吐温80合并温热对B16黑色素瘤细胞hsp 70、c-fos、泛蛋白及S-100蛋白表达的影响

目的:研究吐温80与温热合并的协同抗肿瘤机理及与凋亡的关系.方法:用免疫组化方法.观察吐温80合并41℃温热作用后即时、4小时和72小时,B16肿瘤细胞热休克蛋白70(hsp 70)、c-fos、泛蛋白以及S-100蛋白表达的改变,并进行定量分析.结果:hsp70和C-fos蛋白呈中等阳性反应,分别位于B16细胞的胞质和胞核;泛蛋白为弱阳性、S-100蛋白呈强阳性,分布于胞质;41℃ 60分钟作用可增强hsp70表达.以4小时为显著.核亦呈阳性反应;对其它蛋白表达无明显影响;吐温80单独可轻度抑制hsp70表达;温热与吐温80合并作用能显著抑制hsp70表达,c-fos和泛蛋白表达则明显增加.S-100蛋白变化各组无显著意义.结论:吐温80增强温热抗肿瘤的效应可能与其抑制hsp70合成.影响细胞热耐受性的产生和诱导细胞调亡有关.

日本血吸虫大陆株泛蛋白缀合酶E(SjUCEE)基因的A-T克隆

目的 日本血吸虫中国大陆株泛蛋白缀合酶 E (ubiquitin- conjugating enzyme E ,Sj UCEE)的基因克隆和鉴定。方法 特定寡核苷酸引物 PCR扩增目的基因 ;应用分子克隆常规操作方法将扩增产物克隆至载体 pu Cm - T中。结果 PCR特异性扩增出 Sj UCEE编码区基因序列 ,其片段大小为 75 7bp;经酶切、PCR及测序鉴定表明所构建的质粒 pu Cm - T/Sj UCEE中含有所扩增的基因序列。结论 PCR扩增的 Sj U CEE抗原编码区基因序列与预期长度相符合 ,成功构建了含目的基因的原核质粒 pu Cm- T/Sj U

ABCD2评分联合血清泛连接蛋白、微小RNA-20b对头晕患者发生缺血性卒中有预测价值

目的:探讨年龄、血压、单侧肢体无力和言语障碍、持续时间、糖尿病(ABCD2)评分联合血清泛连接蛋白、微小RNA(miRNA)-20b对头晕患者发生缺血性卒中(IS)的预测价值。方法:收集148例头晕患者,根据是否发生IS分为IS组(109例)和非IS组(39例)。比较分析2组患者一般资料、ABCD2评分和血清泛连接蛋白、miR-20b水平。多因素Logistic回归分析头晕患者发生IS影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ABCD2评分联合血清泛连接蛋白、miR-20b水平对评估头晕患者发生IS的预测价值。结果:IS组年龄、高血压史比例、ABCD2评分、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、泛连接蛋白水平明显高于非IS组,miR-20b水平明显低于非IS组(P均<0.05)。LDL-C升高(OR=2.575,95%CI:1.497~3.353)、ABCD2评分>3分(OR=3.069,95%CI:2.242~5.408)、泛连接蛋白升高(OR=1.089,95%CI:1.018~1.187)为头晕患者发生IS独立影响因素(P均<0.05),miR-20b为独立保护因素(OR=0.351,95%CI:0.220~0.559,P<0.05)。3个指标联合预测头晕患者发生IS的曲线下面积(AUC=0.859,95%CI:0.791~0.926)明显大于ABCD2评分(AUC=0.759,95%CI:0.669~0.849)、泛连接蛋白(AUC=0.656,95%CI:0.554~0.759)、miR-20b(AUC=0.821,95%CI:0.750~0.893)单独预测(P均<0.05)。结论:ABCD2评分和血清泛连接蛋白、miR-20b水平为头晕患者发生IS独立影响因素,3个指标联合对头晕患者IS风险有预测价值。

泛连接蛋白调控口颌面疼痛作用及机制的研究进展

口颌面疼痛的病理机制复杂,临床上目前仍缺乏持久有效的治疗手段,给患者生活带来沉重负担。近年来,研究表明外周和中枢神经系统中的泛连接蛋白(PANX)在调控口颌面部疼痛的发生和发展中发挥着重要作用。本文重点阐述PANX的结构和功能,以及其在疼痛中的作用和机制,包括口颌面部的神经病理性疼痛、炎性疼痛和其他疼痛。通过深入了解PANX在口颌面部疼痛中的作用和功能,以期为口颌面部疼痛的诊断与治疗提供理论基础和治疗策略。

