小鼠经角膜视网膜下腔注射的方法学研究

背景 小鼠是眼科基因治疗、干细胞移植和眼底病研究的常用动物模型,视网膜下腔注射是上述研究中常用的实验技术,该技术的操作流程对研究的结果产生较大影响,但是目前对具体的视网膜下腔注射操作方法的介绍鲜见报道. 目的 观察小鼠经角膜视网膜下腔注射对视网膜形态和功能的影响. 方法 2月龄SPF级C57 BL/6J小鼠充分扩瞳后,在眼科专用手术显微镜下用301/2G一次性注射针头在角巩膜缘内侧穿刺小鼠右眼角膜,用带有33G平针头的微量进样器沿穿刺口进入并绕过晶状体后到达玻璃体,然后逐渐进针至视网膜下腔隙,缓慢推注1μl质量分数0.1％荧光素钠生理盐水注射液.根据注射后注射液在视网膜下腔的分布范围不同将实验眼分为80％～100％范围组和50％～70％范围组,模拟操作组以相同的方向进针至视网膜下腔但不注射溶液,小鼠的对侧眼（右眼）作为正常对照组,每组4只眼.分别于注射后1、2、3d及注射后5周光学相干断层扫描（OCT）法观察各组小鼠视网膜的形态结构变化;于注射后5周时记录各组小鼠的视网膜电图（ERG）,然后制备小鼠视网膜石蜡切片,采用苏木精-伊红染色观察各组小鼠视网膜的组织病理学改变. 结果 注射眼注射后视网膜绿色荧光范围＞50％且无明显并发症者为注射成功,成功率＞70％.OCT观察显示,注射后1d可见注射区域视网膜神经层与视网膜色素上皮（RPE）层脱离,局部视网膜隆起,注射后2d注射区域视网膜复位.注射后5周,模拟操作组、50％～ 70％范围组、80％～100％范围组和正常对照组小鼠ERG b波振幅分别为（386.25±37.88）、（357.50±41.03）、（324.25±53.45）和（410.50±14.88） μV,4个组间总体比较差异有统计学意义（F=3.574,P=0.047）,正常对照组ERG b波振幅明显高于80％ ～ 100％范围组（均P＜0.05）.组织病理学检查显示,模拟操作组、50％～ 70％范围组和80％～100％范围组小鼠神经层与R PE层分离,视网膜外核层细胞增生和移位,其中50％ ～ 70％范围组和80％～100％范围组小鼠注射点周围区域视细胞外节排列紊乱.各组小鼠未注射区域视网膜各层结构均正常.结论 经角膜视网膜下腔注射法是一种安全、可行的操作方法.

HEPATITIS C VIRUS AND INTRAVENOUS DRUG MISUSE： A MODELING APPROACH

Hepatitis C virus （HCV） is a blood-borne infection that can lead to progressive liver fail- ure, cirrhosis, hepatocellular carcinoma and death. A deterministic mathematical model for assessing the impact of daily intravenous drug misuse on the transmission dynamics of HCV is presented and analyzed. A threshold quantity known as the reproductive number has been computed. Stability of the steady states has been investigated. The dynamical analysis reveals that the model has globally asymptotically stable steady states. The impact of daily intravenous drug misuse on the transmission dynamics of HCV has been discussed through the basic reproductive number and numerical simulations.