注射用多西他赛胶束无菌检查方法验证

目的建立针对2种注射用多西他赛胶束的无菌检查方法。方法参照2015年版《中国药典》(四部)通则1105无菌检查法,取注射用多西他赛胶束15瓶,用500 mL 0.9%氯化钠溶液溶解,作为供试液,平均分配至3个滤筒过滤。同法制备6个滤筒。每个滤筒用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗3次,每次100 mL,然后加入相应培养基,并分别接种<100 CFU/mL的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、生孢梭菌和黑曲霉,于适宜温度下观察培养。以等量无菌氯化钠溶液替代注射用多西他赛胶束供试液后采用相同的后续操作,作为对照组。采用薄膜过滤法,用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每个滤筒冲洗3次,每次100 mL,检测各菌株生长情况。结果6种验证菌株均在48 h内生长良好,样品的抑菌活性被完全消除。结论注射用多西他赛胶束可用上述方法进行无菌检查。

HPLC测定注射用多西他赛的含量并检查有关物质

目的建立测定注射用多西他赛含量及有关物质的方法。方法采用HPLC法，色谱柱为Luna C18（200mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水（50：50），流速为1．0ml·min^-1，检测波长233nm。结果多西他赛浓度1～200μg·ml^-1与峰面积的线性关系良好（r=0．9999），重复性试验的RSD=0．1％（n=6），高、中、低浓度的平均回收率为101．8％，有关物质检查的限量为2．0％，单个杂质限量为1．0％。结论所建方法准确、简便、快速，适用于注射用多西他赛的质量控制。

注射用多西他赛聚合物胶束细菌内毒素定量检测法的建立

目的建立注射用多西他赛聚合物胶束中细菌内毒素的定量检测方法。方法采用电镜观察和激光粒度仪检测粒径,筛选破坏胶束的适宜条件(分别以pH9,10,11的氢氧化钠溶液破坏);在样品中加入内毒素,再以pH10的氢氧化钠溶液破坏并稀释,检测内毒素浓度,并计算加标回收率;确定胶束破坏后的内毒素检测方法,并验证方法的准确性和精密度。结果pH10的氢氧化钠溶液可破坏胶束;胶束破坏后加入内毒素并稀释至0.5 mg/mL(内毒素为0.5 EU/mL)时内毒素的加标回收率较高(91.81%),且方法的准确性和精密度均较好,当加入内毒素浓度为1.00,0.10,0.01 EU/mL时,平均回收率在96%~108%之间,变异系数<5%,均满足检测要求;3批样品中均未检出内毒素(<0.02 EU/mg)。结论建立的细菌内毒素定量检测方法可用于注射用多西他赛聚合物胶束细菌内毒素的定量检测。

HPLC-ELSD测定多西他赛注射用浓溶液中溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱的含量

目的 建立同时测定多西他赛注射用浓溶液中的溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）、溶血磷脂酰胆碱（LPC）含量的HPLC-ELSD。方法 采用YMC Pack PVA-Sil（150mm×2mm,5μm）色谱柱,以三氯甲烷为流动相A、甲醇-水（93.5∶6.5）为流动相B,梯度洗脱,流速为0.4mL·min1,柱温为25℃,蒸发光散射检测器检测,检测器漂移管温度：100℃,雾化气：空气,气体流量为2.0L·min1。结果 LPE和LPC峰面积的对数与相应的浓度的对数呈良好的线性关系,线性范围分别为0.203~0.811μg（r=0.9990）和0.407~6.102μg（r=0.9996）,LPE3个浓度的平均加样回收率分别为104.1%,95.1%,101.6%,RSD分别为3.8%,0.3%,2.4%,LPC3个浓度的平均回收率分别为108.7%,104.5%,105.5%,RSD分别为1.0%,3.0%,2.6%。结论 该法简单、准确、重复性好,可用于多西他赛注射用浓溶液中大豆磷脂分解产物的质量控制。

多西他赛脂质体热原和细菌内毒素检查方法的研究

目的:对注射用多西他赛脂质体进行热原检查和细菌内毒素检查试验,建立注射用多西他赛脂质体的热原控制方法。方法:按2010年版中国药典(二部)"热原检查"和"细菌内毒素检查法",用家兔法对注射用多西他赛脂质体进行热原检查,并用不同厂家的鲎试剂对不同批号的注射用多西他赛脂质体分别进行细菌内毒素检查试验,并对结果进行比较。结果:注射用多西他赛脂质体以60%乙醇溶解后,稀释到640倍时(0.03 mg.mL-1)对细菌内毒素检查法无干扰作用。结论:对注射用多西他赛脂质体进行细菌内毒素检查是可行的,优于使用家兔法的热原检查对该项目的质量控制。