陕西小麦品种(系)脂肪氧化酶活性基因的遗传多态性分析

为给小麦品质改良提供理论依据,利用1A染色体上QLpx.caas1-AL位点的标记Xwmc312及基于4B染色体上TaLOX-B1位点开发的显性互补功能标记LOX16和LOX18,对173份陕西小麦品种(系)进行检测,分析LOX活性基因的遗传多态性。在QLpx.caas1-AL位点,所检测的陕西小麦品种(系)存在Xwmc312-227、Xwmc312-235和Xwmc312-247三种等位变异类型。其中,Xwmc312-227类型有54个,占31.21%;Xwmc312-235类型有31个,占17.92%;Xwmc312-247类型有88个,占50.87%。在TaLOX-B1位点,所检测的品种(系)存在TaLOX-B1a和TaLOX-B1b两种等位变异。其中,TaLOX-B1a类型有39个,占22.54%;TaLOX-B1b类型有134个,占77.46%。两个位点在陕西小麦中存在6种等位变异的组合类型,其总体分布比例不同,以Xwmc312-247/TaLOX-B1b组合类型品种(系)的分布比例最高(41.0%),其次为Xwmc312-227/TaLOX-B1b(19.6%)、Xwmc312-235/TaLOX-B1b(16.8%)、Xwmc312-227/TaLOX-B1a(11.6%)和Xwmc312-247/TaLOX-B1a(9.8%),而以Xwmc312-235/TaLOX-B1a组合类型品种(系)的分布比例最低(1.2%)。6种等位变异组合类型的分布比例在陕西不同麦区也存在差异。在陕西小麦中,低LOX活性等位变异品种(系)的比例明显高于高LOX活性等位变异品种。

多酚氧化酶活性基因等位变异在陕西小麦品种中的分布

为了解陕西小麦品种控制多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)活性的主效基因组成,利用PPO18和PPO29标记对138份推广品种的PPO-2A和PPO-2D位点的等位变异进行了分子检测。结果表明,在PPO-2A位点,含Ppo-A1a(高PPO活性)和Ppo-A1b(低PPO活性)等位变异类型的品种比例分别为47.1%和52.9%;在PPO-2D位点,含Ppo-D1a(中等低PPO活性)和Ppo-D1b(中等高PPO活性)等位变异类型的品种频率分别为30.4%和69.6%;含Ppo-A1a/Ppo-D1a(较高PPO活性)、Ppo-A1a/Ppo-D1b(最高PPO活性)、Ppo-A1b/Ppo-D1a(最低PPO活性)、Ppo-A1b/Ppo-D1b(较低PPO活性)等位变异组合类型品种的频率依次为10.1%、37.0%、20.3%和32.6%;不同地区不同等位变异类型及其组合的分布比例也不同。总体来看,陕西低PPO活性的小麦品种比例偏低,选育低PPO活性品种应成为当前陕西小麦品质改良的主要目标之一。

加味温胆汤对日本快速老化模型鼠肝细胞核活性基因的影响

探讨加味温胆汤对日本快速老化模型鼠(SAM-P/10)肝细胞核活性基因的影响。方法:采用DNA酶Ⅰ为活性基因探针,酶解DNA。结果:经治疗后各组肝细胞核基因组经DNA酶消化的肝细胞核酶解片段缩小,接近R/1系水平。结论:加味温胆汤具有提高SAM-P/10鼠肝细胞核活性基因水平,并增加转录活性的作用。推测其机制与其改善了SAM-P/10鼠肝细胞染色质构象,从而有利于DNA酶的消化作用有关。

活性基因效应假说

根据前人的研究和杂交育种实践，结合基因组印迹的遗传理论，提出杂种优势产生的活性基因效应的假说．认为生物体的基因分为活性基因和无活性基因两类，杂种优势来源于活性基因的加性效应和互作效应；并将杂种优势部分为一般杂种优势和特殊杂种优势两部分，这有利于对杂种优势作深入的分析研究．

补肾中药对老年大鼠肝细胞核内活性基因的影响

目的:观察老年、老年加补肾中药及青年组大鼠细胞核内活性基因的变化,探求补肾中药延缓衰老的分子生物学机理。方法:以脱氧核糖核酶Ⅰ(DNabe Ⅰ)为探针,脱氧核糖核酸Ⅱ(DNaseⅡ)为参照,分别切割老年、青年、老年加补肾药大剂量组、老年加补肾药小剂量组大鼠肝细胞核内染色质,研究4组大鼠肝细胞核活性基因的变化。酶切后进行琼脂糖电泳,并将胶板置于紫外灯下观察、摄影。结果:观察到在不同的时间内,对 DNaseⅠ的消化敏感性依次为青年组大于补肾组(大剂量组与小剂量组无显著差异),补肾组大于老年组,而4组对 DNaseⅡ敏感性无差异。结论:老年大鼠肝细胞核内染色质对 DNaseⅠ的敏感性下降。补肾中药延缓衰老的分子生物学基础可能与减缓细胞核内活性基因丢失有关。

