基于Akt/mTOR信号通路探讨洋地黄毒苷调控甲状腺滤泡上皮细胞自噬与凋亡的机制

目的探究洋地黄毒苷对脂多糖刺激下的人甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-roi3-1凋亡与自噬的影响及其作用机制。方法①将Nthy-roi3-1细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+洋地黄毒苷低剂量组、脂多糖+洋地黄毒苷中剂量组及脂多糖+洋地黄毒苷高剂量组,各组进行对应处理后,CCK-8法检测各组细胞活力,免疫荧光染色观察各组细胞自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Bcl-2同源结构域蛋白抗体(Beclin 1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70S6K蛋白表达情况。②将Nthy-roi3-1细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+洋地黄毒苷组、脂多糖+洋地黄毒苷+自噬抑制剂组,各组进行对应处理后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR及p70S6K蛋白表达情况。结果①与脂多糖组比较,脂多糖+洋地黄毒苷各组的细胞活力均明显升高(P均<0.05);LC3荧光染色强度随洋地黄毒苷剂量增加逐渐增强,细胞凋亡率均明显降低(P均<0.05);细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),细胞中p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p70S6K蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。②与脂多糖组比较,脂多糖+洋地黄毒苷组细胞凋亡率明显降低(P<0.05);细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),细胞中p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p70S6K蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。与脂多糖+洋地黄毒苷组比较,脂多糖+洋地黄毒苷+自噬抑制剂组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),细胞中p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、p70S6K蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。结论洋地黄毒苷能够促进脂多糖刺激下Nthy-roi3-1细胞自噬,抑制细胞凋亡,该作用可能与其抑制Akt/mTOR信号通路的激活有关。

七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症的临床观察

目的探究七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症的临床疗效。方法按照随机数字表法将2020年10月~2023年11月期间收治并确诊的青光眼药源性干眼症患者60例分为对照组(重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶,n=30)和研究组(重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶+七叶洋地黄双苷滴眼液,n=30)。评估两组治疗效果、泪液动力学水平、生活质量。结果研究组总有效率(96.67%)高于对照组(73.33%)(P<0.05);治疗4周后,研究组泪液动力学、生活质量各指标水平均优于对照组(P<0.05)。结论七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症可有效缓解症状,改善泪液动力学水平,提高生活质量。

洋地黄双苷眼用凝胶对大鼠糖尿病视网膜病变中细胞因子及炎症介质的影响

目的本研究在大鼠糖尿病的基础上制备视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)模型,观察洋地黄双苷眼用凝胶对DR的保护作用,并对其机制进行探讨。方法取100只SD大鼠,尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)100 mg/kg,四氧嘧啶100 mg/kg,3 d后诱发糖尿病,3个月后造成视网膜病变模型。模型大鼠分为5组,用不同质量浓度的洋地黄双苷眼用凝胶(0.1、0.3、0.5 mg/m L,早、午、晚各点眼1次),ELISA法测定血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-6(IL-6)的水平,另取视网膜进行铺片,观察DR血管病理变化。结果视网膜病变动物一般状态较差,血糖、尿糖均升高,体质量下降,模型组VEGF、b FGF、IL-6和TNF-α水平均增加,与空白组比较,均具有显著性差异(P<0.05)。给予不同质量浓度的洋地黄双苷眼用凝胶后,以上4个指标水平均降低,与模型组比较,均具有显著性差异(P<0.05)。另外,给药组视网膜微血管病变明显改善,白内障及失明率显著下降。结论洋地黄双苷眼用凝胶通过降低炎症介质(IL-6和TNF-α)及细胞因子(VEGF和b FGF)水平,对DR具有治疗作用。

