注射型胶原蛋白填充剂在整形美容外科中的应用现状

目前制造注射型填充剂的材料有很多种,其中胶原蛋白是纠正面部软组织缺陷较为理想的材料之一。本文对美国食品和药品监督管理局(FDA)已经批准上市的注射型胶原蛋白填充剂产品进行了综述,同时还探讨了影响该产品质量安全的因素。

川芎嗪注射液对高糖诱导后人腹膜间皮细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-1和金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的:研究川芎嗪注射液对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)在高糖刺激下Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响。方法:胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞进行原代培养并传代,分为5组(每组设3个样本):正常组(完全培养液)、高糖对照组(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高剂量川芎嗪(10、20和40mg/L)组。采用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-poly merase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞内Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1mRNA表达;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1的蛋白质水平,用二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白检测法测定细胞中蛋白质含量,用以校正ELISA结果。结果:川芎嗪能显著降低高糖所致的HPMCsⅠ型胶原和TIMP-1的表达(P<0.05,P<0.01),两者在蛋白质和基因水平均呈量效关系;且中、高剂量川芎嗪能显著增加MMP-1的表达(P<0.05)。结论:川芎嗪能减少HPMCs高糖刺激下Ⅰ型胶原的合成,并且通过调节MMP-1/TIMP-1的平衡,促进Ⅰ型胶原降解。

重组Ⅲ型人源化胶原蛋白水光注射技术的操作规范

胶原蛋白是细胞外基质的主要组成成分,是动物体内分布最多、含量最广的蛋白质。在真皮层注射胶原蛋白后,即刻补充皮肤中的胶原蛋白含量,改善肤质、减少静态纹,改善皮肤松弛、增强皮肤弹性,同时刺激了新的胶原蛋白合成及组织的修复重塑。本文对重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维的产品特点、有效性和安全性、适应证、禁忌证、术中操作、注意事项、联合治疗等多个方面进行分析,为使用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白的专业医师提供规范化的操作建议和参考资料,从而使治疗更加有效,同时尽可能降低治疗过程中不良反应的发生率。

利用废旧皮革胶原多肽制备KFC蛋白复鞣填充剂

详细论述了用丙烯酸和十二醇马来酸单酯对废旧皮革胶原多肽进行接枝改性，研制一种蛋白复鞣填充剂，确定的最优工艺方案如下：胶原多肽：单体为1：4～1：2，软性单体：丙烯酸≤1：4，过硫酸钾用量1％～3％，反应温度80～88℃，加料时间1．5～2．0h，保温时间2．0～2．5h。并对该蛋白复鞣填充剂做了应用对比试验，证明该蛋白复鞣填充剂具有优良的填充性和选择填充性。

双氰胺改性胶原蛋白复鞣填充剂的研究

以双氰胺、甲醛、硫代硫酸钠和胶原蛋白为主要原料,合成了一种新型的低游离甲醛含量的双氰胺改性胶原蛋白复鞣填充剂(DPR)。对所得产品进行了红外谱图表征,结果显示产品双氰胺和胶原蛋白发生了化学反应;并将所得的产品应用于皮革复鞣填充,对复鞣后成革的各项性能进行测定,结果显示复鞣后成革丰满柔软,粒面紧实,复鞣后革平均增厚率为11.51%,染料上染率为98.7%,抗张强度为25.31N·mm-2,柔软度为6.53,透水汽性为7.0mg·cm-2·h-1,其综合性能优于R6产品。

氟伐他汀对肾小球硬化大鼠纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1和Ⅳ型胶原的影响

目的:探讨羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂(HCRI)氟伐他汀对肾小球硬化大鼠Ⅳ型胶原的影响。方法:用5/6肾切除的方法诱导大鼠肾小球硬化模型,随机分为对照组、氟伐他汀治疗组2mg/(kg·d)、苯那普利治疗组6mg/(kg·d)及假手术组。10周时测尿量、尿蛋白、内生肌酐清除率(Ccr)、血肌酐、血胆固醇和血甘油三酯。免疫组化检测肾组织Ⅳ型胶原水平表达。蛋白印迹(Westernblotting)测定肾皮质纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)蛋白水平表达。结果:氟伐他汀及苯那普利治疗组尿蛋白及肾组织Ⅳ型胶原水平表达明显低于对照组(P<0.01),PAI-1表达亦低于对照组,Ccr明显高于对照组(P<0.01)。结论:氟伐他汀可抑制PAI-1,减少Ⅳ型胶原积聚,减轻肾小球硬化,降低蛋白尿,改善肾功能,其对肾脏的保护作用并不依赖降胆固醇作用。