补肾益精中药对老龄小鼠活性基因及核糖核酸酶活性的影响

目的 研究补肾益精药物对老龄小鼠肝细胞核活性基因、血清核糖核酸酶及血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性的影响，初步探讨补肾益精药物延缓衰老的分子机理。方法 用紫外分光光度法和电泳法检测活性基因，用紫外发光光度法检测 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性，用化学发光法检测 Ｓ Ｏ Ｄ活性。结果 青龄小鼠肝细胞核对活性基因探针 Ｄ Ｎ Ａ ａｓｅⅠ的消化敏感性、血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性显著高于老龄对照组，血清 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性较老龄对照组显著降低；服用了补肾益精药物的老龄小鼠其肝细胞核对 Ｄ Ｎ Ａ ａｓｅⅠ消化敏感性和血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性较老龄对照组均显著升高，血清 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性较老龄小鼠显著降低。结论 补肾益精药物益肾宝及左归饮使老龄小鼠肝细胞核中的活性基因数及血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性升高，血清 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性降低，这可能是补肾益精药物延缓衰老的分子机理之一。

HMG_(17)非组蛋白与转录活性基因的关系

用核内蛋白质与经0.4mol/L NaCL抽提后的细胞核重组,以DNA酶I消化法为测定活性基因的指标,观察猪胸腺HMG_(17)非组蛋白对细胞核中活性基因的影响。结果显示:猪胸腺HMG_(17)使细胞核对DNA酶I作用的敏感性增加,因此认为HMG17为使细胞核胞核中基因呈较大活性的重要因素。

Down’s综合征母亲与反复自发流产女性、正常生育妇女rRNA活性基因的对比研究

本文应用银染的方法，研究Ｄｏｗｎ＇ｓ综合征（２１三体儿）母亲的随体联合与自发流产女性、正常生育妇女之间有无差别。结是表明：２１三体儿母亲Ａｇ－ＮＯＲ（核仁组织区银染点）平均值为７．１９±０．９３，Ａｇ－ＡＡ（核仁组织区银染联合数）平均值为０．９８±０．２６；反复自发流产女性Ａｇ－ＮＯＲ为７．００±１．０５，Ａｇ－ＡＡ为０．９６±０．２４；正常生育妇女Ａｇ－ＮＯＲ为６．８５±０．５３，Ａｇ－ＡＡ为０．９７±０．１２。三者数值经配对ｔ检验处理Ｐ＞０．０５无显著性差异。

Norplant皮下埋植避孕药对妇女rRNA活性基因影响的自身对比观察

本文应用银染技术对接受Norplant皮下埋植避孕剂妇女的外周血淋巴细胞染色体核仁组织者区的rRNA分别进行用药前、后的自身对照研究。以端着丝粒染色体核仁组织者区银染粒（Ag－NOR）和核仁组织区银染联合数（Ag－AA）的观察，间接了解核糖体活性基因变化情况。观察用药前与用药后30天、180天、365天、730天、1090天的5组自身对比。结果表明：接受Norplant皮下埋植剂避孕妇女用药前、后的rRNA活性基因无显著性变化。

大亚湾表层沉积物碳水化合物活性酶基因分布特征

微生物的碳水化合物活性酶(carbohydrate active enzymes,CAZymes)是海洋沉积物有机碳降解过程中的关键。文章基于大亚湾2020年春季表层沉积物的宏基因组数据,分析鉴定编码CAZymes序列种类及其在微生物中的分布,并预测了微生物群落对不同结构聚糖的利用。结果表明,表层沉积物微生物群落对不同结构聚糖的利用能力不同。δ-变形菌纲是编码降解肽聚糖和几丁质相关酶类序列的最大贡献者;γ-变形菌纲、拟杆菌门和浮霉菌门具有最高的CAZymes家族的α-生态多样性(香浓指数),是编码降解结构复杂多糖(岩藻聚糖、昆布多糖、纤维素等)的CAZymes基因优势种群;酸杆菌是编码裂解寡聚半乳糖醛酸多糖酶序列的优势菌群。古菌对大部分CAZymes贡献低于1%,但对编码降解纤维素和半纤维素的碳水化合物酯酶(carbohydrate esterase,CE)序列、结合模块(carbohydrate binding module,CBM)基因序列贡献较突出(贡献介于2.18%~11.1%)。CAZymes的底物主要源自于湾内自生的有机碎屑,降解藻源有机碎屑的CAZymes序列的相对丰度于湾口高于湾东北部。与木质素降解相关的辅助活性家族(auxiliary activity families,AAs)序列相对丰度在湾东北部最高,主导的AAs可能有助于增加木质纤维素的溶解度,进而提高糖苷酶对木质纤维素的生物利用度。大亚湾表层沉积物中微生物及其CAZymes序列组成主要与上层水体有机颗粒沉降以及水深相关。