七叶洋地黄双苷滴眼液对白内障术后黄斑水肿的影响

目的探讨七叶洋地黄双苷滴眼液对白内障术后黄斑水肿的影响。方法80例白内障术后黄斑水肿患者,采用随机数字表法将其分对照组和观察组,各40例。对照组服用维生素E、维生素C治疗,观察组在对照组基础上接受七叶洋地黄双苷滴眼液治疗。比较两组患者治疗前以及治疗后2周、1个月的最佳矫正视力、阅读速度评分、黄斑色素密度、黄斑中心凹神经上皮层厚度。结果观察组患者治疗后2周、1个月的最佳矫正视力分别为(0.43±0.02)、(0.81±0.05),均高于对照组的(0.37±0.04)、(0.51±0.03),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后2周、1个月阅读速度评分分别为(3.19±0.51)、(4.32±0.25)分,均高于对照组的(2.85±0.51)、(3.68±0.23)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后2周、1个月的黄斑色素密度分别为(0.16±0.04)、(0.25±0.06)DU,均高于对照组的(0.11±0.03)、(0.15±0.07)DU,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后2周、1个月的黄斑中心凹神经上皮层厚度分别为(185.25±1.32)、(181.21±1.69)μm,均低于对照组的(198.35±1.32)、(195.24±1.02)μm,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论七叶洋地黄双苷滴眼液能更好的缓解白内障术后黄斑水肿,改善患者视力,提升阅读速度。

七叶洋地黄双苷滴眼液对老年黄斑变性的疗效观察和机制初探

目的观察七叶洋地黄双苷滴眼液治疗老年黄斑变性的疗效并初步探讨作用机制。方法本院眼科96例单眼为老年黄斑变性患者,分为对照组和治疗组,对照组进行常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用七叶洋地黄双苷滴眼液,所有患者均治疗4周。测定患者在治疗前、治疗1周、2周和4周的视力、阅读速度以及视网膜黄斑色素密度。结果治疗前2组患者视力、阅读速度和视网膜黄斑色素密度相当,治疗2周和4周后2组患者视力、阅读速度和视网膜黄斑色素密度均较给药前显著改善,并且治疗组优于对照组。结论七叶洋地黄双苷滴眼液治疗老年黄斑变性疗效肯定,其作用机制可能与增加视网膜黄斑色素密度有关。

葛根汤加减联合七叶洋地黄双苷滴眼液治疗睑板腺功能障碍性干眼的临床价值研究

目的探讨葛根汤加减联合七叶洋地黄双苷滴眼液治疗睑板腺功能障碍性干眼的临床价值。方法选择2020年3月—2022年5月泰安市中医二院收治的睑板腺功能障碍所致干眼症患者80例为研究对象。按照随机数表法分为两组,各40例。所有患者均使用人工泪液,对照组给予七叶洋地黄双苷滴眼液,观察组在对照组治疗的基础上配合葛根汤治疗。比较两组治疗后睑板腺分泌能力及分泌物性状变化,治疗后眼表疾病患病指数及泪膜破裂时间,分析治疗后人眼泪液所含蛋白水平变化,统计临床治疗效果。结果观察组睑板腺分泌能力和分泌物性状评分分别为(4.3±0.6)分、(2.3±0.4)分,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后眼表疾病患病指数为(91.7±6.5)分,泪膜破裂时间为(12.6±2.5)s,均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组人神经趋化蛋白和IL-1受体拮抗蛋白分别为(386.9±53.7)、(251.0±78.9)μg/L,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总有效率为97.5%,高于对照组的75.0%,差异有统计学意义(χ^(2)=8.538,P<0.05)。结论葛根汤加减联合七叶洋地黄双苷滴眼液治疗睑板腺功能障碍性干眼症,能有效改善睑板腺分泌功能,缓解患者临床症状,提高泪液稳定性,确保临床治疗效果。

七叶洋地黄双苷滴眼液与雷珠单抗联合治疗渗出型黄斑变性的效果分析

目的 分析七叶洋地黄双苷滴眼液与雷珠单抗联合治疗渗出型黄斑变性的效果。方法 选取2022年6月—2023年5月期间曹县人民医院收治的88例渗出型黄斑变性患者为研究对象,使用随机数表法将其分为两组,每组44例。对照组应用雷珠单抗治疗,研究组在其基础上应用七叶洋地黄双苷滴眼液治疗。针对两组患者的临床疗效、眼底情况,以及不良反应进行比较。结果 研究组治疗的总有效率为93.18%,高于对照组的75.00%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.436,P<0.05)。研究组治疗3个月后黄斑中心凹厚度、眼底出血与渗出面积均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 七叶洋地黄双苷滴眼液与雷珠单抗联合治疗渗出型黄斑变性效果确切,可以有效减少眼底出血与渗出面积,安全性较为理想,具有临床应用价值。