血清泛连接蛋白-1水平对急性缺血性脑卒中患者静脉溶栓后出血转化的预测价值

目的分析急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清泛连接蛋白-1(Panx-1)表达情况,探讨其预测静脉溶栓后出血转化(HT)的价值。方法选取2020-01—2022-12新疆军区总医院、新疆医科大学第六附属医院采用rt-PA静脉溶栓治疗的173例AIS患者为研究对象,根据溶栓后48 h内HT发生情况分为HT组与非HT组,比较2组患者基线资料、入院时血清Panx-1水平及其他实验室指标,分析血清Panx-1在AIS患者静脉溶栓后HT发生中的预测效能。结果173例患者中最终168例完成研究,溶栓后48 h内25例(14.88%)出现HT。相较于非HT组,HT组患者入院时NIHSS评分更高(P<0.05),HT组患者入院时血清Panx-1、C反应蛋白(CRP)水平高于非HT组(P<0.05)。Logistic回归分析表明入院时血清Panx-1水平高会增加AIS患者静脉溶栓后HT发生风险(P<0.05),受试者工作特征(ROC)曲线显示,血清Panx-1预测AIS患者静脉溶栓后HT发生的曲线下面积为0.857。结论AIS患者血清Panx-1水平可预测其静脉溶栓后HT发生风险。

ST段抬高型心肌梗死患者血浆泛连接蛋白1与介入治疗后无复流现象的相关性

目的分析血浆泛连接蛋白1(Pannexin-1,Panx-1)水平与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后无复流现象的相关性。方法前瞻性分析2019年1月至2021年12月在广州中医药大学附属中山中医院接受急诊PCI的STEMI患者218例,根据PCI后心肌梗死溶栓试验分级分为正常复流组110例、慢复流组69例和无复流组39例。酶联免疫吸附测定血浆Panx-1水平,流式细胞术检测P选择素、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)及血小板-白细胞聚集体水平。结果无复流组年龄、糖尿病、发病至PCI时间、血小板计数、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、D-二聚体、P选择素、GPⅡb/Ⅲa、血小板-中性粒细胞聚集体(PNA)、血小板-单核细胞聚集体(PMA)、血小板-淋巴细胞聚集体(PLyA)、血浆Panx-1水平显著高于正常复流组和慢复流组(P<0.05)。STEMI患者血浆Panx-1水平与P选择素、GPⅡb/Ⅲa、PNA、PMA、PLyA呈正相关(P<0.05,P<0.01)。LDL-C≥3.20 mmol/L、血浆Panx-1>0.88 mg/L为STEMI患者PCI后无复流的独立危险因素(OR=2.198,95%CI:1.252~3.858,P=0.006;OR=16.849,95%CI:4.481~63.357,P=0.000)。血浆Panx-1预测STEMI患者PCI后无复流的曲线下面积为0.826(95%CI:0.744~0.907,P<0.01)。结论血浆Panx-1水平升高与STEMI患者PCI后无复流的发生密切相关,可作为预测PCI后无复流的生物标志物。

泛连接蛋白1参与炎症调控及细胞焦亡的研究进展

1泛连接蛋白1(pannexin 1,Panx1)通道及其调控1.1 Panx1概况Panx1作为泛连接蛋白家族成员之一,激活后可在细胞膜上形成通道,释放10 kD以内的物质于细胞外,如腺苷三磷酸(adenosine triphos⁃phate,ATP)、尿苷三磷酸(uridine triphosphate,UTP)、K+和Ca2+等。细胞内物质作为炎症介质,经Panx1释放到细胞外,诱导失控性炎症反应发生[1]。

泛连接蛋白1在神经系统疾病中作用机制的研究进展

缝隙连接蛋白家族成员泛连接蛋白⁃1(Panx1)是在细胞间信息传递中发挥重要作用的跨膜通道,具有独特的门控特性。在神经系统中,Panx1在多种细胞类型中均表达,并介导这些细胞之间的联系。Panx1的活性在调节神经元发育和突触可塑性方面的生理功能,可能与学习和记忆有关。最近其活性与神经系统疾病的关系也受到关注,如缺血性卒中、癫痫及慢性疼痛。然而Panx1在神经系统疾病的重要意义仍然未知全貌。鉴于此,大量研究集中在调节Panx1通道表达和激活的机制如何促进各种生理和病理的过程。本综述目的是总结当前Panx1在神经系统生理和病理中作用的研究进展。

