HIV-1整合酶活性检测方法的研究进展

H IV-1整合酶介导病毒DNA与宿主染色体的整合,是病毒复制周期中必不可少的环节,抑制整合酶能有效阻止病毒在体内复制.同时,人体细胞中无整合酶的功能类似物,因此,整合酶是抗H IV-1的理想靶点.近年来,整合酶活性的体外检测方法得到快速发展,并广泛应用于整合酶活性检测、反应机理研究及整合酶抑制剂的体外筛选等研究中.本文综述了整合酶活性检测方法的研究进展.

不同骨料碱活性检测方法及结果判定

混凝土碱集料反应是影响混凝土耐久性的重要因素之一,目前国内外对于骨料碱活性的检测方法繁多且各有优劣,因此单一使用某种方法进行评定可能存在误判、漏判的情况。综述分析了岩相法、砂浆长度法、砂浆棒快速法(AMBT)和混凝土棱柱体法(CPT)在国内外集料碱活性检测中的应用情况。结合某大型水利枢纽工程,先后采用岩相法、AMBT法和CPT法对天然料场的集料进行了碱活性检测和碱活性抑制试验,三种方法结果出现差异,最终以CPT法检测结果作为最终判定结果。实际工作中,应结合当地地质条件和岩石种类,科学地采用多方法相结合的手段进行检测和判定。

生物活性检测方法的定义及分类辨析

目的:探索生物活性检测方法的定义和系统分类规范,为深入认识并全面理解生物活性方法的本质提供思路。方法:根据生物活性检测方法的属性特征搭建生物活性方法分类框架,并阐述其分类意义。结果:(1)生物活性检测方法的定义在不同领域中的关注点不同,而导致侧重点不同,但主题思想基本一致。(2)在生物活性检测方法中,效价及其衍生术语均有明确的内涵和外延,准确使用这些术语可使表达更加专业和清晰。(3)生物活性检测方法可以根据所检测的生物效应直接与否、测定所用生物受试体特征、生物活性反应的性质和机理,以及活性检测结果的数据类型等众多属性进行划分。结论:对生物活性检测方法进行科学规范地定义和分类,不仅有利于统一该类方法在应用时的表达规范性,还可深入了解方法的特性,为进一步理解方法,以及科学应用方法和改进方法提供理论依据和技术支撑。

生物活性检测方法的验证实验设计探讨

科学的实验设计是保证检测方法的结果准确性和结论可靠性的主要工具。本文对影响因素多且变异大的生物活性检测方法验证所需的实验设计进行了探讨,并详细阐述了在方法验证设计中样本量的计算方法。希望今后能为生物活性检测方法验证人员准确理解方法验证实验设计提供理论参考。

生物活性检测方法量效关系模型的确立问题探讨

目的:探讨生物活性检测方法的量效关系模型确立方式和评估标准。方法:结合对量效关系模型的最新研究进展,采用回顾性研究方式,对生物活性检测方法中的量效关系模型,从其重要性、常见生物反应的量效关系模型、模型确立前需要解决的问题,到模型确立需要的基本步骤进行梳理和分析。结果和结论:(1)量效关系建模是目前进行方法验证前的重要评价内容,是方法风险评估的出发点。(2)生物反应的量效关系模型较多,不仅包括直线模型,还包括多项式模型、logistic模型、Brain cousins模型、单位点和双位点结合的特异性和非特异性模型,以及质反应数据的probit模型等。(3)在模型确立前,需要结合专业和统计知识进行跨学科交流,找出反应窗,通过预实验确定合理的浓度数和各浓度下重复数,进行合理的实验设计,并事先确定模型的评估方法和接受标准。(4)模型确立的基本步骤包括评估各响应值的独立性、残差的正态性和同质性,以及最后对同类模型的择优选择方式等。

