲料(含1%胆固醇、3%猪油和15%蛋黄)喂养;MG132(1)组在术后高脂饲料喂养的同时血管局部应用蛋白酶体抑制剂MG132;MG132(2)组在术后高脂饲料喂养4w后血管局部应用蛋白酶体抑制剂MG132;3组均喂养8w后取颈总动脉血管制成病理切片行HE染色。结果高脂组兔的右颈总动脉管壁呈动脉粥样硬化改变。MG132(1)组兔右颈动脉血管组织结构基本正常。MG132(2)组兔的右颈总动脉管腔介于二者之间。结论局部应用蛋白酶体抑制剂MG132能够抑制血管内膜增生及动脉粥样形成,同时可能具有稳定斑块的作用。

泛素-蛋白酶体通路及其与胆道疾病相关性研究进展

泛素-蛋白酶体通路（UPP）是真核生物细胞质和细胞核内依赖于ATP、非溶酶体途径的蛋白质降解通路。UPP通路不仅能降解变性、异常或起短暂作用的蛋白质，而且能降解植物色素、转录因子、内膜蛋白和细胞周期蛋白等天然蛋白质，因而在转录水平调节、蛋白质降解、蛋白质稳定状态调节、程序性细胞死亡、

水木和宁方通过调控泛素-蛋白酶体通路对MPP+诱导帕金森病体外模型细胞损伤的影响

目的:探讨水木和宁方通过调控泛素-蛋白酶体通路(UPP)对帕金森病细胞模型的影响。方法:通过MPP+诱导帕金森病体外细胞模型,利用MTT法检测细胞活性,筛选美多芭、水木和宁方药物干预最佳浓度。药物干预后,采用Real-time PCR法和Western blotting法分别检测与UPP相关的泛素(UB)、泛素激活酶E1(UBE1)、Parkin、泛素羧基端水解酶-L1(UCH-L1)、α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)的mRNA和蛋白表达水平。结果:MTT法筛选MPP+最佳造模浓度为1mmol/L,水木和宁方、美多芭药物最佳浓度分别为6 mg/mL和3.125μg/mL。镜下观察显示水木和宁方、美多芭对MPP+诱导的PC12细胞具有保护作用,可以提高细胞存活率。Real-time PCR法和Western blotting结果表明,与对照组比较,模型组PC12细胞TH、UB、UBE1、Parkin、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05);与模型组比较,水木和宁方组、美多芭组PC12细胞TH、UB、UBE1、Parkin、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.05);与美多芭组比较,水木和宁方组PC12细胞TH、UB、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:水木和宁方可能通过调控UPP功能促进异常蛋白降解,减少神经元凋亡,从而发挥抗帕金森病的作用。