基于络病理论探讨辛润通络法治疗泻剂结肠的理论内涵

络病理论重视脏腑虚实及其络脉的盈亏通滞,基于络病理论探讨辛润通络法治疗泻剂结肠的理论内涵。泻剂结肠的基本病机为大肠络瘀,耗气伤阴,虚实夹杂,治宜益气养阴、活血通络。在此基础上,结合脏腑气血阴阳与大肠及其络脉系统的关系,灵活运用补肺理气、健脾温中、疏肝养血、补肾益精等辛润通络之法,润燥而不呆补,行气而不破气,常获良效。并附验案1则。

SCF/c-Kit信号通路在“泻剂结肠”发病机制中的作用

目的:探讨SCF/c-Kit信号通路在"泻剂结肠"发病机制中的作用.方法:健康成年SD大鼠36只,随机分为对照组(12只)、模型组(12只)和模型恢复组(12只).对照组大鼠生理盐水灌胃,模型组和模型恢复组大鼠采用"大黄酸混悬液灌胃法"制作"泻剂结肠"动物模型.模型组造模结束后取材,模型恢复组造模结束正常饲养30d后取材.各组大鼠处死前观察首粒黑便排出时间以检测肠道传输功能.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术分别检测各组大鼠结肠组织中c-Kit和SCF的mRNA水平和蛋白水平表达.结果:模型组大鼠首粒黑便排出时间明显延长,与对照组差别显著(491.5±40.2vs373.4±46.5,P<0.01);模型恢复组与模型组相比,首粒黑便排出时间没有统计学差异(477.9±39.6vs491.5±40.2,P>0.05).与对照组相比,模型组的c-Kit和SCF的mRNA水平和蛋白水平表达均明显减弱(P<0.01),而模型恢复组与模型组相比,c-Kit和SCF的蛋白水平表达无明显差异(P>0.05).结论:"泻剂结肠"的结肠动力减退可能与结肠组织中SCF/c-Kit信号通路的表达下调有关.

刺激性泻剂对大鼠结肠肌间神经丛超微结构的影响

目的本实验主要研究刺激性泻剂对大鼠结肠肌间神经丛超微结构的影响及其在慢性便秘发生、发展过程中的作用机制。方法通过建立“泻剂结肠”的动物模型,应用电镜技术对正常大鼠及模型大鼠结肠肠壁肌间神经丛超微结构进行观察及对照研究。结果与正常对照组相比,“泻剂结肠”大鼠肠壁肌间神经丛超微结构有明显的病理损害,表现为结肠肌间神经丛可见神经元细胞线粒体轻度肿胀,神经纤维轴突内线粒体肿胀破裂,“嵴”状结构不完整,神经束轴突及树突扩张,电子密度不均匀,部分明显扩张形成空泡。结论长期应用刺激性泻剂可损害结肠肌间神经丛,其超微结构的改变可能是慢性便秘进一步发展和加重的病理基础之一。

刺激性泻剂对大鼠肠道传输功能的影响

目的研究刺激性泻剂对大鼠肠道传输功能的影响。方法应用大黄和酚酞建立大鼠泻剂结肠模型,采用墨汁推进实验测定大鼠肠道传输功能。结果大黄组墨汁推进长度及百分比(黑染肠管长度/肠管总长度)与正常对照组相比明显缩小,差别有非常显著性意义(P<0.01);酚酞组与正常对照组相比也明显缩小,差别有显著性意义(P<0.05)。结论刺激性泻剂能明显减慢肠道传输,是加重和诱发便秘的一个重要因素。

