FK866对非小细胞肺癌细胞迁移的影响

目的:探讨低浓度烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)抑制剂FK866对人非小细胞肺癌细胞株(A549细胞)迁移的影响及作用机制。方法:MTT法检测不同浓度FK866对A549细胞增殖的影响;划痕实验检测1.0 nmol/L和10.0 nmol/L FK866对A549细胞迁移的影响;实时定量RT-PCR检测上皮间质转化相关蛋白上皮钙黏素和波形蛋白mRNA的表达量;蛋白质印迹法检测细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2蛋白的表达量。结果:FK866作用时间越长、浓度越高,对A549细胞增殖的抑制作用越明显。FK866作用72 h时的半抑制浓度(IC50)为9.55 nmol/L。以1.0、10.0 nmol/L的FK866预处理细胞48 h,划痕后继续给药48 h,两种浓度的FK866均能抑制A549细胞迁移;如不进行预处理,仅10.0 nmol/L浓度的FK866对划痕愈合有一定的抑制作用;1.0 nmol/L的FK866处理细胞72 h可上调上皮钙黏素和波形蛋白mRNA表达,并激活ERK1/2;以1.0 mmol/L的烟酰胺单核苷酸(NMN)或10.0μmol/L的ERK1/2抑制剂U0126预处理,能够逆转FK866引起的上皮钙黏素和波形蛋白表达上调。结论:低浓度FK866能够通过减少细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和激活ERK1/2,增加上皮钙黏素表达,进而抑制细胞迁移,对肿瘤转移可能有一定的抑制作用;但其同时促进了波形蛋白的表达,不利于肿瘤的治疗。

Vimentin、TP53和podoplanin在卵巢癌中的表达水平及预后价值分析

目的探究波形蛋白(vimentin)、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)和平足蛋白(podoplanin)在卵巢癌中的表达及预后价值。方法收集116例卵巢癌组织标本作为卵巢癌组,另选取90例正常卵巢组织标本作为对照组,RT-PCR法和免疫组织化学法测定卵巢组织中vimentin、TP53和podoplanin表达,分析vimentin、TP53和podoplanin蛋白表达与临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法对3年生存情况进行分析,Log-rank法检测组间生存差异;COX风险回归对影响卵巢癌患者的无生存进展期(progression-free survival,PFS)和总体生存期(overall survival,OS)进行分析。结果卵巢癌组vimentin、TP53和podoplanin m RNA表达水平均高于对照组(均P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,vimentin、TP53和podoplanin蛋白阳性表达以及平均吸光度均高于对照组(均P<0.05)。Vimentin表达与临床分期、淋巴结转移、组织分化程度相关(U=37.286、19.041、35.478,均P<0.05),TP53表达与组织分化程度相关(U=25.481,P<0.05),podoplanin表达与年龄相关(U=24.471,P<0.05)。Vimentin、TP53和podoplanin蛋白阳性表达者3年PFS和OS均低于阴性表达者(均P<0.05)。Cox风险回归分析结果显示,年龄和vimentin表达是影响卵巢癌患者PFS和OS的独立预后因素。结论 Vimentin、TP53和podoplanin在卵巢癌组织中高表达,其中vimentin可作为卵巢癌患者独立预后指标。

叉头框C2、Vimentin及E-cadherin在结直肠腺癌中的表达及意义蛋白

目的通过研究叉头框c2（FOXC2）、Vimentin及E-cadherin蛋白在人结直肠腺癌组织中的表达及其与临床病理学参数间的关系，探讨上皮一间质转化（EMT）在结直肠腺癌中的作用及FOXC2与EMT的相关性。方法采用免疫组化法检测102例结直肠腺癌组织及30例癌旁组织中FOXC2、Vimentin及E-cadherin的表达，分析各指标与结直肠腺癌临床病理学参数间的关系及FOXC2与EMT的相关性。结果FOXC2、Vimentin及E—cadherin在结直肠腺癌组织中的阳性表达率分别为53．9％、40．2％和26．5％，在癌旁组织中的阳性表达率分别为6．7％、0和63．3％。与癌旁组织相比，FOXC2、Vimentin在结直肠腺癌组织中的表达明显增加，而E—cadherin表达明显下降。FOXC2、Vim—entin在淋巴结转移组中的阳性表达率分别为79．1％、67．4％，明显高于无淋巴结转移组阳性表达率35．6％（P〈0．01）、20．3％（P〈0．01）；E—cadherin在有淋巴结转移组阳性表达率为16．3％，显著低于无淋巴结转移组（33．9％，P〈0．01）。FOXC2、Vimentin在T1＋他期的阳性表达率分别为41．7％、25．0％，明显低于T3＋T4期阳性表达率83．3％（P〈0．01）、76．7％（P〈0．01）；E—cadherin在T1＋他期组阳性表达率为33．3％，显著高于T3＋T4期阳性表达率10．O％（P〈0．01）。结直肠腺癌组织中FOXC2与Vimentin的表达呈正相关（P〈0．01），与E-cadherin表达呈负相关（P〈0．01）。结论EMT可能促进结直肠腺癌的发展转移，FOXC2可能参与了结直肠癌的EMT且通过EMT促进结直肠腺癌的恶性进程。

Twist、E—cadherin及Vimentin在表达及意义宫颈鳞状上皮癌变的

目的探讨宫颈鳞状上皮癌变过程中Twist、E-cadherin、Vimentin的表达规律及临床意义。方法以慢性宫颈炎为对照，检测宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞状细胞癌组织标本中Twist（原位杂交）、E-cadherin、Vimentin（SABC免疫组化法）的表达情况，分析其相关性。结果（1）慢性宫颈炎、CINI、CINII、CINIU及宫颈癌组中：Twist的阳性率分别为10．O％、28．1％、29．6％、42．9％、64．3％，其中Twist在宫颈鳞癌的表达均明显高于其他组（P〈0．05）。E-cadherin、Vimentin的阳性率分别为80．O％、68．8％、55．6％、51．4％、39．3％和0、6．3％、7．4％、31．4％、32．1％，其中两者在宫颈鳞癌组、CINⅢ组中的表达与慢性宫颈炎组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），（2）分析全部CIN及宫颈癌病例，Twist的表达与E-cadherin呈负相关（r=-0．37，P〈0．01），与Vimentin呈正相关（r：0．23，P〈0．05）。结论宫颈组织中Twist的异常表达与宫颈鳞状上皮癌变发生关系密切，Twist可能通过调控E-cadherin、Vimentin的表达参与宫颈鳞状细胞癌的发生。