聚氨酯改性胶原蛋白的机理及应用研究(Ⅲ)(续)——聚氨酯改性胶原蛋白皮革复鞣填充剂

以2,4-甲苯二异氰酸酯(TDI)、聚丙二醇1000(PPG1000)、二羟甲基丙酸(DMPA)和胶原蛋白粉为原料,合成了一种新型的皮革用水性聚氨酯改性胶原蛋白复鞣填充剂(WPCF)。重点探讨了n(TDI/PPG1000)(摩尔比)、n(-NCO/-OH)(TDI和PPG1000反应后剩余—NCO和后续反应物中活性基团的摩尔比)、反应温度、加料顺序、DMPA用量等因素对分散液性能的影响。确定了工艺过程:首先TDI和PPG1000在70℃预聚1h,然后加入DMPA(用氮甲基吡咯烷酮(NMP)溶解),在80℃反应2h,加入胶原蛋白粉反应6h,其中,n(TDI/PPG1000)=5,n(-NCO/-OH)=1·3,ω(—COOH)=3%(由DMPA引入的羧基含量),中和剂选择三乙胺。应用试验表明:经过WPCF-4复鞣填充后的革,平均增厚率为41·2%,抗张强度较高为19·66N/mm2。皮革的粒面平整、清晰、手感丰满、弹性好。

聚氨酯改性胶原蛋白的机理及应用研究(Ⅲ)——聚氨酯改性胶原蛋白皮革复鞣填充剂

以2,4-甲苯二异氰酸酯(TDI)、聚丙二醇1000(PPG1000)、二羟甲基丙酸(DMPA)和胶原蛋白粉为原料,合成了一种新型的皮革用水性聚氨酯改性胶原蛋白复鞣填充剂(WPCF)。重点探讨了n(TDI/PPG1000)(摩尔比)、n(-NCO/-OH)(TDI和PPG1000反应后剩余—NCO和后续反应物中活性基团的摩尔比)、反应温度、加料顺序、DMPA用量等因素对分散液性能的影响。确定了工艺过程:首先TDI和PPG1000在70℃预聚1h,然后加入DMPA(用氮甲基吡咯烷酮(NMP)溶解),在80℃反应2h,加入胶原蛋白粉反应6h,其中,n(TDI/PPG1000)=5,n(-NCO/-OH)=1·3,ω(—COOH)=3%(由DMPA引入的羧基含量),中和剂选择三乙胺。应用试验表明:经过WPCF-4复鞣填充后的革,平均增厚率为41·2%,抗张强度较高为19·66N/mm2。皮革的粒面平整、清晰、手感丰满、弹性好。

乙烯基类聚合物接枝水解胶原蛋白复鞣填充剂的制备及应用

采用乙烯基类单体对水解胶原蛋白进行接枝共聚改性,制备了蛋白复鞣填充剂。通过红外光谱(FT-IR)和热重分析(TG)对改性前后的水解胶原蛋白结构和热稳定性进行表征,并将制备的蛋白复鞣填充剂应用于绵羊服装革复鞣工序,对坯革增厚率及物理机械性能进行了测定。FT-IR结果表明:乙烯基类单体在水解胶原蛋白多肽链上发生了接枝聚合。TG结果表明:通过接枝共聚,水解胶原蛋白的热稳定性有一定提高。复鞣应用结果表明:采用蛋白复鞣填充剂复鞣后坯革的增厚率达15.1%,抗张强度为14.9N/mm2,撕裂强度为51.2N/mm,断裂伸长率为78.3%,物理机械性能均达到服装用革行业标准,并能赋予坯革良好的丰满性和柔软性。

