H460小型细胞团在天然活性Ⅰ型胶原中三维立体培养模型的构建

目的:建立H460小型细胞团在天然活性Ⅰ型胶原中的三维立体培养技术。方法:实验于2006-07/11在解放军兰州军区兰州总医院呼吸内科实验室(博士后工作站)完成。①实验材料:H460细胞系由解放军总医院惠赠;Wistar大鼠,体质量150～200g,实验中的胶原仅从大鼠的尾部肌腱提取,该大鼠来源为其他科室实验过程中未做任何处理的大鼠。②实验方法:将H460小型细胞团悬液、鼠尾提取的天然胶原(4g/L)与4倍体积的DMEM共同混合为细胞浓度2×108L-1、胶原浓度为1g/L、1倍体积DMEM浓度。③实验评估:倒置显微镜观察细胞团在天然胶原中的生长状态,并与平面培养细胞相比较。结果:平面培养的细胞,其细胞团生长呈分散平铺的方式,单个细胞为不规则多边行,细胞之间有明显的间隙存在,而立体培养的细胞呈团块状,周围可见放射状毛刺突起,无法观察单个细胞。结论:H460小型细胞团在天然胶原中的三维立体培养为体外研究细胞生长及肿瘤细胞生长方式提供了一个更为类似体内环境的模型。