“泻剂结肠”大鼠胃肠道黏膜嗜铬细胞及5-HT的变化

目的探讨"泻剂结肠"致慢传输型便秘(STC)的发病机制。方法采用大黄浸液灌胃建立大鼠STC模型,免疫组化法观察不同时期大鼠胃肠道黏膜嗜铬细胞的改变,荧光分光光度法检测十二指肠、乙状结肠组织匀浆及血清5-HT的变化。结果实验组大鼠半数稀便时,各段胃肠道嗜铬细胞密度明显低于对照组,80%稀便消失时,胃肠道各段肠嗜铬细胞密度增高,接近对照组;STC模型大鼠胃肠道各段嗜铬细胞密度高于对照组(胃窦、空肠、盲肠P<0.01,回肠P<0.05),十二指肠、乙状结肠组织匀浆5-HT含量明显高于对照组(P<0.01),两组血清5-HT含量无显著差异(P>0.05)。结论泻剂影响整个胃肠道黏膜;泻剂致STC,归因于肠嗜铬细胞对泻剂刺激逐渐耐受,5-HT释放减少,胃肠道运动减慢。

内吗啡肽及μ阿片受体mRNA在“泻剂结肠”大鼠结肠神经丛中的表达及意义

目的观察内吗啡肽(EM)及μ阿片受体mRNA在"泻剂结肠"大鼠结肠神经丛表达和分布,以进一步明确慢传输性便秘(slow tran-sit constipation,STC)的发病机制和病理生理变化。方法建立"泻剂结肠"大鼠动物模型,应用免疫组化法和图像分析系统观察结肠神经丛内EM免疫反应阳性细胞分布和数量变化,用原位杂交法测定结肠中μ阿片受体mRNA的表达水平。结果与对照组相比,泻剂组结肠肌间神经丛EM阳性细胞数量明显增多(10.319±1.612vs7.683±1.359,P<0.05),μ阿片受体mRNA的表达增强(0.3034±0.0651vs0.1823±0.0150,P<0.01),远端结肠尤甚。结论EM及其受体参与结肠动力的调控,肠神经递质及受体的异常可能是STC发病的一种重要因素,提示长期应用刺激性泻剂可损伤肠神经系统,导致肠动力异常,加速STC的病理生理变化。

济川煎对“泻剂结肠”大鼠的治疗效果及作用机制研究

目的了解济川煎对"泻剂结肠"大鼠的治疗效果,并探讨其作用机制。方法于2012年9月,选取健康成年无特定病原体(SPF级)SD大鼠48只,36只经大黄酸混悬液灌胃法制作大鼠"泻剂结肠"动物模型,然后随机分为模型组、聚乙二醇组及济川煎组各12只;余未经造模处理的12只为对照组。对照组和模型组采用0.9%氯化钠溶液灌胃,聚乙二醇组采用聚乙二醇4000水溶液灌胃,济川煎组采用济川煎水煎液灌胃。检测并比较4组大鼠的粪便干湿重比、首粒黑便排出时间,以及结肠组织酪氨酸激酶受体的干细胞因子受体(c-kit)和其配体干细胞因子(SCF)的mRNA、蛋白表达水平。结果济川煎组大鼠的粪便干湿重比低于模型组、聚乙二醇组,差异有统计学意义(P<0.05);而与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。聚乙二醇组大鼠的粪便干湿重比高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。济川煎组大鼠的首粒黑便排出时间长于对照组,短于模型组和聚乙二醇组,差异有统计学意义(P<0.05)。聚乙二醇组大鼠的首粒黑便排出时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。济川煎组大鼠c-kit、SCF的mRNA和蛋白表达水平高于模型组、聚乙二醇组,差异有统计学意义(P<0.05);而与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。聚乙二醇组大鼠c-kit、SCF的mRNA和蛋白表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论济川煎可提高"泻剂结肠"大鼠的结肠动力,软化粪便,治疗效果较好,其机制可能与修复SCF/c-kit信号通路有关。

接触性泻剂损伤小肠传输功能的实验研究

目的 探讨接触性泻剂对小肠传输功能的影响及其病理学机制．方法 采用给大鼠饲料里添加接触性泻剂的方法使大鼠发生腹泻，４５ ｄ 后停止给药，５２ ｄ 后测量大鼠小肠传输功能的改变；并应用免疫组化的方法测定小肠肌间神经丛内血管活性肠肽（ＶＩＰ） 、Ｐ物质和Ｓ－ １００ 蛋白的含量变化．结果 长期大剂量服用接触性泻剂可明显损伤小肠的传输功能，使小肠传输减慢；小肠肌间神经丛内ＳＰ 和Ｓ－ １００ 蛋白的含量增加，而ＶＩＰ无明显变化．结论 长期服用接触性泻剂可明显损害小肠的传输功能。