金黄葡萄球菌ClfA活性基因的克隆及原核表达

目的克隆金黄葡萄球菌表面蛋白凝集因子A(ClfA)活性基因,并进行原核表达。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增ClfA(221-550)活性基因,克隆入载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-ClfA(221-550),转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果PCR扩增出987bp的目的基因片段,重组表达质粒经双酶切证明构建正确。表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约36000处可见目的条带,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的36.76%,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了金黄葡萄球菌ClfA活性基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了目的蛋白。

炭疽芽孢杆菌重要生物活性基因及其调控

一、炭疽芽孢杆菌在自然界的生存及致病作用概述 炭疽(anthrax)是由炭疽芽孢杆菌(bacillus anthracis)引起的一种人兽共患病,主要发生在牛及其他食草哺乳动物,患者通过接触被感染的动物和存在于空气、土壤中的炭疽杆菌芽孢发病,一般不形成人与人的直接传播.

冰核活性细菌基因的研究进展及其应用

冰核活性细菌是一类可以诱导过冷水结冰而导致霜冻灾害的细菌,它已成为一种重要的生物资源获得广泛的研究与开发,在基础理论和应用研究方面取得了较大进展。近些年来,许多国家的学科研究者对于冰核基因的研究与开发开展了大量的工作。自1985年克隆出了第一个冰核基因后,目前已经从冰核细菌中克隆了8个冰蛋白基因并完成了测序。冰核活性细菌及基因资源具有广阔的研究开发的价值,且具有良好的应用前景。所以,对于冰核活性基因的结构特点及近年来的研究现状有个总体了解是很有必要的。本文主要介绍了冰核活性基因及其应用方面的研究进展情况。

老年鼠肝、脑细胞核活性基因的变化

我室用ＤＮＡ酶Ⅰ为活性基因探针酶解ＤＮＡ，以ＤＮＡ酶Ⅱ酶解ＤＮＡ为对照，研究老年鼠肝、脑细胞核活性基因的变化。发现在不同的消化时间内，老年鼠肝、脑细胞核对ＤＮＡ酶Ⅰ消化敏感性小于青年鼠，尤以消化２分钟为明显，说明老年鼠肝、脑细胞核内活性基因数在减少。

黄淮麦区(南片)小麦新品系脂肪氧化酶活性分析及其等位基因检测

小麦籽粒脂肪氧化酶(Lipoxygenase,Lox)是影响小麦面粉色泽的重要因素之一。为了解Lox活性及其等位基因在黄淮麦区(南片)小麦新品系中的分布情况,以及明确不同等位基因与Lox活性之间的关系。本研究以94份黄淮麦区(南片)小麦新品系为试验材料,利用功能标记Lox16、Lox18和Lox-B23对其TaLox-B1、TaLox-B2和TaLox-B3位点上的等位基因进行分子检测,同时利用分光光度计对供试材料的Lox活性进行测定。结果表明,在TaLox-B1位点,共检测到TaLox-B1a和TaLox-B1b两种等位基因,分布频率分别为18.1%和81.9%,TaLox-B1a等位基因的Lox活性显著高于TaLox-B1b等位基因;在TaLox-B2位点,共检测到TaLox-B2a和TaLox-B2b两种等位基因,分布频率分别为88.3%和11.7%,TaLox-B2a等位基因的Lox活性显著高于TaLox-B2b等位基因;在TaLox-B3位点,共检测到TaLox-B3a和TaLox-B3b两种等位基因,分布频率分别为67.0%和33.0%,TaLox-B3a等位基因的Lox活性显著高于TaLox-B3b等位基因。共检测到TaLox-B1a/TaLox-B2a/TaLox-B3a、TaLox-B1b/TaLox-B2a/TaLox-B3a、TaLox-B1a/TaLox-B2a/TaLox-B3b、TaLox-B1b/TaLox-B2a/TaLox-B3b、TaLox-B1a/TaLox-B2b/TaLox-B3b和TaLox-B1b/TaLox-B2b/TaLox-B3b六种等位基因组合,分布频率分别为10.6%、56.4%、5.3%、16.0%、2.1%和9.6%,含有TaLox-B1a/TaLox-B2a/TaLox-B3a等位基因组合材料的Lox活性显著高于其余五种等位基因组合;含有TaLox-B1b/TaLox-B2b/TaLox-B3b等位基因组合材料的Lox活性显著低于其余5种等位基因组合。

