东北地区洋桔梗穗条冬季扦插生根试验初探

[目的]探究洋桔梗在东北地区穗条冬季扦插繁殖的可行性。[方法]以秋季成熟洋桔梗嫩枝作插条,于东北不加温温室内进行不同扦插部位(上部、中部、基部)的扦插育苗试验。[结果]在不加温温室内洋桔梗插穗能生根成活并越冬,上部插穗成活率和生根率均最高,分别达到89.91%和79.26%。[结论]该方法可在来年春季早期生产中推广使用。

洋桔梗组培苗玻璃化原因及恢复的研究

为了找出能够克服或降低洋桔梗组培苗玻璃化的最适培养条件,以YELLOW和PINK2个洋桔梗品种为试材,研究MS培养基中添加的激素、蔗糖、活性炭及温度对洋桔梗组培苗玻璃化的产生和恢复的影响。结果表明:品种、6-BA、NAA对洋桔梗玻璃化芽的产生均有影响,玻璃化率随6-BA及NAA浓度的增大而升高;适宜浓度的蔗糖对洋桔梗玻璃化芽的恢复有促进作用,但添加0.5 g.L-1的活性炭及15℃的低温培养没有明显地促进作用。

不同浓度KT预处理液对干藏洋桔梗切花保鲜的影响

为分析KT预处理液对洋桔梗(Eustoma russellianum)切花的保鲜效果,采用不同浓度的KT预处理液处理洋桔梗,干藏后检测鲜切花的瓶插寿命、可溶性糖、花青素、SOD、MDA等生理生化指标。结果表明,干藏洋桔梗切花使用KT预处理液处理后SOD活性增强,MDA含量降低,可溶性糖含量升高,可延缓花青素降解和延长切花瓶插寿命,且提高了洋桔梗切花的观赏品质。其中,2%蔗糖+40 mg/L KT+80 mg/L柠檬酸+200 mg/L 8-HQ配方对洋桔梗切花的保鲜效果最佳。

萘乙酸对洋桔梗种子发芽的影响

[目的]研究萘乙酸(NAA)对洋桔梗种子萌发的影响。[方法]比较不同浓度的NAA对洋桔梗种子的发芽势、发芽率、发芽指数等指标的影响。[结果]在0.001～1.000 mg/L浓度范围内,不同浓度的NAA处理能明显提高洋桔梗种子的发芽势、发芽率、发芽指数,以0.100 mg/L浓度处理的效果最好,与对照相比,达到了0.01水平的极显著差异。NAA浓度0.010～0.100mg/L浸种能显著提高胚轴的伸长;NAA浓度1.000～10.000 mg/L浸种抑制胚根的伸长,当浓度达10.000 mg/L时,对洋桔梗种子的萌发有明显的抑制作用。[结论]低浓度的NAA能提高洋桔梗种子的发芽势、发芽率、发芽指数;高浓度NAA处理则抑制其种子的萌发。

含无机盐的保鲜剂对洋桔梗切花的保鲜效应

研究了不同保鲜剂对洋桔梗切花的保鲜效果以及生理作用的影响.结果表明:各保鲜剂均能在一定程度上增加洋桔梗切花花枝鲜重,改善花枝的水分状况,提高切花的观赏品质,增大花径,延长切花的瓶插寿命,提高体内的SOD活性,并可明显延缓花瓣中可溶性蛋白质含量的下降.其中,以保鲜液2%蔗糖+100mg/L山梨酸+250mg/L Al2(SO4)3的保鲜效果最佳.

洋桔梗叶片培养不定芽发生和微繁研究

以洋桔梗叶片为材料,建立了洋桔梗叶片高效不定芽发生、植株再生体系。研究了不同激素及其组合对外植体不定芽发生、壮苗和生根的效应。结果显示,MS+BA 1mg/L是叶片不定芽发生的适宜培养基;MS+BA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L是试管嫩梢形成壮苗的适宜培养基;MS+IAA 0.1mg/L培养基是壮苗生根的适宜培养基。草炭珍珠岩基质是生根苗移栽的适宜基质。

