RNA干扰PhCatC 1/2基因对波纹龙虾相关免疫基因表达的影响

初步研究RNA干扰PhCatC 1/2基因对波纹龙虾(Panulirus homarus)相关免疫基因表达的影响,采用qPCR技术检测PhCatC 1/2、PhTlr 13、PhLys和Phβ-G基因的表达,并观察肝胰腺组织的变化情况。结果表明:注射PhCatC 1-dsRNA后,PhCatC2表达量比对照组显著下降(P<0.05),与对照组相比PhTlr 13基因表达量在前期呈现显著升高,后下降的趋势,PhLys和Phβ-G基因的表达量均随dsRNA干扰时效的增加而增加;沉默PhCatC 2基因后PhTlr 13和Phβ-G基因的表达量随dsRNA干扰时效的增加而增加,PhCatC 1基因表达量呈现下上调交替的趋势,PhLys基因表达量表现出先下调后上调的趋势。通过PhCatC 1/2基因沉默后的分析初步推测,波纹龙虾可能通过促进Toll样受体和溶酶体通路来参与免疫应答,得出PhCatC 1/2基因具有免疫功能。

甘露寡糖对波纹龙虾叶状幼体生长的影响

为探索甘露寡糖(mannose-oligosaccharides,MOS)对波纹龙虾叶状幼体生长的促进作用,本研究设置3个试验组,分别投喂用不同浓度甘露寡糖强化的卤虫,统计各试验组培养3d、5d、7d后波纹龙虾叶状幼体的成活率。实验结果表明,1#饵料组(0.4%甘露寡糖强化)培养3d、5d、7d的成活率分别为(72.5±2.5)%、(57.5±2.5)%、(42.5±2.5)%,明显高于其它试验组。饵料中添加甘露寡糖可提高波纹龙虾叶状幼体的成活率,甘露寡糖最佳添加浓度为0.4%。

常见3种药物对波纹龙虾叶状幼体的急性毒性试验

1前言波纹龙虾隶属于节肢动物门,软甲纲,十足目,龙虾科,龙虾属,在印度洋—西太平洋均有分布,常栖息在水质清新的岩礁有沙地带。龙虾个体大,肉质鲜美,营养丰富,已成为餐桌上的美味,倍受人们青睐。壳可入药,活虾和壳制成标本后可供观赏,市场售价高,具有很高的经济价值。随着龙虾消费量的日益增加,人们期望将其开发为近海增养殖对象,但迄今为止,人们在龙虾人工育苗方面做了大量的研究工作,但由于龙虾的叶状幼体期较长,饵料组成较复杂,人工育苗技术难以攻克,也制约了人工养殖的发展。至今波纹中国龙虾还没有形成大规模生产。

天津地区波纹龙虾的工厂化养殖试验

为探讨波纹龙虾(Panulirus homarus)工厂化养殖技术,于2020年进行了波纹龙虾养殖试验,通过采用光照调控、放置遮蔽物、水质调控、饵料投喂、疾病防治等技术,养殖成活率达到80%,平均规格0.72 kg/尾,平均产量4.6 kg/m^(2)。

波纹龙虾早期叶状幼体摄食与饥饿的研究

波纹龙虾早期叶状幼体在正常摄食条件下,经过69d培育能够顺利发育,蜕皮8次.早期叶状幼体在饥饿条件下的培养结果表明:初孵叶状幼体耐饥饿能力较强,完全饥饿192h,仍有存活的幼体;推迟投饵24～36h,幼体可发育变态至下一期,并且对其生长无明显影响.初孵幼体饥饿120h后,虽然具有摄食能力,但不能正常变态.叶状幼体摄食卤虫幼体时间达60h后,即使不再投喂饵料,叶状幼体仍可依靠体内蓄积的能量,变态到下一期,但是变态率比较低.间断投饵对于幼体的变态期的存活也有一定的影响.