生物活性检测方法研究中常用关键术语解析

生物活性检测方法的全生命周期研究是药理学的重要内容,广泛应于药品的活性测定、新药研究以及激素、神经介质等的生理活性测定等领域,对某些药品尤其是生化类药品、生物制品等的检测仍起着无法替代的作用。生物活性检测方法由于使用生物受试体(变异大)、影响因素多,且涉及较多的数理统计内容,因而此类方法涉及的专业术语也较多,在理解和使用当中容易产生混淆。而对术语的正确理解是从事生物活性检测方法相关研究工作的根本基础,因此,本文针对生物活性检测方法中部分常用的关键术语,如方法适用性、重复、平行性等进行初步汇总和深入解析,以期对相关从业人员开展生物活性检测方法评估和应用工作有所助益。

生物活性检测方法验证统计分析软件的设计和功能

生物活性检测方法验证(biological method validation, BMV)统计分析软件是一款具有全部自主产权的专用统计分析软件。其优势在于:(1)提供常见的方法验证性能参数,如精密度及其置信上限、准确度及其相应的置信区间、范围等;(2)提供满足方法需求的判定标准,如分析总误差、报告值的预测区间、容忍区间、方法能力指数(MCI)等;(3)新增方法应用指标,包括操作模式变异度、报告值的区分阈值、能力验证标准差、方法关键影响因素分析等;(4)为使用者提供自主选择生物实验系统适用性模型,并可计算验证实验所需样本量。此软件不仅操作简便,而且输出结果科学可靠,可满足各国药典或指南对方法验证的要求。该软件的开发,将方便于药品行业研发人员建立科学可靠的生物活性检测方法,以确保药品的质量安全。

生物活性检测方法的方法学研究概述

生物活性检测方法在生物制品研发和质量控制中发挥着关键作用,近年来对该类方法的方法学研究也取得了长足进展。本文首先回顾生物活性检测方法研究的历史进程;其次,对国内外的药典、法规及技术指南中的生物活性检测方法内容进行梳理;最后,对生物活性检测方法学相关的最新进展进行概述和分析,包括分析方法生命周期、分析目标概要等新概念的介绍。希望本文能为药品行业相关人员全面了解国内外药品生物活性检测方法及其相关指导原则提供参考。同时,也希望为药品研发人员建立科学、可靠的生物活性检测方法提供理论支持。

Celltiter-Glo ATP荧光活性检测在登革病毒1型中和试验中的应用

目的利用Celltiter-Glo ATP荧光活性检测方法(CTG法)在登革病毒1型(DENV1)中和试验中的实验研究,探索出新的组织培养中和试验结果判断方法。方法 DENV1病毒与抗DENV1多克隆抗体进行中和试验感染Vero细胞,选择CTG法和传统的显微镜观察法判断CPE的程度,比较两种方法对细胞半数致死量(TCID50)和中和指数的判定,确定CTG法的准确性。结果显微镜观测TCID50=5.5,CTG法TCID50=5.31;显微镜观测、CTG检测法均为10-2.1为中和终点,两种方法获得的中和指数较一致。结论 CTG法可作为DENV1细胞组织培养中和试验的结果判断,并能减少实验结果评定中的人为误差。

细菌性阴道病BV蓝快速检测的应用分析

目的运用BV蓝快速诊断试剂检测阴道分泌物唾液酸酶活性,观察其在细菌性阴道病(BV)诊断中的价值。方法对287例阴道分泌物标本进行Amsel法、BV蓝快速诊断试剂,以Amsel法为金标准,评价BV蓝快速检测的应用价值。结果与Amsel法相比,BV蓝检测法检测的灵敏度为93.85%,特异度为96.81%,阳性预测值为96.06%,阴性预测值为95.00%,总有效率为95.47%。结论 BV蓝快速诊断试剂是一种酶活性检测试剂,与传统的检测方法相比,其具备了检测速度快,操作简捷,具有极高的敏感性和特异性,适合细菌性阴道病的筛查与诊断,有一定的推广价值。

