脾氨肽联合匹多莫德辅助治疗儿童哮喘的疗效及其对干扰素调控因子1和信号转导转录活化因子-1表达的影响

目的:探讨脾氨肽联合匹多莫德辅助治疗儿童哮喘的效果与机制。方法:选取2020年3月至2021年3月我院儿科诊治的支气管哮喘急性发作期患儿178例,按随机数表法分为观察组和对照组各89例。两组患儿均采用常规治疗与管理,观察组在常规治疗基础上加用脾氨肽和匹多莫德,比较两组患儿疗效,检测治疗前后T淋巴细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平,记录临床症状(咳喘、呼吸困难、哮鸣音)消失时间,采用2^(-ΔΔCt)相对定量法分析治疗前后外周血干扰素调控因子1(IRF1)和信号转导转录活化因子-1(STAT1)的相对表达量。结果:观察组总有效率为92.13%,高于对照组的75.28%(P<0.01);观察组咳喘消失时间、呼吸困难消失时间、哮鸣音消失时间均短于对照组(P均<0.01)。两组患儿治疗后CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均高于治疗前,CD8^(+)、IRF1、STAT1水平均低于治疗前,且观察组治疗后CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均高于对照组,CD8^(+)、IRF1、STAT1水平均低于对照组(P均<0.05)。结论:在常规治疗与管理基础上加用脾氨肽和匹多莫德,可改善哮喘患儿的免疫功能,缩短症状消失时间,抑制IRF1、STAT1的表达,从而有效提高治疗效果。

健脾解毒方介导p38MAPK/ATF-2信号通路抑制幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞COX-2表达

目的探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染人胃癌MKN45细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达及其p38MAPK信号通路的调控机制。方法采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)和Westernblot检测Hp标准株NCTC11637感染对人胃癌MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达的影响及健脾解毒方药物血清的调控作用;运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路,观察Hp对MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达的影响;观察健脾解毒方对Hp感染激活的p38MAPK信号通路及其下游活化转录调控因子2(activating transcription factor2,ATF-2)表达的影响。结果 Hp感染人胃癌MKN45细胞后,COX-2 mRNA和蛋白表达均明显高于空白对照组(P<0·01)。阻断p38MAPK信号通路后,Hp诱导的MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0·01);健脾解毒方药物血清以剂量依赖的方式下调Hp诱导的MKN45细胞COX-2 mRNA和蛋白表达,并能够抑制Hp诱导的p38MAPK信号通路的活化,且对p38MAPK下游转录因子ATF-2的活性有明显的抑制作用。结论 Hp感染通过p38MAPK信号通路诱导胃癌细胞COX-2表达。健脾解毒方通过调控p38MAPK/ATF-2信号转导通路,抑制Hp诱导的COX-2表达,可能是其防治Hp诱发胃癌的机制之一。

ATF7在结直肠癌临床预后评价中的价值

目的探讨活化转录调控因子(ATF)/CREB家族一员ATF7在结直肠癌预后中的价值。方法收集72例随访完整且有病理切片的患者,用免疫组化的方法检测其ATF7的表达情况。分析ATF7的表达与患者临床病理学因素的相关性及其对总生存(OS)和无进展生存(PFS)的影响。结果 72例结直肠癌患者中,有43例(59.7%)表达ATF7,有29例(40.3%)未表达ATF7,其表达和临床病理分期有关(P=0.041);表达ATF7的患者对比未表达的患者五年生存率分别为74.4%、41.4%(P<0.002),两者的5年无进展生存率分别为69.8%和37.9%(P<0.002)。单因素分析显示影响PFS和OS的因素包括:ATF7的表达,淋巴结受侵情况(有无淋巴结受侵、受侵数目),病理学分期和癌周淋巴结,多因素分析显示:ATF7的表达和淋巴结受侵数目影响患者OS(P=0.010、P=0.001),ATF7的表达和有无淋巴结受侵影响患者PFS(P=0.007、P<0.001)。结论结直肠癌组织中ATF7与临床病理学分期呈负相关,与OS和PFS呈正相关,ATF7和淋巴结受侵情况共同影响患者的生存率。

多不饱和脂肪酸调控基因表达的分子机制的研究进展

多不饱和脂肪酸(PUFA),尤其是n-3系的PUFA,可以降低脂肪酸以甘油三酯形式的沉积,同时促进脂肪酸氧化和葡萄糖合成糖原。其具体机制是PUFA通过激活过氧化物酶体活化增生因子受体α(PPARα)来控制氧化途径过程中的基因表达,而其对脂肪合成途径中有关基因的抑制则是通过降低能传递胰岛素和碳水化合物信息的转录因子与DNA的亲和力和转录因子的核内丰度。尤其是PUFA抑制了类固醇调控单元结合蛋白-1(SREBP-1)的核内丰度和表达,降低了核因子Y(NF-Y)、Sp1和肝核因子-4(HNF-4)与DNA的亲和力。