温度对波纹龙虾存活、摄食、蜕壳和生长的影响

波纹龙虾是热带和亚热带重要经济虾类,养殖潜力巨大。本文进行温度渐变和骤变对波纹龙虾存活、摄食影响试验,以确定存活和摄食的水温范围;进行了波纹龙虾在不同温度条件下(22、25、28、31、34℃)对其存活率、饵料用效率、蜕壳和生长情况的影响试验,以确定最适养殖水温,试验时间90 d。结果表明:波纹龙虾的生存温度范围为13—36℃,适宜温度为20—30℃。在温度22—31℃范围内,波纹龙虾的存活率和特定生长率随着温度的升高表现为先升后降,在28℃达到最大值,各组之间差异显著(P<0.05);温度显著影响波纹龙虾对鲜活饵料的利用效率,饵料系数最高的是31℃组,为6.43±0.28;28℃组的波纹龙虾饵料系数最低,为5.75±0.70,与其它各组有显著差异(P<0.05)。波纹龙虾的蜕壳周期随着温度的升高逐渐缩短,31℃组周期最短(16.7 d),22℃蜕壳周期最长(18.8 d),但各组之间差异不显著(P>0.05)。综合以上因素考虑,波纹龙虾养殖水温宜控制在28℃。

波纹龙虾人工繁殖及早期叶状幼体培育的初步研究

波纹龙虾的繁殖季节在5～9月,盛期在7～8月.雌虾可抱卵3次,其间隔为15～20 d.受精卵在水温27～30℃下,经过20～25 d发育孵出叶状幼体,其数量多达3×105只.以单体培育、多体培育、群体培育3种方式培养幼体,投喂用鱼油强化过的丰年虫无节幼体,以存活率和变态率两个指标对比3种培育方式的效果,得出单体培育的效果最佳,经过69 d培育,幼体经过8次蜕皮,体长达4.68mm.

波纹龙虾胚胎的离体培养及发育观察

对波纹龙虾不同发育时期的胚胎进行离体培养和显微观察。结果表明,初始培育的离体胚胎愈接近孵化期,其孵化率愈高(最高达80.0%);波纹龙虾胚胎发育经历受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、中眼色素形成期、复眼色素形成期、心跳期、破膜前期和出膜期;胚胎在发育过程中颜色变化:橙红→深橙红→砖红→灰白→接近透明。

波纹龙虾消化系统光镜和扫描电镜的观察

对波纹龙虾Panulirus homaru消化系统进行了光镜和扫描电镜的观察。结果表明,波纹龙虾的消化系统由消化道和消化腺组成。消化道的组织结构由粘膜层、结缔组织层,肌层和外膜层构成;粘膜层由大量单层柱状上皮细胞和基膜构成。除中肠以外,其余各部分管壁均有几丁质。食道、中肠和后肠壁结缔组织中分布有腺体。胃和食道等的肌层为横纹肌。消化腺主要是肝胰腺,由无数的肝小管组成,肝小管均由位于基膜上的一层细胞构成。这些细胞有分泌细胞、储存细胞、吸收细胞和胚细胞四种类型。在扫描电镜下,消化道各段黏膜上皮表面均形成大小不一、具有形态各异的多级皱褶,以肠道中的纵褶及其上的横褶最为明显。除中肠和肠球外整个消化道均有较发达的纤毛丛。中肠和肠球中的微绒毛主要作用是增加吸收面积。

波纹龙虾呼吸系统组织学和组织化学的研究

利用光镜对波纹龙虾(Panulirushomarus)呼吸器官——鳃的横切面进行组织学研究。结果表明,鳃的外层由两层角质膜和一层立方上皮构成;鳃的背方上下排列的2个管腔分别为出鳃血管和入鳃血管,腹方为结缔组织膜形成的鳃轴;鳃丝内有流入沟、流出沟和由结缔组织形成的纵走隔膜。采用Feulgen法等6种方法,对角质膜、鳃上皮、鳃丝、鳃轴、出鳃血管和入鳃血管等结构分别进行了组织化学研究。