党性活性基因与毛泽东的贡献

党的党性,是党作为马克思主义政党的特质和禀性。对于共产党人而言,党性主要体现在三个方面:一是忠诚;二是干净;三是担当。在党性中,忠诚是基质,干净是纯粹性要求,担当是其中最富生机的活力元素。三者中,主要是担当连接了党的奋斗史和成长史,编导了中华民族近百年来的文明发展史和进步史。90多年来,我们党以忠诚赢得了人民的信任,靠干净受到了人民的敬仰,凭担当与民共生、与时代同行。在这近百年的漫长历程中,毛泽东作为党的领袖和后世共产党人的导师,以对党和人民忠诚干净而鞠躬尽瘁的担当奉献,赋予并增强了党性活性因子的生殖力及生命力,使党的党性不断拥有壮实深厚的根基和根本,值得世代共产党人坚定不移地传承弘扬。

金黄色葡萄球菌FnBA活性基因的克隆及其原核表达

根据GenBank中纤连蛋白结合蛋白A基因(FnBA)序列设计了1对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增;结果获得了1 735 bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,成功地构建了克隆质粒pMD18-T-FnBA。以HindⅢ和BamHⅠ双酶切pMD18-T-FnBA和pET28a(+),将纯化的基因FnBA亚克隆至pET28a(+)中,构建了原核表达质粒pET28a-FnBA,并将其转化至E.coliBL21感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,在约85 000处出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带。又经West-ern-blotting分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。

高迁移率族蛋白B1真核表达载体的构建及其对肿瘤坏死因子-α报告基因活性的影响

目的克隆人的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因,插入pc-DNA3载体中并检测其对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)报告基因活性的影响。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术,从人乳腺癌细胞系MCF-7基因组中扩增出HMGB1基因,插入载体pc-DNA3中,确定所扩增的DNA序列;用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)在293T细胞中检测其表达;应用报告基因方法检测其对TNF-α报告基因表达的影响。结果酶切和测序结果表明扩增的HMGB1序列正确,大小为648bp。在293T细胞中正确表达相对分子质量约24000的HMGB1蛋白。下游基因TNF-α荧光素酶活性实验显示,构建的真核表达载体在内毒素刺激后以先增加后降低的方式影响TNF-α的活性,且对从95-120长度的TNF-α报告基因活性影响最明显。结论HMGB1以先增加后降低的方式影响TNF-α基因的表达,且主要通过26个碱基大小的片段发挥作用。

非基因组活性对雌激素受体阳性乳腺癌细胞Herceptin敏感性的影响

目的探讨雌激素(estrogen,E2)通过雌激素受体(estrogen receptor,ER)非基因组活性干扰ER阳性(ER+)乳腺癌细胞对人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)的人源化单克隆抗体赫赛汀(Herceptin)的敏感性及其机制。方法采用Western blot和瞬时转染结合荧光素酶报告基因分析,确定BT-474乳腺癌细胞(ER+/HER2+)和SKBR-3乳腺癌细胞(ER-/HER2+)作为对比研究对象;在E2存在与否的情况下,采用细胞增殖分析比较Heregulin(HRG)诱导的BT-474和SKBR-3细胞对Herceptin敏感性的改变;采用Western blot检测HER2途径下游关键分子MAPK的磷酸化水平。结果在没有E2存在的情况下,Herceptin可有效抑制BT-474和SKBR-3细胞的增殖(P<0.01);在E2存在的情况下,Herceptin对BT-474细胞增殖的抑制效应消失(P<0.01),同时,Herceptin不能降低MAPK的磷酸化;这些现象在SKBR-3乳腺癌细胞中却不会出现。结论 E2可通过ER非基因组活性影响ER+的乳腺癌细胞Herceptin的治疗效果,并可能参与了Herceptin抵抗的发生。

补肾延年丹对老年大鼠肝染色质基因活性的影响

以DNasel为杂色质活性基因的探针，观察补肾延年丹对老年大鼠肝染色质基因活性的影响．结果18月龄老年大鼠肝染色质DNasel消化百分率显著低于5月龄青年大鼠（P＜0．01）；灌胃给药30d的补肾延年丹中剂量（10倍临床剂量）组老年大鼠肝染色质DNaseI消化百分率显著高于老年大鼠空白对照组（P＜0．05）；大剂量（20倍临床剂量）组和小剂量（5倍临床剂量）组以及附性对假药补肾强身胶囊（10倍临床剂量）组老年大鼠也显示高于老年空白对照组的趋势．提示老年大鼠肝染色质基因活性降低,补肾延年丹使老年大鼠肝染色质基因活性得到一定程度恢复，这可能是补肾抗衰老的生化机制之一．