血清泛连接蛋白3和胰岛素样生长因子1受体对急性脑梗死患者出血转化风险的预测价值

目的探讨血清泛连接蛋白3(Panx3)、胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)预测急性脑梗死(ACI)患者出血转化的价值。方法选择2020年3月至2022年8月河南科技大学第一附属医院神经内科收治的187例ACI患者,根据是否发生出血转化将患者分为出血转化组(30例)和非出血转化组(157例)。所有ACI患者检测血清Panx3、IGF1R水平,收集临床相关资料。采用Logistic回归方法分析ACI患者出血转化的危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析Panx3、IGF1R预测ACI患者出血转化的价值。结果出血转化组血清Panx3水平高于非出血转化组[(5.6±1.5)μg/L比(3.0±1.0)μg/L],IGF1R水平低于非出血转化组[(2.0±0.6)μg/L比(3.9±0.7)μg/L](均P<0.001)。Logistic回归分析结果显示,大面积梗死、高美国国立卫生研究院卒中量表评分、高Panx3是ACI患者发生出血转化的危险因素(比值比=2.866、3.494、1.865,95%置信区间:1.567~5.242、1.525~8.005、1.252~2.776,均P<0.001),高IGF1R是ACI患者发生出血转化的保护因素(比值比=0.596,95%置信区间:0.408~0.870,P<0.001)。Panx3、IGF1R单独预测ACI患者发生出血转化的曲线下面积为0.675、0.775,联合预测ACI患者发生出血转化的曲线下面积为0.909,大于Panx3、IGF1R单独预测(Z=4.244、2.756,均P<0.05)。结论ACI合并出血转化患者血清Panx3水平增高,IGF1R水平降低,联合Panx3和IGF1R可有效预测ACI患者出血转化。

泛醌氧化还原酶铁硫蛋白4通过影响线粒体功能参与肺炎衣原体感染诱导的血管平滑肌细胞焦亡

[目的]探究肺炎衣原体(C.pn)感染诱导血管平滑肌细胞(VSMC)焦亡及其可能机制。[方法]组织贴块法培养大鼠原代VSMC,利用C.pn感染VSMC模型,使用倒置相差显微镜观察C.pn感染后VSMC形态学的变化,试剂盒检测C.pn感染VSMC后乳酸脱氢酶(LDH)含量变化,Western blot实验检测GSDMD和Caspase-1的表达,串联质谱标签法定量蛋白质组学实验和GO富集分析检测线粒体氧化磷酸化和氧化呼吸链Complex相关蛋白的变化。[结果]与对照组相比,倒置相差显微镜下可见C.pn感染后VSMC膜外出现气泡状囊泡,C.pn感染VSMC 36 h、48 h后LDH含量分别增加38.92%和79.54%(均P<0.001),焦亡相关蛋白GSDMD表达增加1.74倍和1.67倍(均P<0.001);C.pn感染VSMC 48 h后Caspase-1表达(pro-Caspase-1)和活性(Caspase-1 p12/p10)分别增加2.69倍和3.47倍(均P<0.001);质谱结果显示,C.pn感染VSMC后有20种差异表达的蛋白质富集在氧化磷酸化通路中,同时发现,ComplexⅠ泛醌氧化还原酶铁硫蛋白4(NDUFS4)下降最为显著。进一步的Western blot实验结果显示,C.pn感染VSMC 36 h、48 h后NDUFS4的表达水平分别下降了57.5%和57%(均P<0.001)。[结论]C.pn感染可能通过抑制NDUFS4表达影响线粒体功能,从而诱导VSMC焦亡。