Cajal间质细胞在大鼠“泻剂结肠”结肠肌电变化中的作用

目的 研究长期服用接触性泻剂对大鼠结肠肌电的影响 ,探讨Cajal间质细胞 (ICC)在“泻剂结肠”肌电变化中的作用。方法 32只大鼠随机分为 2组 ,实验组饲以含酚酞饲料 ,3个月后测定结肠慢波频率及振幅 ;用碘化锌 锇酸法 (ZIO)观察肌间丛ICC变化 ,透射电镜观察肌间丛神经和ICC的超微结构变化。结果 “泻剂结肠”结肠慢波频率明显减慢 (P <0 .0 5 ) ,肌间丛ICC分布不均匀 ,突起连接杂乱 ;电镜下见肌间丛神经轴突空化 ,ICC样细胞变性。结论 长期服用酚酞可导致结肠慢波频率减慢 。

大黄酸建立“泻剂结肠”大鼠模型的研究

目的运用单体大黄酸建立泻剂结肠大鼠模型,观察模型的结肠传输功能。方法用活性炭灌胃法测定首粒黑便排出时间的方法及活性炭悬液推进法测定模型组和对照组大鼠肠道传输功能。结果大黄酸组首粒黑便排出时间较对照组明显延长,其活性炭推进长度及百分比较对照组明显缩短,差别有显著性意义。结论以单体大黄酸建立泻剂结肠大鼠模型,单体质量稳定,浓度易于控制,方法简单,经济易行,造模的时间相对较短。

早期应用缓泻剂减少前列腺电切术后便秘及血尿严重程度的随机对照研究

目的研究早期应用缓泻剂是否能够减少前列腺电切术后便秘及血尿的严重程度。方法根据入选标准和排除标准,将58例受试者随机分为乳果糖组(28例)和对照组(30例)。乳果糖组:每日口服乳果糖口服液15 mL(含乳果糖10 g),术前2 d早餐及晚餐时各服用15 mL,手术当日停用。对照组:术前及术后嘱患者多饮水,减少腹压,吃高纤维素食物等。观察两组患者术后的排便情况及肉眼血尿情况。结果乳果糖组术后肉眼血尿的持续时间为(8±4)d,对照组为(11±4)d,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);乳果糖组大便性状评分及排便困难程度评分均优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在TURP术前及术后应用缓泻剂,能够显著改善术后患者的排便情况,从而减轻患者术后血尿的严重程度。

大黄酸与大黄建立大鼠“泻剂结肠”模型的比较

目的:应用大黄酸及大黄建立大鼠泻剂结肠模型,二者进行比较,寻找一种简单、稳定的建立泻剂结肠动物模型的药物.方法:健康3-4周龄Wistar大鼠33只,均分为对照组、大黄组、大黄酸.对照组给予生理盐水灌胃;大黄组给予大黄粉悬液灌胃;大黄酸组给予大黄酸粉悬液灌胃.造模完成后采用活性炭悬液推进法测定大鼠肠道传输功能.结果:大黄组、大黄酸组造模时间分别为136d和114 d;大黄组及大黄酸组大鼠活性炭末推进长度及推进率较对照组明显缩短.大黄酸组造模过程中大鼠稀便稳定,且给药剂量及造模周期同参考文献报道一致.结论:大黄及大黄酸均可成功建立大鼠泻剂结肠模型,但作为单体大黄酸药效更稳定,浓度易于控制,且造模时间相对较短,故作为造模药物,效果优于大黄.