Ⅳ型胶原和金属蛋白酶组织抑制剂-1在肾小球系膜细胞中的表达及福辛普利干预的意义

目的探讨Ⅳ型胶原(ColⅣ)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)在脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中的表达及血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)福辛普利(FOS)干预的意义。方法建立体外培养的大鼠GMC,鉴定后3～10代用于实验。实验分为5组。对照组:仅加正常培养液;LPS组:加正常培养液及10μg/LLPS;FOS高、中、低剂量组:除正常培养液及10μg/LLPS外,分别加FOS1×10-4mol/L(FOS1组)、1×10-6mol/L(FOS2组)、1×10-8mol/L(FOS3组)。各组细胞培养6、12和24h后采用ELISA法测定细胞培养上清液中ColⅣ和TIMP-1蛋白表达量,收集细胞提取RNA,采用实时荧光定量RT-PCR法检测其TIMP-1mRNA表达的变化。结果1.正常培养的大鼠GMC均有一定量的ColⅣ和TIMP-1蛋白表达;LPS组在各时间点ColⅣ和TIMP-1蛋白分泌均高于对照组(Pa<0.01),而FOS各组ColⅣ和TIMP-1蛋白分泌均低于LPS组(Pa<0.01)。2.正常培养的大鼠GMC可表达一定量TIMP-1mRNA,LPS组在各时间点TIMP-1mRNA表达量均高于对照组,FOS各组表达量均低于LPS组。结论FOS抑制LPS诱导的GMC分泌ColⅣ,从蛋白和mRNA水平抑制LPS诱导的大鼠TIMP-1表达,而TIMP-1是调节ColⅣ降解的重要因子,为FOS的肾脏保护作用机制提供理论依据。

胶原蛋白基聚氨酯复鞣填充剂的研究

以2,4-甲苯二异氰酸酯(TDI)、聚丙二醇1000(PPG1000)、二羟甲基丙酸(DMPA)和胶原蛋白粉为原料,合成了一种新型的皮胶原蛋白基聚氨酯复鞣填充剂(WPCF)。将所得的产品应用于皮革复鞣填充,对复鞣后成革的各项物理机械性能进行测定,得出经WPCF复鞣填充后皮革的粒面平整、清晰、手感丰满、弹性好,且皮革平均增厚率最高,可达到41.2%,边腹部平均增厚率高达49.3%;并通过扫描电镜(SEM)、X-衍射(XRD)对复鞣后成革进行了表征,得出:产品能够使皮革的纤维结构得到明显的分散,经产品复鞣后革的晶区有序程度降低,胶原的结构变得较为稳定。

SGLT2抑制剂对糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的 观察钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂对糖尿病肾病大鼠肾功能、肾脏纤维化及肾组织中I型胶原蛋白表达的影响,探讨其肾脏保护作用的可能机制。方法 将28只雄性Wistar大鼠随机分为正常组8只、糖尿病肾病组10只、卡格列净组10只,糖尿病肾病组和卡格列净组采用高脂高糖饲养及腹腔注射链脲佐菌素方法造模。造模成功后,卡格列净组给予卡格列净10 mg/kg灌胃,正常组和糖尿病肾病组给予等量蒸馏水灌胃,3组持续灌胃37 d。检测各组大鼠注射链脲佐菌素第1~3天及灌胃37 d处死前1 d尿蛋白定量;灌胃37 d后取血检测血糖、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)水平,取肾脏组织进行HE染色及Masson染色,观察肾小球、肾小管及肾间质结构,电镜观察肾脏超微结构,免疫组化检测肾脏组织中I型胶原蛋白表达情况。结果 糖尿病肾病组和卡格列净组注射链脲佐菌素第1~3天及灌胃37 d处死前1 d尿蛋白定量均明显高于正常组(P均<0.05),卡格列净组灌胃37 d处死前1 d尿蛋白定量明显低于糖尿病肾病组(P<0.05)。糖尿病肾病组血糖、BUN、Cr、TG、TC水平均明显高于正常组(P均<0.05),卡格列净组上述各指标水平均明显低于糖尿病肾病组(P均<0.05)。HE染色和Masson染色显示,糖尿病肾病组肾小球部分萎缩、部分增大,毛细血管狭窄,系膜基质增生,部分肾小管上皮细胞肿胀或脱失,肾小球及间质明显纤维化;卡格列净组肾脏病理改变均较糖尿病肾病组轻。电镜下,糖尿病肾病组大鼠系膜细胞和系膜基质轻度增生,可见部分足突融合,基底膜厚度明显厚于正常组(P<0.05);卡格列净组大鼠的足突融合较糖尿病肾病组轻,基底膜厚度明显薄于糖尿病肾病组(P<0.05)。糖尿病肾病组肾组织中Ⅰ型胶原蛋白阳性表达IHC评分明显高于正常组(P<0.05),卡格列净组明显低于糖尿病肾病组(P<0.05)。结论 SGLT2抑制剂能够降低糖尿病肾病大鼠的血糖、血脂水平,减少尿蛋白排泄,改善肾脏功能,减轻肾脏纤维化,可能与其下调致纤维化因子Ⅰ型胶原蛋白的表达相关。

