内质网应激在T细胞活化诱导凋亡中的作用

目的:探讨内质网应激在T细胞活化诱导细胞凋亡(activation-induced cell death,AICD)中的作用。方法:建立小鼠T淋巴瘤EL-4细胞和成年C57BL/6小鼠T细胞AICD的模型,流式细胞术测定发生AICD的细胞凋亡率;流式细胞术测定不同浓度CD3抗体对EL-4细胞AICD发生的影响;将小鼠AICD模型T细胞分为对照组、模型组、激动组(加入内质网应激激动剂二硫苏糖醇)、抑制组(加入内质网应激抑制剂4-苯基丁酸),流式细胞术测定各组细胞凋亡率。结果:EL-4细胞和C57BL/6小鼠T细胞发生AICD时,细胞凋亡率升高;随着CD3抗体浓度增加,EL-4细胞发生AICD的比例增加;激动组小鼠T细胞发生AICD的比例增加,抑制组小鼠T细胞发生AICD的比例降低;抑制剂组细胞凋亡水平较对照组降低。结论:增强内质网应激可促进T细胞发生AICD,抑制内质网应激可减少T细胞发生AICD。

长期铅暴露对小鼠胸腺细胞活化后诱导细胞凋亡的影响

为探讨铅暴露对小鼠胸腺T细胞活化后诱导细胞凋亡的影响,将24只健康初断乳21日龄清洁级雄性KM小鼠随机分为4组:对照(蒸馏水)组和低(200 mg·L-1)、中(400 mg·L-1)、高(800 mg·L-1)剂量乙酸铅染毒组,每组6只.采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒12周.染毒结束后,分离胸腺细胞,采用脂质体介导法将NFκB、AP-1、NFAT的荧光素酶报告基因转染到胸腺T细胞,刺激48 h后,检测荧光素酶活性.刺激胸腺细胞后,采用流式细胞仪检测凋亡相关膜分子Fas、FasL活性及细胞凋亡率.结果表明,与健康对照组小鼠相比,中、高剂量铅暴露组小鼠胸腺T细胞膜表面Fas及FasL表达明显增强(p<0.05),细胞凋亡率明显增加(p<0.05);相对于刺激前,anti-CD3刺激后各组小鼠胸腺T细胞的NFκB、AP-1、NFAT转录活性明显增加(p<0.05),Fas/FasL的表达明显增强(p<0.05),细胞凋亡率明显增加(p<0.05),但相对于刺激后健康对照组,各剂量铅暴露组小鼠胸腺T细胞3种核因子转录活性明显下降(p<0.05),Fas及FasL表达明显减弱(p<0.05),细胞凋亡率明显降低(p<0.05),且随着染铅剂量增加,均呈现下降趋势.

组蛋白去乙酰化酶3通过抑制AICD维持T细胞自稳（英文）

为探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在T细胞自稳中的作用,采用Lox P-cd4cre酶系统在胸腺CD4^+CD8^+双阳性T细胞(DP)中敲除hdac3基因.hdac3基因敲除小鼠不影响T细胞在胸腺中的发育,但导致外周T细胞显著降低,而且,hdac3基因敲除的外周T细胞主要以活化/效应/记忆表型为主.机制分析表明,hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡增加并伴随细胞增殖加速,同时,Fas和Fas配体阳性细胞比率以及Fas配体的表达显著增加.体外TCR活化不影响正常外周T细胞的凋亡,但导致hdac3基因敲除的外周T细胞凋亡显著增加.实验结果表明,HDAC3通过抑制活化诱导的细胞凋亡维持外周T细胞自稳.