七叶洋地黄双苷滴眼液治疗视频终端性儿童异常瞬目症的效果研究

目的探讨视频终端性儿童异常瞬目症患儿采用七叶洋地黄双苷滴眼液展开对应治疗后获得的临床效果。方法方便选取2021年3月—2023年2月平邑县妇幼保健院收治的58例视频终端性儿童异常瞬目症患儿为研究对象,根据投掷硬币法分为参照组和研究组,每组29例。参照组采用的治疗药物为玻璃酸钠滴眼液,研究组采用的治疗药物为七叶洋地黄双苷滴眼液。对于两组患儿的用药总有效率、不良反应(眼部刺痛感、眼部烧灼感)总发生率以及临床症状评分展开对比。结果研究组用药总有效率(93.10%)高于参照组(72.41%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.350,P<0.05)。两组不良反应(眼部刺痛感、眼部烧灼感)总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组临床症状评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组临床症状评分显著低于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于视频终端性儿童异常瞬目症患儿的治疗,同玻璃酸钠滴眼液展开比较,七叶洋地黄双苷滴眼液的有效应用,可在对安全性做出保障情形下,提升患儿的治疗效果,显著缓解系列症状,可促进视频终端性儿童异常瞬目症患儿的良好预后。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液联合七叶洋地黄双苷滴眼液治疗干眼症的效果分析

目的采取重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液联合七叶洋地黄双苷滴眼液治疗干眼症,分析其治疗效果。方法选取2021年1月-2021年7月本院门诊诊治的干眼症患者1563例进行研究,经系统抽样将其划分为实验组(781例)、对照组(782例)。对照组采取重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液治疗,实验组采取重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液联合七叶洋地黄双苷滴眼液治疗。比对两组的治疗总有效率、临床指标水平、生活质量测量值。结果实验组治疗总有效率比对照组更高(P<0.05);实验组临床指标水平比对照组更优(P<0.05);实验组生活质量测量值比对照组更高(P<0.05)。结论采取重组牛碱性成纤维细胞生长因子滴眼液联合七叶洋地黄双苷滴眼液治疗干眼症,治疗效果好,不仅使患者的症状得到了明显的缓解,而且其角膜染色、泪液分泌量等情况也有所改善,生活水平得到了大幅度的提高。

七叶洋地黄双苷滴眼液治疗青少年屈光不正所致视疲劳

目的:观察七叶洋地黄双苷滴眼液治疗青少年屈光不正所致视疲劳的临床疗效。方法:双眼屈光不正所致视疲劳青少年患者60例据数字表法随机分为2组,对照组(n=30例)滴加同批次安慰剂治疗;观察组(n=30例)滴加七叶洋地黄双苷滴眼液治疗,两组疗程均为6mo。比较两组临床疗效,治疗前后舒适度评分、屈光检查结果及不良反应。结果:观察组治疗总有效率(97%)明显高于对照组(33%),差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前舒适度评分比较无显著统计学差异(P>0.05),治疗后对照组舒适度评分无明显改善(P>0.05),观察组治疗后舒适度评分较治疗前和对照组治疗后均明显升高(P<0.05);两组治疗前左眼及右眼屈光检查结果比较无显著统计学差异(P>0.05),治疗后对照组左眼及右眼屈光检查结果无明显改善(P>0.05),观察组治疗后左眼及右眼屈光检查结果较治疗前和对照组治疗后均明显改善(P<0.05);观察组心律失常、胃肠道反应、神经精神官能症等不良反应发生率(17%)与对照组(10%)比较无显著统计学差异(P>0.05)。结论:七叶洋地黄双苷滴眼液治疗青少年屈光不正所致视疲劳疗效显著,不良反应少。

七叶洋地黄双苷滴眼液治疗青少年屈光不正性视疲劳

目的:评价七叶洋地黄滴眼液治疗青少年屈光不正性视疲劳的效果。方法:研究对象为2011-04/2012-04在本院门诊就诊的屈光不正且具有典型的视疲劳症状患者200例400眼,年龄6～18岁,入选者采用(德国施图伦大药厂)七叶洋地黄双苷滴眼液3次/d,每次1滴,共使用1mo。通过进行调查问卷评分测定视疲劳主觉症状改善情况,以及视力和屈光度的改变和药物的不良反应。结果:用药前后患者的视疲劳主觉症状评分:治疗前3.67,治疗结束后1.89,治疗前和治疗后差异有统计学意义(P<0.05)。患者的裸眼视力有所提高,治疗前200例400眼平均视力为4.43±0.38,治疗后为4.60±0.49,组间比较差异有统计学意义(t=-3.87,P<0.05)。治疗前后屈光度由-2.54±3.00D降至-2.25±2.98D,但差异没有统计学意义(t=-0.96,P=0.33)。没有发现明显的不良反应。结论:七叶洋地黄滴眼液对青少年屈光不正性视疲劳安全、有效。