褪黑素通过上调泛醌―细胞色素C还原酶核心蛋白1抑制MPP^(+)诱导的MN9D细胞凋亡和线粒体损伤

目的探讨褪黑素(melatonin,MT)在1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion,MPP^(+))诱导的帕金森病体外模型中的作用及分子机制。方法将MN9D细胞分为对照组、MPP^(+)组、MT组、治疗组。采用细胞计数试剂盒8检测MT和MPP^(+)对细胞活力的影响;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)评价线粒体功能;Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡;通过免疫荧光蛋白质印迹法(Western blotting)检测凋亡相关蛋白[Cleaved-Caspase 3和细胞色素C(cytochrome C,CytC)]以及泛醌―细胞色素C还原酶核心蛋白1(ubiquinol-cytochrome C reductase core protein 1,UQCRC1)蛋白的表达;采用干扰RNA技术沉默MN9D细胞中UQCRC1的表达,然后采用Western blotting检测凋亡相关蛋白表达。结果MT可以减轻MPP^(+)诱导的细胞活力下降(P<0.05);恢复MPP^(+)造成的线粒体膜电位下降(P<0.05);减少MPP^(+)诱导的凋亡细胞数量(P<0.05);抑制凋亡蛋白(CytC和Cleaved-Caspase3)的表达(P<0.05);上调UQCRC1的表达(P<0.05)。沉默UQCRC1后,MT组和治疗组的UQCRC1表达均下降(P<0.05);MT对MPP^(+)诱导细胞凋亡的保护作用下降(P<0.05);凋亡蛋白(CytC和Cleaved-Caspase3)的表达增加(P<0.05)。结论MT对MPP^(+)诱导的多巴胺能神经元损伤具有保护作用,其机制可能是通过上调UQCRC1抑制神经元凋亡。

泛肽相关蛋白基因UBAP1单核苷酸多态及与鼻咽癌的相关研究

UBAP1基因是在鼻咽癌 9p最小共同缺失区内新克隆的鼻咽癌候选抑瘤基因 ,通过采用病例 对照研究方法 ,对 10 5例鼻咽癌患者和 183例正常人UBAP1基因的 5个单核苷酸多态 (SNPs)用测序法进行了分型 ,在实验过程中 ,偶然发现了一个新的SNP位点 ,并已登录至dbSNP (登录号 :rs3135 92 9) .经相关分析发现 ,位于UBAP1基因第 6外显子中的SNPrs10 4 95 5 7与鼻咽癌发病存在显著相关性 ,基因型GG和GC的相对危险度分别为 1 6 4和 1 31.实验结果进一步支持了UBAP1基因与鼻咽癌的发生发展可能存在密切关系 ,SNPrs10 4 95 5 7由于处在UBAP1基因下游 3′非翻译区 ,其多态类型可能在某种程度上影响UBAP1基因的表达调控 。

结肠黑变病相关基因金属泛激蛋白-1cDNA和氨基酸序列分析

目的对结肠黑变病相关基因金属泛激蛋白-1(MPS-1)cDNA序列和氨基酸序列进行综合分析,为其结构和功能的研究奠定理论基础。方法从Pubmed数据库中获得目标cDNA序列,利用基因和蛋白质分析处理软件DNAMAN、NCBI ORF finder、BLAST、Conserved Domains、GOR、SWISS-MODEL等软件对该目标的基因序列和氨基酸序列进行综合分析。结果 MPS-1蛋白cDNA序列长为361 bp,编码84个氨基酸残基,基因序列比对显示该蛋白与核糖体蛋白S27(RPS27)mRNA的编码序列同源度最高,两者核苷酸的相似度为361/361(100%),氨基酸序列比对显示该蛋白与RPS27的氨基酸序列同源度最高,两者氨基酸的相似度为84/84(100%),目标序列中存在1段Ribosomal_S27e家族保守结构域,二级结构和三级结构预测显示目标蛋白中主要存在α-螺旋、β-折叠和无规卷曲的结构。结论 MPS-1蛋白与RPS27同源度高,与肿瘤的发生密切相关。

泛肽系统的组成和功能(一)——系统组成、底物识别与蛋白质泛肽化

泛肽（Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ，简称Ｕｂ）是一个由７６个氨基酸残基组成的非常保守的小蛋白质。泛肽依赖性的蛋白质降解途径（Ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ＿ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｐａｔｈｗａｙ）是目前已知的最重要的、有高度选择性的蛋白质降解途径。泛肽系统由Ｕｂ、Ｕｂ活化酶、Ｕｂ结合酶、Ｕｂ＿蛋白质连接酶、Ｕｂ＿Ｃ末端水解酶和２６Ｓ蛋白酶体组成。本文详细地介绍了泛肽系统各个组成部分的种类、结构与功能，蛋白质泛肽化及其降解机制和底物识别模式。