丝裂原活化蛋白激酶在肿瘤坏死因子α诱导滋养层细胞MMP-9基因表达中的作用

目的探讨早孕滋养层细胞有节制地侵入机制,研究肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导滋养层细胞基质金属蛋白酶9(MMP9)基因表达的调控机制。方法2004年南方医科大学南方医院将10-4g/LTNFα分别处理滋养层细胞0、5、10、20、30min后,应用细胞ELISA法测定滋养层细胞中蛋白激酶的活性变化;预先给予丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的特异性抑制剂处理滋养层细胞30min,然后给予10-4g/LTNFα处理滋养层细胞24h,应用反转录聚合酶链反应(RTPCR)检测滋养层细胞MMP9基因表达的变化。结果发现10-4g/LTNFα均能迅速激活滋养层细胞的细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、cjun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK激酶活性。TNFα刺激滋养层细胞引起MMP9mRNA表达显著增加,其能被ERK或p38MAPK的特异性抑制剂所抑制。结论ERK和p38MAPK可能是TNFα诱导滋养层细胞MMP9基因表达增加的重要调节物质。

基于IFN-γ/STAT1/Smad7通路探讨疏肝健脾活血方抗肝纤维化作用机制

目的:探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法:36只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组12只;除正常组外,其余组小鼠利用20%四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化,中药组按33.3 kg/mL疏肝健脾活血方药灌胃干预,连续4周。采用HE染色、Masson染色、天狼猩红染色观察各组小鼠肝组织病理变化;免疫组化检测肝组织平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA)分布情况;检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平变化;采用Western Blot法检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α-SMA、信号转导与转录活化因子1(STAT1)、磷酸化信号转导与转录活化因子1(p-STAT1)、Smad7蛋白表达水平;采用RT-PCR法检测各组小鼠肝组织中CollagenⅠ、α-SMA、Smad7、γ-干扰素(IFN-γ)mRNA水平变化。结果:与模型组比较,中药组肝组织中炎症细胞浸润减少,肝细胞点状坏死减少,肝细胞排列相对整齐,汇管区及中央静脉区纤维增生减少,部分纤维间隔消失,胶原沉积明显减少;血清中ALT与AST水平显著下降(P<0.01,P<0.05);肝组织中CollagenⅠ与α-SMA蛋白水平显著下降(P<0.05),Smad7与p-STAT1/STAT1蛋白水平显著上升(P<0.05);肝组织中CollagenⅠ与α-SMA mRNA水平显著下降(P<0.01),Smad7与IFN-γmRNA水平显著上升(P<0.01)。结论:疏肝健脾活血方能够减少肝脏炎症的发生与胶原纤维增生,抑制肝星状细胞的活化,从而起到防治肝纤维化的作用,其作用机制可能与促进IFN-γ/STAT1/Smad7信号通路有关。

不同强度及时程电针干预对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏PERK/ATF4/CHOP通路的影响

目的:基于肝脏蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-活化转录因子4(ATF4)-转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路,分析不同强度、不同时程电针“丰隆”“足三里”对非酒精性脂肪肝病大鼠的影响,探讨其作用机制。方法:将SD大鼠随机分为普通饮食组、高脂模型组、假电针组、强刺激电针组、弱刺激电针组,每组15只,每组再分为2、3、4周3个亚组。采用高脂饲料喂养建立非酒精性脂肪肝病大鼠模型。造模成功后电针双侧“丰隆”“足三里”,疏密波(4 Hz/20 Hz),电流强度分别为4 mA、2 mA,持续20 min,1次/d,每周治疗5 d,休息2 d;假电针组只连接电针仪,不通电。不同时程亚组分别干预2、3、4周。干预结束后采用全自动生化分析仪检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,油红O染色观察肝组织形态学变化,实时荧光定量PCR、Western blot法检测大鼠肝脏组织PERK、ATF4、CHOP mRNA与蛋白的表达。结果:高脂模型组大鼠肝细胞红色脂滴聚积明显,强刺激电针组4周时大鼠肝细胞红色脂滴明显减少。与同时程普通饮食组比较,高脂模型组大鼠血清ALT、AST含量与肝脏组织PERK、ATF4、CHOP mRNA与蛋白表达均升高(P<0.01)。与同时程高脂模型组比较,强、弱刺激电针组血清ALT、AST含量及肝脏组织PERK、ATF4、CHOP mRNA与蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。与同时程假电针组比较,强、弱刺激电针组大鼠血清ALT、AST含量与肝脏组织PERK、ATF4、CHOP mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05),强刺激电针组大鼠肝脏组织PERK、ATF4、CHOP蛋白表达降低(P<0.01),弱刺激电针组大鼠2、3、4周时肝脏组织PERK、CHOP蛋白表达降低(P<0.01),2周时ATF4蛋白表达降低(P<0.05)。与同时程强刺激电针组比较,弱刺激电针组大鼠血清ALT、AST含量及肝脏组织PERK、ATF4、CHOP mRNA与蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。与本组2周时比较,强、弱刺激电针组大鼠3、4周时血清ALT、AST含量及肝脏组织PERK、ATF4、CHOP mRNA与PERK蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),强刺激电针组3、4周时肝脏组织ATF4蛋白表达降低(P<0.01),强刺激电针组4周时、弱刺激电针组3周和4周时肝脏组织CHOP蛋白表达降低(P<0.01)。与本组3周时比较,强、弱刺激电针组大鼠4周时血清ALT、AST含量,PERK、ATF4、CHOP mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),强、弱刺激电针组4周时肝脏组织PERK、CHOP蛋白表达降低(P<0.01),强刺激电针组4周时肝脏组织ATF4蛋白表达降低(P<0.05)。结论:电针“丰隆”“足三里”可显著改善非酒精性脂肪肝病大鼠肝功能,其作用机制可能是通过抑制PERK表达进而靶向调控下游ATF4/CHOP信号通路,抑制内质网应激,从而发挥肝脏保护效应;电针强度4 mA治疗4周时效果最佳。