洋桔梗离体快繁技术研究

[目的]建立洋桔梗高效的快速繁殖体系,为工厂化生产提供可行的操作程序。[方法]以国外进口的洋桔梗F1代种子(品种名称为Polestar yellow)无菌苗的叶片为外植体,对不定芽的诱导、单芽增殖、无菌苗生根等进行了研究。[结果]结果表明:6-BA和IBA组合对洋桔梗叶片不定芽的诱导效果较6-BA和NAA组合好,叶片最佳的分化培养基为MS+6-BA0.6 mg/L+IBA0.04 mg/L,1个月内正常芽平均分化数为8.3;最佳的单芽增殖培养基为MS+6-BA0.8 mg/L+NAA0.04 mg/L,1个月内正常芽的增殖倍数为7.4;无菌苗在含有IBA0.25 mg/L的1/2 MS培养基上,生根率、平均每苗的根数均最大。[结论]该结果为洋桔梗的工厂化生产奠定了基础。

洋桔梗种子育苗基质与施肥配方的筛选

在洋桔梗育苗试验中,采用4种泥炭与珍珠岩、生石灰进行不同搭配制作了9种基质,筛选了5种不同氮、磷、钾、钙、镁、比例的肥料配方。通过测量F1杂交种子苗成苗率、冠幅、根长、冠重、根重等指标,发现通过添加生石灰调整基质pH至6.3~6.8,可显著提高成苗率、冠重和根重。在此基础上,筛选出2种国产泥炭Y-6和Y-3以1∶1混合使用,1种进口泥炭K-876单独使用并添加生石灰育苗效果最佳。5种施肥配方中N、P、K、Ca、Mg比例为10∶5∶10∶8∶3时的育苗效果最佳。

洋桔梗高频再生系统的建立及其卡那霉素敏感性测定

以Double Mariachi Pink洋桔梗叶片为外植体,研究了切割方式、培养基中6-BA与NAA配比对其不定芽分化的影响以及叶片不定芽分化对卡那霉素(Km)的敏感性。结果表明:五刀切与三刀切对不定芽分化数量的影响无显著性差异;MS+1.0 mg/L6-BA为叶片不定芽分化的最适培养基,不定芽分化率达100%,在1.0 cm×1.0 cm叶块上的不定芽分化数平均达25.4;25 mg/L Km为抑制叶片不定芽分化的最低浓度。

农杆菌介导的洋桔梗遗传转化体系的建立

以洋桔梗叶片为外植体,建立了植株再生体系,并在此基础上,用根癌农杆菌介导法,研究了影响洋桔梗转化的若干因素。结果表明,诱导最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.15mg/L,不定芽诱导率达74.5%;不定芽生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,生根率达90%。不定芽分化阶段和生根阶段的Km筛选浓度分别为45mg/L和15mg/L;根癌农杆菌菌液浓度OD600值为0.6,侵染时间10min,共培养时间3d,有利于抗性芽的产生。Km筛选得到的抗性植株经过PCR和Southern检测表明,八氢番茄红素合成酶基因(PSY)已经整合到洋桔梗基因组中。

洋桔梗花药离体培养与完整植株的诱导

以9个不同类型的洋桔梗品种为试材,研究了花药离体培养中胚状体的诱导及再生。结果表明：基因型是限制花药培养成胚的关键因素,9个品种中,有4个品种获得了胚状体及再生苗,再生率为3.8%～16.0%。用根尖染色体鉴定法鉴定了再生株的倍性,再生株群体的倍性组成比较复杂,以二倍体为主。

国内洋桔梗组培快繁技术的研究进展

通过查阅现有洋桔梗组织培养资料,对洋桔梗组培快繁技术体系的研究进展进行了综述,主要介绍了洋桔梗组织培养中的外植体的选择、初代培养、增殖培养、生根培养及练苗移栽等程序的研究进展。

激素对洋桔梗植株再生的影响及生根培养的研究

以MS为基本培养基 ,附加不同浓度的 6 BA、KT、NAA和IBA诱导洋桔梗叶片外植体的再生植株。结果表明 :MS +6 BA 0 .5～ 1 .0mg/L(单位下同 ) +NAA 0 .2和MS +6 BA 0 .5～ 1 .0 +IBA 0 .2培养基都能诱导外植体产生愈伤组织 ,但 6 BA的浓度必须小于 1 .0mg/L ,否则会导致组织的严重玻璃化 ;MS +KT 1 .0～2 .0 +NAA 0 .2或MS +KT 1 .0～ 2 .0 +IBA 0 .2培养基也能诱导外植体产生愈伤组织 ,愈伤组织出现的时间较早且质地较好 ,适合分化。继代培养时 ,MS培养基中仅加 6 BA 0 .5mg/L或KT 0 .5mg/L ,即能获得较高的分化率。生根培养研究中 ,培养液为 1 /2MS+5 0g/L糖 +IBA 2mg/L的前处理 ,生根效果较好 ,生根率接近基质生根培养的生根率。