补脏通络方对糖尿病大鼠肾组织Ⅳ型胶原、转化生长因子-β表达及基质金属蛋白酶-9/金属蛋白酶抑制剂-1平衡的影响

目的观察补脏通络方对糖尿病(DM)大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、转化生长因子(TGF)-β表达及基质金属蛋白酶(MMP)-9/金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1平衡的影响。方法大鼠以脂肪乳灌胃21 d后一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg造模,后予补脏通络方治疗。于第8周末取左肾,测算肾重指数;SABC-FITC免疫组织化学荧光法检测肾组织Ⅳ-C、TGF-β表达;免疫印迹法分析肾组织MMP-9、TIMP-1蛋白含量。结果病理组较正常组肾重指数增加(P<0.01),各治疗组较病理组肾重指数降低(P<0.01)。病理组肾小球体积增大,系膜区扩大病变经治疗后均有不同程度改善。病理组较正常组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达增高(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值下降(P<0.01);各治疗组较病理组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达下降(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值上升(P<0.01);中、高剂量组降低TIMP-1表达,升高MMP-9/TIMP-1比值的作用优于低剂量组(P<0.01)。结论下调肾组织TGF-β表达,调节MMP-9/TIMP-1平衡,促进胶原降解,可能是补脏通络方保护DM肾脏作用的机制之一。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白关节腔注射对胶原诱导性关节炎大鼠骨及软骨代谢的影响

目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(Rh TNFR:Fc)关节腔注射对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠疾病活动性、软骨及骨代谢的影响。方法将30只CIA大鼠随机分为3组,给予每周1次共4次右踝关节注射。Ⅰ组大鼠首次注射Rh TNFR:Fc,随后三次注射生理盐水,Ⅱ组及Ⅲ组大鼠则分别注射4次Rh TNFR:Fc或生理盐水。在基线期及每次治疗1周后(分别定义为随访1、2、3及4)通过测量右足体积评估病情。完成随访4后检测血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)及软骨寡聚基质蛋白(COMP)的水平,分离右踝关节以Mankin评分评价软骨病理改变。结果Ⅰ组大鼠随访1时右足体积显著下降(P <0. 05),之后逐渐回升。Ⅱ组大鼠各随访期右足体积逐渐下降,而Ⅲ组大鼠右足体积逐渐上升。完成随访4后Ⅰ组大鼠血清RANKL、RANKL/OPG值、CTX-Ⅱ、COMP及右踝关节Mankin评分显著高于Ⅱ组大鼠(P <0. 05),但明显低于Ⅲ组大鼠(P <0. 05)。血清OPG趋势与之相反。结论关节腔注射RhTNFR:Fc在缓解大鼠CIA病情的同时,改善骨及软骨代谢。

透明质酸和猪胶原蛋白复配剂行眼周年轻化效果评价

目的 探讨适合于眼周年轻化的一种透明质酸和猪胶原蛋白复配剂,评价其有效性和安全性。方法 回顾性分析60例透明质酸和猪胶原蛋白复配剂行眼周年轻化的患者,分别在眉弓、眼窝、重睑、卧蚕及泪沟部位进行治疗。在治疗前和治疗后即刻、治疗后1个月、3个月、半年分别进行美学评分,由两名专业的未参与治疗的医生进行评估。结果 治疗后即刻GAIS (0.70±0.76)分、治疗后1个月(1.67±0.50)分、治疗后3个月(2.52±0.75)分,治疗后半年(3.09±0.58)分,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 透明质酸和猪胶原蛋白复配剂可形成优势互补的材料特性,适合眼周年轻化治疗,值得进一步临床研究。