以泛蛋白为中介的蛋白质降解的发现——2004年诺贝尔化学奖研究成果介绍

10月 6日瑞典皇家科学院宣布将 2 0 0 4年诺贝尔化学奖授予以色列科学家阿龙 -西查诺瓦、阿弗拉姆-赫尔什科和美国科学家伊尔温 -罗斯 ,以表彰他们在蛋白质调节系统方面的重大发现。本刊编辑部把诺贝尔基金会官方网站中公布的获奖成果详细评述文章译出并转载于此 。

小麦条锈菌泛肽-核糖体蛋白S27a基因的鉴定与表达分析

从小麦条锈菌吸器cDNA文库中鉴定到一个泛肽-核糖体蛋白S27a(Ubiquitin-ribosomal protein S27a,UBRS27a)基因,命名为PsUBRS27a。该基因开放阅读框为480bp,编码包含159个氨基酸残基的蛋白质,其氨基酸序列含有典型的UBRS27a蛋白所具有的ubiquitin和Ribosomal_S27结构域;序列比对发现UBRS27a蛋白在不同物种中高度保守,但PsUBRS27a蛋白在进化上与柄锈菌属的UBRS27a蛋白亲缘关系最近;种内多态性分析发现PsUBRS27a基因在不同小麦条锈菌菌系中的序列非常保守,无核苷酸变化;实时荧光定量PCR结果表明,PsUBRS27a基因在条锈菌侵染小麦过程中呈上调表达趋势,高峰期为接种后168h。

泛肽—蛋白酶体对TRAIL诱导凋亡作用的影响

目的 :探讨泛肽 蛋白酶体对TRAIL诱导细胞凋亡作用的影响。方法 :对四种不同处理组 (PBS ;anti DR5 ;lactacystin和anti DR5加lactacystin)的RSAF细胞及SCID小鼠滑囊细胞分别用Hoechst 33342染色和TUNEL染色后 ,检测其细胞凋亡率。用Hoechst染色和LuminescentATPLite法定量分析Caspase抑制剂对细胞凋亡的影响。结果 :Lactacystin阻断泛肽 蛋白酶体通路后 ,Anti DR5与TRAILR2结合后能诱导 95 %以上的RASF细胞出现凋亡。而分别用anti DR5抗体和lactacystin单独处理的细胞却没有观察到这种现象。结论 :泛肽 蛋白酶体通路参与了对TRAIL诱导的细胞凋亡的调节。而Caspase 8和Caspase 4的激活在泛肽

泛醌结合蛋白（QPs）重组活性必需羧基的定量研究

用Ｃ１４（ＤＣＣＤ）参入法确定了在泛醌结合蛋白ＱＰｓ中有四个对重组活性必需的羧基，它们全部定位在２４０００亚基上。

泛醌结合蛋白（QPs）羧基的化学修饰与重组活性

研究了羧基修饰剂ＤＣＣＤ对泛醌结合蛋白ＱＰｓ重组活力的影响；用０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００增溶ＱＰｓ后，用２５０ｍｏｌ／ｍｏｌＱＰｓ的ＤＣＣＤ于室温处理５ｍｉｎ，处理后的ＱＰｓ丧失约５０％与琥珀酸脱氢酶的重组活力。先将ＱＰｓ与琥珀酸脱氢酶重组再用ＤＣＣＤ处理没有发现重组的琥珀酸泛醌还原酶活性的降低。此结果说明ＱＰｓ中存在重组活性必需的羧基。

泛醌细胞色素C还原酶核心蛋白1基因甲基化与阿尔茨海默病发病风险的相关性

目的探讨外周血中泛醌细胞色素C还原酶核心蛋白(UQCRC) 1基因启动子区甲基化与阿尔茨海默病(AD)发病风险的相关性。方法 AD患者(AD组) 50例,非AD患者(对照组) 55例,利用甲基化特异性PCR(MSP)检测两组外周血中UQCRC1基因甲基化水平。结果 UQCRC1基因在AD组和对照组发生甲基化率分别为64. 00%(32/50)和25. 45%(14/55),差异有统计学意义(P<0. 05)。在AD组中,按性别和年龄分层中,UQCRC1基因甲基化水平与性别无关,差异无统计学意义(P>0. 05);与年龄有关,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 UQCRC1基因启动子区甲基化与AD发病风险相关,通过检测外周血UQCRC1基因甲基化对AD的早期诊断具有一定的临床价值。