七叶洋地黄双苷滴眼液治疗激光术后视疲劳的疗效分析

目的:评价七叶洋地黄双苷滴眼液(施图伦)治疗激光术后患眼视疲劳的临床效果。方法:对60例91眼激光治疗后使用七叶洋地黄双苷滴眼液的患者,分别在激光后即刻、用药后1d;1wk;1mo进行视疲劳症状问卷调查,同时观察药物的不良反应。结果:所有患者在激光治疗后均出现不同程度视疲劳症状,各项观察指标积分在应用七叶洋地黄双苷滴眼液后1d明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。所有病例未发现全身和眼部不良反应。结论:七叶洋地黄双苷滴眼液能安全、快速、有效缓解激光术后视疲劳的症状和体征。

七叶洋地黄双苷滴眼液治疗老年2型糖尿病干眼症的疗效

目的探讨七叶洋地黄双苷滴眼液在老年2型糖尿病(T2DM)干眼症治疗中的应用价值。方法对57例(113眼)确诊患有干眼症的老年T2DM患者应用七叶洋地黄双苷滴眼液4 w,通过干眼症状评分,泪液分泌试验(SIt)、泪膜破裂时间(BUT)、角膜地形图检查评估七叶洋地黄双苷滴眼液的疗效。结果治疗组30例(59眼)患者在应用七叶洋地黄双苷滴眼液前干眼症状评分、SIt值、BUT值、SAI和SRI值分别为(2.60±0.94)分,(5.44±1.45)mm,(6.16±1.64)s,0.84±0.38,0.96±0.36;用药4 w后,分别为(1.99±0.99)分,(5.90±1.45)mm,(7.98±2.46)s,0.68±0.31,0.81±0.28,干眼症状评分、BUT值、SAI和SRI值变化有统计学意义,SIt值变化无统计学差异。非用药对照组27例(54眼)患者,同期观察检查结果无差异。结论七叶洋地黄双苷滴眼液能在一定程度上提高老年T2DM患者泪膜的规则性和稳定性,但对改善泪液分泌作用不明显。

三种真菌对洋地黄毒苷的生物转化特性研究

考察了新月弯孢霉(Curvularia lunata)AS3.3589、蓝色犁头霉(Absidia coerulea)CICC40302和雷斯青霉(Penicillium raistrickii)ATCC10490对洋地黄毒苷的生物转化特性.结果表明:新月弯孢霉AS3.3589转化洋地黄毒苷得到2个产物,即产物Ⅰ和产物Ⅱ,产物Ⅰ的转化率为27%,产物Ⅱ的转化率为5%;蓝色犁头霉CICC40302转化洋地黄毒苷得到1个产物,即产物Ⅲ,转化率为6%;雷斯青霉ATCC10490对洋地黄毒苷不发生转化反应.通过优化新月弯孢霉KA-91生物转化反应的工艺条件,使转化产物Ⅰ的转化率达到38%,产物Ⅱ的转化率达到10%.

七叶洋地黄双苷滴眼液与眼部按摩治疗视频终端视疲劳的效果

目的:评价七叶洋地黄双苷滴眼液与眼局部穴位按摩单用及联用治疗视频终端(video display terminal,VDT)视疲劳的效果。方法:随机数字表法将224例VDT视疲劳患者分为滴眼液组、按摩组、合用组及对照组各56例,分别用七叶洋地黄双苷滴眼液治疗、眼局部穴位按摩治疗、七叶洋地黄双苷滴眼液与按摩联合治疗及常规用眼卫生指导,疗程4wk。以症状疗效指数、泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌试验(SⅠt)和角膜荧光素染色积分作为评价指标。结果:(1)合用组症状疗效指数(78.96±5.29)%高于滴眼液组(69.55±6.23)%和按摩组(71.15±6.41)%,而滴眼液组和按摩组又高于对照组(33.01±4.26)%(P<0.01);七叶洋地黄双苷滴眼液、按摩的主效应及二者的交互作用对疗效指数的影响均有统计学意义(P<0.01)。(2)滴眼液组、按摩组、合用组干预后的BUT值和SⅠt值较干预前提高(P<0.05);干预后合用组BUT值大于滴眼液组、按摩组和对照组;对照SⅠt值低于滴眼液组、按摩组及合用组。结论:七叶洋地黄双苷滴眼液滴眼和眼局部穴位按摩均可显著改善VDT视疲劳患者的症状和眼生理状况,二者合用具有协同增效作用。

