PMP柱前衍生反相高效液相色谱—紫外检测法结合离子色谱—脉冲安倍法测定不同产地泽泻多糖的单糖组成

本文建立了1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法结合离子色谱-脉冲安倍法测定泽泻中10种单糖含量的测定方法,并比较了不同产地泽泻多糖中的单糖组成差异。经测定泽泻多糖中含有葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖,其中葡萄糖含量最高,说明泽泻多糖是以葡聚糖为主的杂多糖。不同产地泽泻多糖中葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸含量差异显著(P<0.05),葡萄糖含量由高到低依次为广泽泻(166.940~264.724 mg/g)、川泽泻(82.647~155.019 mg/g)和建泽泻(51.148~97.746 mg/g);广泽泻多糖中半乳糖含量(3.511~3.840 mg/g)显著高于川泽泻(1.193~1.797 mg/g,P<0.01)和建泽泻(低于定量限);仅有广泽泻中半乳糖醛酸含量(1.342~1.823 mg/g)高于方法定量限。广泽泻中葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸摩尔比为60.13∶1∶0.40,川泽泻中葡萄糖、半乳糖摩尔比为1545.05∶1,建泽泻多糖中几乎都是葡萄糖,葡萄糖占比在上述产地多糖中依次增加,三种单糖的杂合程度依次减弱。研究结果将为泽泻多糖的结构研究和质量控制奠定基础。

泽泻多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及脂代谢紊乱的改善作用及机制研究

目的:考察泽泻多糖对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗及脂代谢紊乱的影响及可能机制。方法:采用高脂饮食饲养联合腹腔注射链脲佐菌素(30 mg/kg)法建立T2DM大鼠模型。将造模成功的50只大鼠随机分为模型组(生理盐水)、格列本脲组(阳性对照,25 mg/kg)和泽泻多糖高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg),每组10只;另选10只正常大鼠作为正常对照组(生理盐水)。各组均灌胃给药,每天1次,连续6周。给药5周后进行糖耐量实验,分别检测腹腔注射2 g/kg葡萄糖溶液后0、30、60、90、120 min大鼠空腹血糖(FBG)水平。给药6周后,检测大鼠血清中空腹胰岛素(FINS)、FBG水平并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI);检测大鼠血清中游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平。结果:与正常对照组比较,糖耐量实验中,模型组大鼠0~120 min的FBG水平均升高;给药6周后,模型组大鼠血清中FINS、LDL-C水平和ISI以及肝组织中SOD、GSH-Px水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,除泽泻多糖低剂量组大鼠HOMA-IR和血清中LDL-C、HDL-C水平改善不显著外(P>0.05),其余各给药组大鼠各指标均显著改善(P<0.05)。结论:泽泻多糖可能通过抗氧化作用来改善T2DM大鼠胰岛素抵抗及脂代谢紊乱。

响应面法优化纤维素酶提取泽泻多糖的工艺研究

目的：利用响应面法优化纤维素酶提取泽泻多糖的工艺。方法：以泽泻多糖含量为检测指标,在单因素考察的基础上,利用响应面法对料液比、pH值、酶解温度3个因素进行优化。结果：纤维素酶提取泽泻多糖的最佳工艺为：料液比为1∶20（g/m L）、酶用量为0.4%、酶解温度为40℃、酶解时间为120 min、pH为4.5、物料粒度为80～100目。在该条件下,泽泻多糖的提取率高达18.89%,是传统水提多糖得率的3.96倍。结论：纤维素酶能显著提高泽泻多糖的提取率。

泽泻多糖激活PPAR-γ/LXR-α/ABCG1信号通路发挥对糖尿病肾病大鼠的保护作用

目的 探究泽泻多糖对糖尿病大鼠肾损伤的改善作用。方法 SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组,模型组,吡格列酮[过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)激活剂,20 mg·kg^(-1)]组,泽泻多糖低、中、高剂量(100、200、400 mg·kg^(-1))组和泽泻多糖(400 mg·kg^(-1))+GW9662 (PPAR-γ抑制剂,10 mg·kg^(-1))组,除对照组外均采用高糖高脂+链脲佐菌素(STZ)柠檬酸钠缓冲液法制备糖尿病肾病(DN)大鼠模型,造模后各组ig给药,每天1次,连续6周。血糖仪测定大鼠空腹血糖(FBG)水平;全自动生化分析仪检测大鼠血清肌酐、尿酸、尿素氮水平,检测24 h尿蛋白及尿肌酐,计算内生肌酐清除率(Ccr);处死大鼠,计算大鼠肾脏指数;HE染色观察大鼠右侧肾脏组织病理学变化;Western blotting法检测肾脏组织PPAR-γ/肝X受体-α(LXR-α)/ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠毛色枯黄,体质量显著减轻(P<0.05);肾小球细胞空泡化、肾小球基底膜增厚;肾脏指数、FBG、24 h尿蛋白、尿酸、尿素氮、TNF-α和IL-1β蛋白水平显著升高(P<0.05),Ccr和PPAR-γ、LXR-α、ABCG1蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,吡格列酮组和中、高剂量泽泻多糖组大鼠毛色及饮食、饮水逐渐恢复,体质量显著增加(P<0.05);肾损伤程度减轻;FBG、24 h尿蛋白、尿酸、TNF-α和IL-1β蛋白水平显著降低(P<0.05),Ccr及PPAR-γ、LXR-α、ABCG1蛋白水平显著升高(P<0.05);泽泻多糖高剂量组肾脏指数显著降低(P<0.05)。高剂量泽泻多糖组与吡格列酮组各指标差异比较无统计学意义,GW9662可逆转高剂量泽泻多糖对大鼠肾脏功能的保护作用。结论 泽泻多糖可能通过激活PPAR-γ/LXR-α/ABCG1通路保护DN大鼠肾脏。

