海洋链霉菌7-145中洋橄榄叶素衍生物的分离鉴定

目的分离鉴定海洋链霉菌Streptomyces sp．7-145产生的抗耐药菌活性成分。方法通过活性追踪，利用大孔吸附树脂、凝胶、正反相色谱等多种色谱技术分离纯化活性成分；通过紫外光谱、质谱、核磁共振谱等波谱学方法鉴定其结构。利用琼脂稀释法和微量肉汤稀释法分别测定所得化合物的抗耐药菌和抗结核活性，利用MTT法评价其细胞毒性。结果从中分离鉴定了4个活性化合物，其结构分别确定为洋橄榄叶素（1）、11-O-甲基洋橄榄叶素（2）、11，11’-O-二甲基洋橄榄叶素（3）、14’-去乙基-14＇-甲基洋橄榄叶素（4）。化合物1～4对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）和万古霉素耐药的肠球菌（VRE）等革兰阳性耐药菌具有较强的抗菌活性，最低抑菌浓度（MIC）为1～16μg／mL；所有化合物对结核分枝杆菌H37Rv株显示出显著的抑制活性（MIC：0．5～4μg／mL），其中化合物1对结核分枝杆菌多重耐药（MDR）、广泛耐药（XDR）等耐药株也表现出较强的抑制活性（MIC：0．5～1μg／mL）；1和2对人肝细胞（L02）、肾上皮细胞（293T）和乳腺癌细胞（MCF-7）具有较强的细胞毒活性，IC50值200．14～0．28μmol／L。结论化合物1～4具有较强的体外抗MRSA、VRE等耐药菌活性。首次发现洋橄榄叶素（1）具有体外抗结核分枝杆菌标准株、多重耐药以及广泛耐药株活性。化合物1和2对人正常肝、肾上皮细胞具有细胞毒性。

吸水链霉菌LP-93菌丝体中洋橄榄叶素衍生物的分离与结构鉴定

目的分离纯化吸水链霉菌LP-93菌丝体中的抗菌活性成分。方法利用硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法对菌株LP-93菌丝体中的化学成分进行分离纯化,根据核磁共振、质谱、紫外光谱等波谱学方法鉴定化合物结构。采用微量二倍稀释法评价化合物的抗菌活性。结果从LP-93菌丝体中分离鉴定了1个洋橄榄叶素衍生物,其结构为11,11’-O-二甲基-14’-去乙基-14’-甲基-洋橄榄叶素。该化合物对结核分枝杆菌具有抑制活性,MIC值为0.48μg/ml。结论11,11’-O-二甲基-14’-去乙基-14’-甲基-洋橄榄叶素为吸水链霉菌LP-93抗菌活性成分之一。

盐霉素生产过程中降低洋橄榄叶素伴生量的工艺探讨

盐霉素生产过程中降低洋橄榄叶素伴生量的工艺探讨侯建伟欧阳安喜山东鲁抗医药集团公司山东济宁２７２１２１收稿日期：１９９７－０５－２６盐霉素（Ｓａｌｉｎｏｍｙｃｉｎ）是由白色链霉菌（Ｓｔｒｅｐｏｍｙｃｅｓａｌｂｕｓ）经发酵培养产生的聚醚类动物专用抗生素，...

高效液相色谱-电喷雾多级质谱法对格尔德霉素粗品中各组分的初步判别及分类

目的对格尔德霉素(GDM)粗品中各组分进行与质量数相关的结构信息方面的初步判别及分类。方法应用高效液相色谱-电喷雾多级质谱法(LC-ESI-MSn)在正离子模式下对粗品进行分析。结果通过与对照品的液质比对,确定GDM粗品中MW=560.3(25.0min)、MW=1024.7(36.8min)分别为GDM、洋橄榄素,并首次研究了洋橄榄素的正离子模式质谱裂解规律。通过对GDM粗品中各组分多级质谱碎片信息的分析整理,结合已知物的裂解规律,归纳发现GDM粗品中主要含有三大类物质:以GDM为主成分的含有氨甲酰基的苯安莎类物质(10~35min)、洋橄榄素及其同系物(35~50min)、一组分子量相差74u的未知物(50~65min)。结论 LC-ESI-MSn能快速地对GDM粗品中各组分进行初步的结构分析,通过本实验建立了一套利用LC-ESI-MSn对复杂样品中化合物的快速结构归属的方法,为微生物新药的快速结构筛选研究提供一定参考作用。