七叶洋地黄双苷滴眼液治疗飞秒激光辅助准分子激光原位角膜磨镶术后早期视疲劳的疗效观察

目的评价七叶洋地黄双苷滴眼液治疗飞秒激光辅助准分子激光原位角膜磨镶术(FS-LASIK)后早期视疲劳的临床效果。方法回顾性分析行FS-LASIK术后1周诉双眼视疲劳患者118例236眼,随机分为治疗组62例(124眼)和对照组56例(112眼)。2组除术后常规用药外,治疗组加用七叶洋地黄双苷滴眼液,分别于治疗后1周、2周、3周、4周对2组视疲劳评分、调节幅度、调节灵敏度、调节滞后量进行分析。结果治疗组在用药1周、2周、3周时视疲劳评分比较,2组差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组在用药4周时视疲劳评分为(2.13±0.99)分;对照组视疲劳评分为(2.77±1.19)分,2组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组在用药1周、2周、3周时调节幅度比较,2组差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组在用药4周时调节幅度为(9.77±0.83)D,对照组调节幅度为(9.66±0.83)D,2组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组在用药1周、2周、3周时调节灵敏度度比较,2组差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组在用药4周时调节灵敏度(9.73±1.08)cpm/min,对照组调节灵敏度度(9.18±1.05)cpm/min,2组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组在用药1周、2周、3周时调节滞后量比较,2组差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组在用药4周时调节滞后量(0.94±0.22)D,对照组调节滞后量(1.02±0.27)D,2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论七叶洋地黄双苷滴眼液对FS-LASIK术后早期视疲劳主觉症状及客观调节指标都有明显改善作用,七叶洋地黄双苷滴眼液治疗FS-LASIK术后早期视疲劳安全、有效,值得推广应用。

赭曲霉转化洋地黄毒苷的工艺优化和产物活性分析

以赭曲霉Rn405转化洋地黄毒苷的微生物转化工艺为研究对象,对助溶剂种类、底物浓度、金属离子种类和浓度等关键参数进行优化,确定的最优转化条件为:发酵培养基中添加1 mmol/L Mn2+离子,28℃,180 rpm振荡培养28 h时加入溶解于DMSO的底物溶液,使其终浓度为100 mg/L,然后在相同的条件下转化96 h。此时,底物的转化率和11α-羟基洋地黄毒苷元的生成率分别达到了100%和25.4%,比优化前分别提高了33.1%和14.5%。通过斯氏灌流法和Langendorff灌流法,探讨两个转化产物对蟾蜍和大鼠心肌细胞收缩能力的影响。结果表明,洋地黄毒苷元对心肌细胞收缩率的影响和底物洋地黄毒苷相当,而11α-羟基洋地黄毒苷元对心肌细胞收缩率的影响比底物洋地黄毒苷和洋地黄毒苷元均有所增强。

七叶洋地黄双苷治疗LASIK术后视疲劳的临床疗效观察

目的:评价七叶洋地黄双苷滴眼液治疗近视患者准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)后视疲劳的临床疗效。方法:对200例400眼近视患者行LASIK手术,随机分成两组。100例为试验组应用七叶洋地黄双苷滴眼液,另100例为对照组应用潇莱威滴眼液。分别于手术前、用药后1,2,4wk评估患者术后视疲劳的症状和体征,同时观察药物不良反应。结果:随着术后时间的延长,试验组和对照组近视患者视疲劳症状逐渐缓解,在术后1,2wk时,试验组的视疲劳评分低于对照组,两组差异有统计学意义(t=3.160,P=0.001;t=2.727,P=0.0025);术后4wk时,两组的差异无统计学意义(t=1.423,P=0.10)。结论:随着观察时间的延长,LASIK术后患者视疲劳症状可逐渐得到恢复和改善,七叶洋地黄双苷滴眼液对改善LASIK术后早期视疲劳症状有效。