洋桔梗小孢子培养初步研究

[目的]探索预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响。[方法]以洋桔梗为材料进行小孢子培养,研究预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,并筛选胚性愈伤组织适宜诱导培养基、不定芽植株培养基以及最佳生根培养基。[结果]利用4℃低温预处理24 h有利于小孢子愈伤组织的形成。愈伤组织适宜诱导培养基为:MS+3 mg/L KT+2.5 mg/L 2,4-D;不定芽植株培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;最佳生根培养基为:MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L IBA+0.3 g/L活性炭。经过染色体倍性鉴定,显示小孢子培养后染色体数目减半。[结论]该方法研究了预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,为洋桔梗游离小孢子培养体系的建立以及单倍体育种奠定基础。

两种植物生长调节剂对洋桔梗离体培养的效应

研究了6-BA和NAA诱导洋桔梗外植体再生植株的效应.结果表明,培养基MS＋ 6-BA 0.1mg/L＋ NAA 0.05mg/L适于诱导洋桔梗外植体产生愈伤组织,MS＋ 6-BA 0.2 mg/L＋ NAA 0.1 mg/L适合愈伤组织的继代培养;随6-BA浓度的增加,不定芽的增殖率和玻璃化率提高,适于不定芽分化和增殖的培养基为MS＋ 6-BA 0.5mg/L＋ NAA0.1 mg/L,生根适宜的培养基为1/2 MS＋NAA 0.1～0.3 mg/L.因此,不同浓度的6-BA和NAA组合对洋桔梗茎、叶、芽等外植体愈伤组织和不定芽的诱导与增殖效果不同.试验结果为洋桔梗健康种苗生产奠定了基础.

洋桔梗ISSR最佳反应体系的建立与品种遗传多样性检测

利用正交设计,对影响洋桔梗ISSR反应的主要因素进行了优化,建立了洋桔梗ISSR的最佳反应体系。在25μL的PCR反应体系中,含2.5μL 10×PCR buffer、1.5 mmol/L Mg2+、0.3 mmol/L dNTPs、0.2μmol/L引物、30 ng/μL洋桔梗基因组DNA模板及2.0 U的TaqDNA聚合酶。试验结果表明,该反应体系具有良好的稳定性和通用性。8个不同基因型洋桔梗材料遗传多样性检测结果表明,该ISSR分子标记可有效地检测出其中4个不同品种之间、同一品种F1代及F2代之间的遗传多样性,但未能检测出同1个品种F1代2个株系之间或2个转基因株系之间的遗传多样性。

糖和无机盐预处液对洋桔梗切花的保鲜效应

试验研究4种无机盐预处液处理对洋桔梗切花的保鲜效应。结果表明,各预处液处理均能不同程度地延长洋桔梗切花瓶插寿命,增加花枝鲜重和花径,促进开花,维持水分平衡和花瓣可溶性糖含量,延缓MDA的产生,维持花瓣膜结构的相对稳定性;其中以2%S(蔗糖)+200 mg.L-1A l2(SO4)3+50 mg.L-1NaC lO的预处液处理效果最佳。

植物激素在洋桔梗组培快繁中的应用研究

研究了植物激素对洋桔梗试管苗生长、增殖的影响。结果表明:赤霉素(GA3)对试管苗茎的伸长生长有明显的促进作用,且以浓度0.8mg/L效果最好;MS+0.1mg/LNAA+0.2mg/LIAA+0.8mg/LGA3的激素组合对促进试管苗高生长的效果最佳;6蛳BA对试管苗茎的伸长有抑制作用,而对新芽增殖有促进作用;对试管苗增殖促进作用最突出且可保证试管苗株高的培养基配方为MS+0.5mg/LBA+0.1mg/LNAA+0.2mg/LIAA+0.8mg/LGA3。

洋桔梗Double Mariachi Pink高效遗传转化体系的建立

以洋桔梗品种Double Mariachi Pink为供试材料,探讨影响根癌农杆菌介导法遗传转化的一些因素,包括Cb(羧苄青霉素)脱菌浓度、Km(卡那霉素)筛选浓度、农杆菌的侵染浓度和预培养时间等。研究结果表明:脱菌培养基中Cb的浓度为200 mg/L时,抑制农杆菌生长但不显著影响叶片不定芽分化;不定芽分化阶段和生根阶段的适宜Km筛选浓度分别为30 mg/L和15 mg/L;外植体预培养3 d,在D600 nm≈0.5的农杆菌菌液中侵染10 min后,Km筛选得到的抗性植株GUS染色蓝斑率最高,达到86.7%。