泽泻多糖对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究泽泻多糖对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法分别取昆明小鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,分别为正常组和模型组(灌胃给予蒸馏水),联苯双酯组(200 mg/kg),泽泻多糖低、中、高剂量组(300,600,1200 mg/kg),小鼠均ig给药,每天1次,连续7 d,末次给药2 h后,除正常组外,其他各组均ip CCl_4造成急性肝损伤。给药后测定小鼠肝脏系数和脾脏系数,测定CCl_4肝损伤小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(T-BIL),超氧化物歧化酶(SOD)活性,测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝损伤组织病理切片。结果与正常组比较,模型组CCl4肝损伤小鼠血清中AST,ALT,TBIL活性明显升高,而SOD活性明显降低(P<0.01);肝脏组织中SOD活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01),模型组病理学观察肝损伤均较为明显。与模型组比较,泽泻多糖中、高剂量能够明显降低AST,ALT,T-BIL活性,同时明显升高SOD活性(P<0.05,P<0.01);并能明显够升高肝组织中SOD活性和明显降低MDA含量(P<0.05),病理检查结果显示泽泻多糖具有明显的保肝作用。结论泽泻多糖多小鼠CCl4肝损伤有良好的保护作用。

泽泻多糖对非酒精性脂肪肝病小鼠的预防作用

探究泽泻多糖预防非酒精性脂肪肝药理作用。方法:采用高脂诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝模型来评价泽泻多糖预防作用,随机将小鼠分成正常组、非酒精性脂肪性肝模型组和泽泻多糖给药非酒精性脂肪性肝模型组,每组小鼠10只,采用预防性给药10周后测定各组小鼠肝脏指标,包括谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝脏组织病理切片以及其他指标(体重、肝重、血脂)、谷丙转氨酶(AST)的水平。结果:与模型组比较,泽泻多糖能够显著性降低肝损伤指标AST及ALT水平,降低小鼠肝脏重量、抑制小鼠体重和血脂水平,改善小鼠肝组织脂肪变性。结论:泽泻多糖可降低非酒精性脂肪性肝病小鼠体重、肝脏重量、降低血清AST和ALT水平、调节血脂紊乱及肝脏脂肪变性,从而起到非酒精性脂肪肝病的预防作用。

泽泻多糖对糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢的影响

目的：研究泽泻多糖提取物对糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢及肝脏脂联素受体α（Adipo R2）,过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARα）mRNA和蛋白表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：采用腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）建立糖尿病大鼠模型,并随机分组为正常组、模型组、盐酸吡格列酮组、泽泻多糖高、中、低（400,200,100 mg·kg-1）剂量组,每组8只,给予相应的药物治疗30 d。实验结束后,比较各组大鼠的体质量,肝重,葡萄糖耐受量（OGTT）,空腹血糖值（FBG）,空腹胰岛素水平（FINS）,糖化血清蛋白（GSP）,糖化血红蛋白（HbA1c）,血清总胆固醇（TC）,甘油三脂（TG）,低密度脂蛋白（LDL）,高密度脂蛋白（HDL）及肝脏形态组织学等指标;免疫组化法观察大鼠胰腺胰岛素样生长因子（IGF）水平;实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测肝脏组织中Adipo R2,PPARαmRNA和蛋白表达水平。结果：与模型组比较,泽泻多糖能明显降低糖尿病大鼠的体质量和肝重（P〈0.01）,并能明显降低大鼠FBG,HbA1c,GSP水平（P〈0.05）,明显降低TC,TG,LDL水平（P〈0.01）,升高HDL指标水平（P〈0.01）;升高肝脏Adipo R2,PPARαmRNA水平（P〈0.05）和蛋白表达水平（P〈0.01）。结论：泽泻多糖具有显著调节糖尿病大鼠糖脂代谢的作用,其作用机制与其提高肝脏Adipo R2,PPARαmRNA和蛋白表达水平相关联,并对糖尿病并发症和肝脏组织脂肪积累具有一定的防治作用。