波纹龙虾早期叶状幼体的培育及其形态观察

为了探索波纹龙虾(Panulirus homarus)幼体培育新方法,并系统描述其幼体形态特征,在室内以5种不同的饵料组合投喂波纹龙虾早期叶状幼体。结果表明,扁藻(Platymonassp.)+卤虫(Artemia salina)组的存活率和变态率最高,到48 d后,幼体存活率达25%,并25%的幼体能顺利完成6次蜕皮;卤虫组、角毛藻(Chaetocerossp.)+卤虫组的存活率和变态率较低,没有幼体能顺利完成4次蜕皮。对叶状幼体的形态特征进行观察,发现刚孵出和蜕皮1次的叶状幼体无眼柄,第2次蜕皮后开始出现眼柄,第3次蜕皮后开始出现第4步足,第5次蜕皮后开始出现第5步足,在随后的几次蜕皮后,第4步足明显增长,第9次蜕皮后第4步足出现带有羽状刚毛的外肢。以扁藻+卤虫作为饵料时,波纹龙虾早期叶状幼体培育效果较好,并获得了脱皮9次的叶状幼体。

波纹龙虾卵巢的解剖学与组织学研究

试验结果表明,波纹龙虾卵巢呈H状,位于消化道的背面,随着卵巢的发育颜色依次为乳白色、淡橙色、橙色和橙红色。卵子发生分为4个时期(8个亚期):增殖期(卵原细胞期)、卵黄合成前期(束状期、染色质核仁期)、卵黄合成期(油球期、卵黄板形成前期、卵黄板形成期、成熟前期)和成熟期;卵巢发育分为6个时期:增殖期、发育期、成熟前期、成熟期、排卵期和恢复期。

光镜及扫描电镜下波纹龙虾血淋巴细胞的形态及其分类

光镜及扫描电镜下,研究波纹龙虾血淋巴细胞的组织学结构、形态学特征和数量。根据细胞质中颗粒存在与否,颗粒数量的多少,细胞体积的大小及外部形态,对波纹龙虾的血淋巴细胞进行分类。结果表明,光镜下波纹龙虾的血淋巴细胞有3种类型:无颗粒细胞,小颗粒细胞,大颗粒细胞;这3种血淋巴细胞不是连续发育过程中血淋巴细胞的不同阶段,而是彼此独立的。3种血淋巴细胞的数量占循环血淋巴细胞总量的比例分别为:无颗粒细胞占57.1%,大颗粒细胞占24.9%,小颗粒细胞占18.0%;在扫描电镜下,细胞表面不平,有各种突起,揭示细胞具有活跃的变形运动和吞噬能力。血淋巴细胞形态有球形、卵圆形和椭圆形。

盐度和体质量对波纹龙虾耗氧率和排氨率的影响

利用室内实验生态学方法研究不同盐度和体质量对波纹龙虾的呼吸和排泄的影响。结果表明:不同盐度和体质量对波纹龙虾耗氧率和排氨率有显著影响(p<0.05)。盐度为18～34时,波纹龙虾的耗氧率和排氨率先下降再升高,盐度26和30时较小,耗氧率分别为0.130 5±0.010 5 mg/(g.h)和0.131 4±0.005 2 mg/(g.h),排氨率分别为0.173 3±0.003 9 mg/(g.h)和0.172 4±0.004 4 mg/(g.h)。波纹龙虾耗氧量(MO)和排氨量(MN)与体质量(m)呈正相关,而耗氧率(RO)和排氨率(RN)与体质量呈负相关,其关系式可表示为:MO=1.492 1 m0.419 0和MN=1.129 5 m0.698 8;RO=2.933 3 m-0.734 3和RN=1.129 1 m-0.301 1。