“谱效整合指纹图谱技术”在中药物质基础方面的研究进展及思考

当今,随着祖国对中医药事业的大力支持以及各种新技术新方法的不断涌现,中药物质基础方面的研究得以快速发展,并获得丰硕成果,这对阐明中药作用机制和提高其质量标准方面具有积极地推动作用。由于目前中药复杂的成分体系,质控方法与其疗效相关性较弱,对达到中药有效性的目的难以确保。基于此,本课题组提出将中药化学特征鉴别与生物活性评价融为一体的综合性评价模式-"谱效整合指纹谱"。本综述对谱效相关研究方法在中药物质基础研究中的应用进行总结,以期为基于"谱效整合指纹谱"研究中药物质基础提供新颖的思考角度和方法,为中药的标准化和国际化做出贡献。

曲普瑞林缓释注射剂中杂质的活性比较分析

目的:研究曲普瑞林缓释注射剂中有关物质的体内外活性,为制剂的杂质控制及其限度制定积累数据并提供策略。方法:采用CellTiter-Glo ATP荧光活性检测方法测定曲普瑞林有关物质对前列腺癌细胞LNCaP FGC增殖抑制作用;采用HPLC-MS/MS法测定曲普瑞林有关物质对大鼠血浆中睾酮水平抑制作用。结果:曲普瑞林游离酸、乙醇酸曲普瑞林、双乙醇酸曲普瑞林具有抑制前列腺癌细胞增殖的作用,抑制率分别为曲普瑞林的120.92%、89.51%、76.77%;乙醇酸曲普瑞林、双乙醇酸曲普瑞林、乙酸化曲普瑞林均能够抑制大鼠体内睾酮至去势水平,即≤0.5 ng·mL^(-1)。结论:曲普瑞林游离酸、乙醇酸曲普瑞林、双乙醇酸曲普瑞林、乙酸化曲普瑞林具有与曲普瑞林相当的药理活性。

方法满足预期用途的评估指标和标准探讨

目的:系统阐述关于方法能力的评估指标及其标准,为科学、多角度地评估方法能力提供参考。方法:结合生物活性检测方法验证特点,从各指标的定义、计算公式、用途及意义入手,论述5种新评估方法满足预期用途的能力指标及其判定标准。结果:用来判断方法满足预期用途的新方法能力指标有:(1)方法的总分析误差(TAE);(2)报告值的预测区间(RVPI)和容忍区间(RVTI);(3)方法能力指数(MCI)和方法误判率(MMJP)。5个指标从不同角度提供了方法能力的量化评估,为药品开发者和监管者衡量方法能力提供更直观的评估指标。结论:利用严谨的方法验证获得的实验数据集和统计技术,可以获得更多直接并易于理解的方法能力评估指标;这些指标不仅丰富方法的属性集,而且可对方法有更深入的理解。

中药质量一致性评价探讨

旨在探讨中药质量一致性评价问题,试图借鉴化学仿制药与原研药、生物类似物与原创药质量一致性评价发展现状和方法思路,结合中药自身的特殊性,总结目前在中药质量一致性评价领域具有应用潜力的技术手段,包括近红外光谱分析技术、生物活性检测方法、指纹图谱等技术手段,试图寻找合适的中药质量一致性评价方法,为保障中药的安全、有效提供借鉴与思考。

生物效价报告值表示的科学规范性探讨

目的:探讨生物效价结果表示的科学规范性。方法:从方法的适用性、报告值的规范性、有效数字修约等方面来进行论述。结果:(1)只有当生物活性检测方法同时满足了系统适用性检验与样品适用性检验,才能得到准确可靠的最终报告值。(2)报告值的表示应体现相应的精密度,一般采用所测效价值的相对置信区间来表示。(3)报告值表示需依据方法的变异度确定有效数字的位数,并遵循相关修约规则。结论:生物效价报告值表示的科学规范性探讨,对于效价测定具有示范作用。