“泻剂结肠”大鼠模型的制作及其胃肠组织中c-kitmRNA的表达变化

目的制作"泻剂结肠"大鼠模型,并观察其胃、小肠、结肠组织中c-kit mRNA的表达变化。方法健康Wistar雄性大鼠20只,随机分为实验组与对照组,每组各10只。实验组给予大黄酸粉悬液灌胃制作"泻剂结肠"模型,对照组予生理盐水灌胃。造模期间每日观察大鼠粪便形状。造模结束、灌胃停止1周后,以活性炭悬液灌胃,计算活性炭末推进率,据此判断造模是否成功。采用real-time PCR法检测胃窦、小肠、结肠组织中的c-kit mRNA。结果实验组大鼠大便性状较对照组变硬。实验组与对照组活性炭末推进率分别为39.24%±4.28%、61.84%±3.05%,两组相比,P<0.05。实验组"泻剂结肠"模型制作成功。实验组大鼠胃窦、小肠、结肠组织中c-kit mRNA相对表达量分别为0.61±0.08、0.37±0.02、0.32±0.03,对照组分别为0.67±0.03、0.90±0.05、1.01±0.09,两组小肠及结肠组织中c-kit mRNA相对表达量相比,P均<0.05。结论采用大黄酸粉悬液灌胃法成功制作了"泻剂结肠"大鼠模型,其小肠、结肠组织中c-kit mRNA表达下调,可能与"泻剂结肠"的形成有关。

内吗啡肽1对泻剂结肠大鼠肠道传输功能的影响

目的研究内吗啡肽(EM)对泻剂结肠大鼠结肠传输功能的影响,探讨慢传输性便秘(STC)的发病机制。方法建立大鼠“泻剂结肠”模型,采用活性炭悬液推进法测定肠道传输功能。结果与对照组相比,泻剂结肠组的传输功能明显减慢,内吗啡肽1(EM1)对泻剂结肠传输功能产生浓度相关的抑制作用,纳洛酮能减弱EM1的抑制作用。结论EM1参与了泻剂结肠动力的调控,是STC的重要致病因素之一。

阿片受体信号调节相关蛋白RGS4及β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中的表达变化

目的探讨泻剂结肠大鼠结肠中阿片受体信号调节相关蛋白RGS-4和β-arrestin2的表达变化及意义。方法 7~8周龄Wistar大鼠16只,体质量（200±20）g,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组（n=8）及泻剂结肠组（n=8）,饲养环境温度18~28℃,相对湿度40%~80%。对照组饲以普通软饲料,泻剂结肠组饲以混有酚酞的饲料,建立泻剂结肠大鼠模型。通过RT-PCR及Western blot方法对RGS-4和β-arrestin2在结肠中的表达进行相对定量分析。结果两种阿片受体信号调节蛋白在泻剂结肠组及对照组大鼠结肠内均有不同程度的表达。RT-PCR结果显示泻剂结肠组RGS-4和β-arrestin2 mRNA相对表达水平均明显高于对照组[（3.418 3±0.247 4）vs（0.987 6±0.034 1）,（2.974 4±0.214 2）vs（0.921 1±0.040 1）,P〈0.01]。Western blot检测结果显示RGS-4和β-arrestin2的表达在泻剂结肠组较对照组明显升高[（0.403 4±0.049 9）vs（0.115 3±0.010 2）,（0.913 9±0.061 1）vs（0.467 6±0.043 7）,P〈0.01]。结论RGS-4和β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中表达均明显增强,提示其可能增强泻剂结肠大鼠结肠MOR信号传导调节功能。