波纹龙虾雄性生殖系统的解剖学与组织学研究

用解剖学和组织学方法研究了波纹龙虾雄性生殖系统,结果表明,波纹龙虾雄性生殖系统由精巢、输精管及生殖孔三部分组成。精巢横切面一般为圆形,外被一层结缔组织被膜,内部为许多圆形或椭圆形的生精小管,生精小管间充满了网状结缔组织。精子的发生经历精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和精子5个阶段。输精管管壁由外到内依次由结缔组织被膜、结缔组织、肌肉层和上皮细胞组成,管壁上的柱状上皮细胞、肌肉组织及结缔组织一起向管内延伸形成纵褶突。管壁和纵褶突上的柱状上皮细胞向管腔中分泌嗜酸性黏液。精荚呈管状,在中段输精管形成,并储存在管腔的黏液中。

波纹龙虾耗氧率和窒息点的研究

采用流水法研究波纹龙虾在不同温度、盐度和pH值条件下的耗氧率和窒息点。结果表明:耗氧率随着水温的升高而增加,25℃耗氧率为0.0645mg/g·h,33℃时上升到0.1879mg/g·h。波纹龙虾耗氧率随盐度的变化则呈"V"字型,盐度为28最低0.1051mg/g·h。波纹龙虾的耗氧率随pH值的升高而降低,pH值7.4～7.7时,耗氧率较高,为0.1426～0.1460mg/g·h;pH值8.0～8.6时,耗氧率从0.1057mg/g·h下降到0.0722mg/g·h。在水温29℃,盐度28,pH值8.0条件下,波纹龙虾的窒息点为0.2341mg/L。

Cd^2+和Hg^2+对波纹龙虾的急性毒性

采用毒理学方法,在水温28.0~29.0℃下于0.5 m^3的圆形玻璃钢桶中,用氯化镉和氯化汞配成不同质量浓度的Cd^2+和Hg^2+试验溶液,研究Cd^2+和Hg^2+对体质量49.10~52.10 g波纹龙虾的毒性,用直线内插法求得Cd^2+和Hg^2+的半致死质量浓度及安全质量浓度。试验结果显示,Cd^2+对波纹龙虾的24、48、72、96 h半致死质量浓度分别是2.5169、1.3378、1.0445、0.9500 mg/L,安全质量浓度为0.0095 mg/L;Hg^2+对波纹龙虾的24、48、72、96 h半致死质量浓度分别是0.0560、0.0333、0.0246、0.0227 mg/L,安全质量浓度为0.000227 mg/L。Hg^2+对波纹龙虾的毒性作用强于Cd^2+的毒性作用。

波纹龙虾工厂化养殖技术

我国龙虾资源比较丰富,在温带、亚热带、热带海区都有分布,尤其是热带海域最多。龙虾隶属节肢动物门、甲壳纲、十足目、龙虾科。已知全球共有龙虾属种类19种,都为经济种类,我国海域共有8个种类分布。龙虾不但肉味鲜美、具有极高的食用价值,而且在工业、医药及工艺欣赏等方面也具有一定的价值，深受人们的喜爱，有虾中之王的美誉。

波纹龙虾的养殖及病害防治技术

波纹龙虾(Panulirus homarus),俗称小青龙。近年来,波纹龙虾人工养殖已在福建悄然兴起,它将成为福建省国民经济的一个支柱产业,也是福建海洋强省战略的重要产业。随着波纹龙虾人工养殖的不断扩大,养殖过程中出现的病害也越来越多,严重阻碍波纹龙虾养殖业的持续发展。目前,波纹龙虾养殖过程中发现的病害有虾体寄生纤毛虫、细菌性病和虾体蜕壳未遂等。如何预防和治疗波纹龙虾人工养殖过程中的病虫害,提高波纹龙虾养殖的成活率,促进波纹龙虾人工养殖的健康发展,是该文总结的主要内容,以期为广大养殖户提供技术参考。

波纹龙虾健康高效养殖试验

随着水产养殖业的飞速发展,大规模、集约化的养殖模式逐渐取代了粗放、半粗放、半精养的养殖模式。养殖模式的转变在带给养殖者高产量、高收入的同时也给养殖业带来了灾难。集约化的养殖模式导致了养殖环境的恶化、养殖生物病害发生频繁,进而导致水产品品质下降等问题,这些问题正严重困扰着广大水产养殖业者。