注射用舒尼铂(冻干)无菌检查方法研究

目的:对注射用舒尼铂(冻干)的无菌检查方法进行适用性研究。方法:按《中国药典》2015年版通则1101进行试验,采用薄膜过滤法对注射用舒尼铂(冻干)进行无菌检查。结果:注射用舒尼铂(冻干)经pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 ml/膜冲洗后,试验组均生长良好,与阳性对照组一致。结论:薄膜过滤法可用于注射用舒尼铂(冻干)的无菌检查。

HPLC法测定注射用顺铂(冻干型)的含量

目的应用高效液相色谱法测定注射用顺铂(冻干型)的含量。方法用Hypersil NH2柱,以乙酸乙酯-甲醇-二甲基甲酰胺-水(25:16:5:5)为流动相,流速为1.0mL.min-1,检测波长为310nm。结果在0.25～3.0mg.mL-1的范围内,进样浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r=0.9999,平均回收率为100.2%,RSD为0.52%,n>9。结论本法简便、灵敏、准确。

注射用益气复脉(冻干)联合顺铂对乳腺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的观察并探讨注射用益气复脉(冻干)(YQFM)联合顺铂对乳腺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法接种4T1肿瘤细胞悬液0.1 mL(细胞总数约1×10^(7))于SPF级BALB/C小鼠第4对乳头下方的皮下脂肪垫制备乳腺癌模型。造模小鼠随机分为模型组、顺铂(1 mg/kg)组、YQFM(914 mg/kg,临床等效剂量)组、1/2顺铂(0.5 mg/kg)+YQFM(914 mg/kg)组、顺铂(1 mg/kg)+YQFM(914 mg/kg)组,各组小鼠均于接瘤后第7天开始给药,顺铂均ip给药,隔天给药1次,共7次;YQFM均尾iv给药,每天1次,共14 d。模型组同法给予9%氯化钠注射液。观察小鼠生活状态、体质量变化;检测实体瘤质量并计算抑瘤率;测量瘤体积变化;ELISA法检测各组小鼠血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、乳酸脱氢酶(LDH)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平。结果与模型组比较,顺铂组、顺铂+YQFM、1/2顺铂+YQFM组小鼠从顺铂第3次给药左右开始出现毛发稀疏、掉毛严重、发呆、行动迟缓、喜抱团等现象,1/2顺铂+YQFM组比单纯顺铂组稍好。与模型组比较,YQFM组体质量显著增加(P<0.05、0.001);顺铂组体质量增长显著减缓(P<0.05、0.001);1/2顺铂+YQFM组和顺铂+YQFM组2组小鼠体质量无显著性差异。与模型组比较,顺铂组、1/2顺铂+YQFM组及顺铂+YQFM组瘤质量均显著减轻(P<0.05),YQFM+顺铂组的抑瘤率最佳,1/2顺铂+YQFM组与顺铂组抑瘤效果相当。与模型组比较,顺铂+YQFM组、顺铂组、1/2顺铂+YQFM组分别是在给药后第7、9、11天时瘤体积出现显著降低(P<0.05)。与模型组比较,顺铂组、1/2顺铂+YQFM组及YQFM+顺铂均能够显著提高IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α水平和降低ATP的含量(P<0.01、0.001);顺铂组和1/2顺铂+YQFM组的LDH含量显著提高(P<0.05);YQFM也能显著性提高IL-2、IFN-γ、TNF-α含量和降低ATP的含量水平(P<0.01、0.001)。与顺铂组比较,1/2顺铂+YQFM组的TNF-α含量显著降低(P<0.01)。结论YQFM与顺铂联合使用对乳腺癌荷瘤小鼠具有一定的增效协同作用。

注射用益气复脉(冻干)联合顺铂对肺癌细胞A549增殖的协同作用研究

目的观察注射用益气复脉(冻干)(YQFM)与顺铂(Cisplatin,DDP)联合对肺癌细胞株A549增殖抑制的协同效应及作用机制。方法采用CCK-8法检测YQFM、DDP以及两药联用对肺癌细胞株A549的增殖影响,并应用两药相互作用指数评价药物的联合效应,采用荧光探针JC-1来检测线粒体膜电位的变化,Wester Blotting检测凋亡相关蛋白Bax、Cleaved-Caspase 3表达。结果药物作用时间48 h,与DDP等剂量组比较,联合用药(YQFM 16.25 mg/mL+DDP 1.25μg/mL、YQFM 16.25 mg/mL+DDP 2.5μg/mL、YQFM 16.25 mg/mL+DDP 5.00μg/mL)组细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05)。与对照组比较,各给药组凋亡率均显著升高(P<0.05),与DDP组比较,联合用药组凋亡率显著升高(P<0.05)。与对照组比较,DDP 5.0、10.0μg/mL组和各联合用药组促凋亡蛋白Bax表达显著增加(P<0.05),DDP质量浓度为5.0、10.0μg/mL时,联合用药组与DDP单独给药组比较,Bax蛋白表达量显著升高(P<0.05)。与对照组比较,各给药组凋亡蛋白Cleaved-caspase 3表达量显著升高(P<0.05),DDP质量浓度为5.0、10.0μg/mL时,联合用药组与DDP单独给药组比较,Cleaved-caspase 3蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论 YQFM联合DDP对A549细胞增殖存在协同抑制作用,机制可能与诱导线粒体凋亡相关。