回直肠吻合分流术对泻剂依赖型慢传输便秘大鼠的排便影响

目的:建立泻剂依赖型大鼠慢传输型便秘(STC)模型,完成回肠直肠吻合分流手术,观察该术式对STC大鼠排便的影响,初步探讨其对STC的治疗效果.方法:72只SD大鼠,随机取10只作为正常对照组,其余62只用大黄小剂量递增灌胃造模.造模过程中死亡5只,剩余57只,手术前处死12只作为模型对照组.剩余的45只大鼠,随机35只手术组,10只自然恢复组,测定并比较各组大鼠间胃肠传输时间及粪便干湿质量比.结果:(1)胃肠传输时间(min):正常对照组为341.77±31.89,模型组为398.83±25.17,1 mo恢复组为428.73±36.19,术后1 mo组为183.6±35.96,各组间对比有明显差异(P<0.05);(2)粪便干湿质量(干/湿):正常对照组为0.444±0.048,模型组为0.495±0.053,1 mo恢复组为0.531±0.033,术后10 d测量为0.139±0.061,术后1 mo为0.372±0.058,各组间对比差异显著(P<0.05).结论:回直肠吻合分流术对STC大鼠的胃肠传输时间及粪便性状影响显著,明显改善了便秘大鼠的症状,且术后1 mo较术后10 d腹泻症状明显改观.

“泻剂结肠”大鼠结肠肌电活动及其对乙酰胆碱反应的变化

目的 探讨慢传输型便秘 (Slowtransitconstipation ,STC)的发生机制。方法 建立大鼠“泻剂结肠”模型 ,测定大鼠结肠肌电生理活动及其对乙酰胆碱 (Ach)的反应变化。结果 “泻剂结肠”大鼠结肠慢波的频率减慢与振幅降低 ;结肠对Ach的反应性明显减弱。结论 长期服用接触性泻剂 ,对结肠ENS有损害作用 。

“泻剂结肠”大鼠的结肠肌电生理变化及其意义

目的 探讨慢传输型便秘 (STC)的发生机理。方法 建立大鼠“泻剂结肠”模型 ,并测定其结肠的肌电生理活动变化。结果 “泻剂结肠”大鼠的结肠慢波频率减慢 ,振幅降低 ;餐后峰电位发放明显少于正常对照组且持续时间短 ,表明胃结肠反射明显减弱。结论 该研究结果提示 ,长期服用接触性泻剂对结肠肠神经系统有损害作用 。

泻剂结肠大鼠模型阿片受体表达变化

目的探讨3种阿片受体亚型（MOR、DOR、KOR）在泻剂结肠大鼠模型结肠内的表达变化及意义。方法使用7~8周龄Wistar大鼠20只,体质量（200±20）g,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组（n=10）及泻剂结肠组（n=10）,单只分笼饲养（环境温度18~28℃,相对湿度40%~80%）。对照组饲以普通饲料,泻剂结肠组饲以含酚酞饲料。通过RT-qPCR及Western blot法对阿片受体在结肠中的表达进行相对定量分析。结果 3种阿片受体亚型在泻剂结肠组及对照组大鼠结肠内均有不同程度的表达。RT-qPCR检测显示泻剂结肠组MOR、DOR及KOR mRNA相对表达水平均明显高于对照组[（5.093±1.410）vs（1.092±0.222）,（2.612±0.612）vs（1.032±0.082）,（2.607±0.327）vs（0.995±0.109）,P〈0.01]。Western blot检测显示泻剂结肠组MOR、DOR及KOR的表达较对照组明显升高[（0.361±0.023）vs（0.152±0.021）,（0.246±0.059）vs（0.159±0.005）,（0.309±0.018）vs（0.201±0.015）,P〈0.01]。结论各阿片受体亚型在泻剂结肠大鼠结肠中表达均明显增强,提示其对泻剂结肠大鼠结肠运动及分泌功能可能存在明显的抑制作用。

四君子汤对泻剂结肠模型大鼠肠道肌间神经丛乙酰胆碱脂酶活性的影响

目的:观察四君子汤对泻剂结肠模型大鼠肠道肌间神经丛乙酰胆碱脂酶活性的影响,探讨四君子汤对泻剂结肠的治疗作用。方法:应用大黄浸液建立大鼠泻剂结肠模型,建模后给予四君子汤治疗,观察回肠和横结肠肌间神经丛乙酰胆碱脂酶活性的变化。结果:治疗组回肠及横结肠肌间神经丛AchE活性与对照组无差异(P>0.05),明显高于模型组及自然恢复组(P<0.01)。结论:四君子汤对于泻剂结肠神经递质的改变有明显的恢复作用。