联合注射胶原蛋白和注射用A型肉毒毒素(BOTOX)进行侧面部提升

目的:探讨联合注射胶原蛋白和注射用A型内毒毒素进行侧面部提升的疗效。方法:对16例侧面部松弛者,采用联合注射胶原蛋白和注射用A型内毒毒素进行治疗。结果:16例均是15 d,一个月,3个月,6个月随访,注射完即刻达到填充及略上提的效果,15 d后上提效果更明显,4周后明显达到紧实提升的效果,3个月后效果维持,6个月效果减弱。结论:对侧面部松弛者,采用联合注射胶原蛋白和注射用A型肉毒毒素进行治疗有效,没有明显的肿胀瘀青,值得推广。

糜酶抑制剂对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白表达的抑制作用

[目的]探讨糜酶抑制剂(Chy-I)对肝纤维化大鼠肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白表达的影响.[方法]取Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和Chy-I组,模型组和Chy-I组腹腔注射给予四氯化碳-山茶油建立肝纤维化大鼠模型,Chy-I组在建立模型的同时灌胃给予Chy-I,每日10 mg/kg,第56 d时通过免疫组织化学染色法检测各组大鼠肝组织中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白阳性细胞的表达情况,采用Western blot法检测肝组织中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达情况.[结果]免疫组织化学染色结果见Chy-I组肝组织中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白阳性细胞光密度值较模型组明显减少(P<0.01);Western blot法检测结果见,肝组织中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达水平较模型组显著下调(P<0.05).[结论]Chy-I可减轻四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达及在肝细胞外的沉积.

疏血通注射液对IgA肾病纤维蛋白原、Ⅳ型胶原及C反应蛋白的影响

目的:观察肾功能正常的IgA肾病血瘀证患者疏血通注射液治疗前后血清C反应蛋白(CRP)、纤维蛋白原(FIB)及血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的变化,探讨其疗效及可能机制。方法:69例IgA肾病患者随机分为37例疏血通治疗组和32例对照组,进行临床观察。结果:治疗组治疗前后血CRP、FIB及血、尿Col-Ⅳ均明显下降(P<0.05,P<0.01)。治疗组较对照组治疗前后血CRP及血、尿Col-Ⅳ下降更为明显(P<0.05,P<0.01)。结论:疏血通注射液对于改善IgA肾病的炎症状态,延缓纤维化进展可能有一定的益处。

丹参注射液联合替米沙坦对Ⅳ期糖尿病肾病患者Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白水平的影响

目的:探讨丹参注射液联合替米沙坦治疗对Ⅳ期糖尿病肾病(DN)患者Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)和纤维连接蛋白(FN)的影响。方法:选取60例Ⅳ期DN患者,随机分为观察组和对照组各30例。对照组给予口服替米沙坦,观察组给予丹参注射液静滴联合口服替米沙坦,连续治疗2周。比较两组治疗前后空腹血糖(FBG)、尿蛋白排泄率(UAER)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)、Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)、纤维连接蛋白(Fn)及血小板源性生长因子-B(PDGF-B)。结果:治疗后,观察组Col Ⅳ、Fn、PDGF-B及UAER显著低于对照组,组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者FBG、Cr及BUN比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参注射液联合替米沙坦治疗Ⅳ期DN可有效降低UAER,而拮抗DN所致的PDGF-B高表达,抑制Col Ⅳ及Fn分泌,可能是其发挥肾脏保护作用的主要机制。

洛伐他汀对肾小球硬化大鼠纤溶酶原激活物抑制剂-1和Ⅳ型胶原表达的影响

目的观察洛伐他汀对肾小球硬化大鼠纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和Ⅳ型胶原表达影响,探讨其对肾脏的保护作用机制。方法雄性Wistar大鼠24只随机分为对照组、高胆固醇组、洛伐他汀治疗组。饲养12周处死动物,观察血脂、尿蛋白、肾脏病理改变,免疫组织化学法检测PAI-1和Ⅳ型胶原表达。结果洛伐他汀治疗组血胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、尿蛋白、肾脏病理积分明显低于高胆固醇组,且PAI-1、Ⅳ型胶原表达及泡沫细胞较高胆固醇组明显减少。结论洛伐他汀不但可降低血脂,还可能通过抑制PAI-1表达,减少Ⅳ型胶原积聚,减轻肾小球硬化,降低尿蛋白,改善肾功能;其对肾脏保护作用并不依赖降胆固醇作用。