快速鉴定格尔德霉素产生菌——吸水链霉菌17997中的洋橄榄叶素

对格尔德霉素产生菌吸水链霉菌17997的发酵液乙酸乙酯提取物进行了硅胶板TLC初步分离和NaOH溶液喷涂显色,对显红色、具有抗革兰阳性菌活性的条带进行了HPLC分析,提示抗革兰阳性菌活性化合物可能为大环二内酯类抗生素洋橄榄叶素;以dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶(Tgd)基因保守区设计PCR引物,扩增了吸水链霉菌17997基因组DNA中的tgd并进行了序列分析,表明吸水链霉菌17997含有洋橄榄叶素生物合成基因簇中的tgd基因;对NaOH溶液喷涂显红色的化合物进行LC-(+)-ESI-MS分析,证实其为洋橄榄叶素。因此,吸水链霉菌17997产生洋橄榄叶素;同时,建立了一种快速鉴定洋橄榄叶素及其产生菌的方法,主要包括TLC硅胶板分离、NaOH溶液显色、HPLC和LC-MS分析,以及tgd的PCR检测与序列分析。

洋橄榄叶素HY1对LPS诱导小鼠神经炎症的作用及机制探讨

目的研究洋橄榄叶素HY1对脂多糖(LPS)诱导小鼠神经炎症的作用及机制。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、LPS模型组、LPS模型组+HY1 3 mg·kg^(-1)组、LPS模型组+HY1 10 mg·kg^(-1)组。HY1连续给药7 d, LPS模型组及HY1给药组腹腔注射LPS 5 mg·kg^(-1),LPS注射6 h后取脑皮层组织进行检测。ELISA检测小鼠脑皮层组织中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的含量。Western blot检测炎症通路相关蛋白环氧合酶2(COX2)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、髓样分化因子88(MyD88)的表达水平。结果与正常对照组比较,LPS模型组脑皮层组织中炎症因子及炎症通路相关蛋白IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1,ICAM-1,COX2,HMGB1,MyD88的水平显著增高(所有P<0.01),HY1 3 mg·kg^(-1)及10 mg·kg^(-1)给药组可降低脑皮层组织的促炎细胞因子、趋化因子和黏附分子的释放,并下调炎症通路相关蛋白COX2、HMGB1、MyD88蛋白的表达。结论 HY1可改善LPS诱导的小鼠神经炎症,机制可能与下调炎症蛋白COX2,HMGB1和MyD88相关。

刺五加内生放线菌Streptomyces sp. CWJ-256次生代谢产物研究

目的研究刺五加植物内生放线菌CWJ-256次级代谢产物及其生物活性。方法采用16S rRNA基因同源进化分析对菌株CWJ-256进行初步分类鉴定,采用抗菌活性追踪方式,对CWJ-256发酵液通过硅胶柱层析、凝胶柱层析、薄层色谱显色以及高效液相色谱等方法对目标化合物分离纯化,利用核磁共振波谱法和质谱法鉴定化合物的结构。采用MTT法测试其抗肿瘤细胞增殖活性。基于Gluc报告系统对化合物3的体外抗流感病毒药效学进行初步评价。结果菌种鉴定显示Streptomycessp.CWJ-256为生黑孢链霉菌Streptomyces melanosporofaciens;从该菌株的发酵代谢产物中分离得到3个活性化合物,经结构鉴定为efomycin G(化合物1)、11,11'-O,O-dimethylelaiophylin(化合物2)、elaiophylin(化合物3);抗肿瘤细胞增殖活性评价显示,化合物1和3对体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-231具有增殖抑制作用(IC50分别为4.385和2.118μmol/L)。体外抗流感病毒药效学评价显示,化合物3对流感病毒A/WSN/33(H1N1)具有一定抑制效果。结论刺五加内生放线菌Streptomycessp.CWJ-256可产生多个洋橄榄叶素类次生代谢产物,显示出抗细胞增殖、抗病毒等多种活性。