宫颈癌患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体和相关细胞因子表达及临床意义

目的探究宫颈癌患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体和相关细胞因子的表达水平及临床意义。方法选取2021年3月至2024年3月收治的宫颈癌患者78例作为癌变组,选取同期宫颈上皮内瘤变患者78例作为癌前病变组。比较2组血清NLRP3炎症小体[NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)]、白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平;采用Pearson相关性分析血清NLRP3、ASC、Caspase-1与IL-18、IL-1β的关系;分析宫颈癌患者相关细胞因子水平和临床病理特征之间的关系。结果癌变组血清IL-18、IL-1β、NLRP3、ASC、Caspase-1水平均高于癌前病变组(P<0.01);Pearson相关性分析结果显示,患者血清NLRP3、ASC、Caspase-1水平与IL-18和IL-1β水平均呈正相关(P<0.05,P<0.01)。宫颈癌患者肿瘤临床分期越高、分化程度越低,IL-18和IL-1β水平越高(P<0.01);有淋巴结转移和无淋巴结转移的宫颈癌患者IL-18和IL-1β水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论宫颈癌患者血清IL-18、IL-1β水平和血清NLRP3炎症小体均异常升高,且其水平变化与肿瘤恶性进展有关。

血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体3、小窝蛋白-1、胱抑素C水平联合检测对高血压脑出血患者疾病转归的预测价值

目的观察高血压脑出血(hypertensive intracerebral hemorrhage,HICH)患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、小窝蛋白-1(caveolin-1)、胱抑素C(cystatin C,Cys C)水平,并探究其对疾病转归的预测价值。方法回顾性选取接受微创穿刺血肿引流术治疗的184例HICH患者作为研究组,另选取同期健康志愿者62例作为对照组。比较两组血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C水平。依据术后90 d疾病转归情况将研究组患者分为转归不良亚组89例,转归良好亚组95例;比较其术前、术后7d血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C水平。多因素Logistic回归分析疾病转归的影响因素。评价术后7d血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C水平对术后90d疾病转归的预测价值。结果研究组血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C水平高于对照组(P<0.05)。转归不良亚组术后7d血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C水平高于转归良好亚组(P<0.05)。血肿体积、血肿破入脑室及血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C水平为转归不良的危险因素(P<0.05)。术后7d血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C联合预测术后90d疾病转归不良的AUC大于单项指标预测(P<0.05)。结论HICH患者血清NLRP3、Caveolin-1、Cys C水平升高,其对疾病转归具有一定预测价值,联合检测其水平可提高预测效能。

伊木萨克提取物调控NOD样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1通路对勃起功能障碍大鼠的干预效果

目的分析伊木萨克提取物调控核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(NLRP3/Caspase-1)通路对勃起功能障碍大鼠的干预效果。方法选取40只SPF级8周龄SD大鼠,随机选取10只作为对照组,另外30只建立勃起功能障碍模型,并将30只建模成功大鼠分为3组:用生理盐水灌胃大鼠为模型组,用西地那非灌胃大鼠为药物对照组,用伊木萨克提取物灌胃大鼠为伊木萨克提取物组,每组各10只。连续灌胃28 d后,采用HE染色法观察各组大鼠阴茎海绵体病理组织学特征;比较各组大鼠性功能指标;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠外周血氮氧化物(NOX)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)等内皮功能指标,和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)等氧化应激指标;采用实时定量PCR法检测各组大鼠阴茎海绵体组织NLRP3、Caspase-1 mRNA相对表达量;采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组大鼠海绵体组织NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况。结果各组大鼠海绵体形态学观察显示,对照组大鼠海绵体窦状隙中具有红细胞;模型组大鼠阴茎海绵体内血窦数量、小血管数量减少,内皮细胞密度下降;药物对照组、伊木萨克提取物组大鼠阴茎海绵体内小血管数量、血窦数量增加,且伊木萨克提取物组大鼠海绵体形态学特点的改善程度大于药物对照组。与对照组比较,其他3个建模组骑跨次数、插入次数、舔嗅次数、精子密度、精子存活率均显著下降,首次爬背时间显著增加(P<0.05);伊木萨克提取物组骑跨次数、插入次数、舔嗅次数、精子密度、精子存活率显著高于模型组和药物对照组,首次爬背时间显著少于模型组和药物对照组(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,其他3个建模组血清NOX、ET-1、LOX-1、MDA水平显著升高,NO、SOD、GSH水平显著降低(P<0.05);伊木萨克提取物组NOX、ET-1、LOX-1、MDA水平显著低于模型组和药物对照组,NO、SOD、GSH水平显著高于模型组和药物对照组(P<0.05)。实时定量PCR结果显示,与对照组比较,其他3个建模组NLRP3、Caspase-1相对表达量显著升高(P<0.05);伊木萨克提取物组NLRP3、Caspase-1相对表达量显著低于模型组和药物对照组(P<0.05);Western Blot检测结果显示,与对照组比较,其他3个建模组NLRP3、Caspase-1蛋白表达量显著升高(P<0.05);伊木萨克提取物组NLRP3、Caspase-1蛋白表达量显著低于模型组和药物对照组(P<0.05)。结论伊木萨克提取物可改善大鼠性功能,提高大鼠精子密度及精子存活率,其作用机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1通路有关。

电针干预脑缺血再灌注损伤模型大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/半胱天冬氨酸蛋白酶1表达的变化

背景:对于脑缺血/再灌注损伤目前尚无有效的治疗方法,缓解脑缺血/再灌注损伤级联损伤对于治疗方法的探索至关重要。电针基于传统针灸和电疗法,可有效缓解缺血性脑卒中导致的神经功能损伤症状。目的:基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/半胱天冬氨酸蛋白酶1通路,探讨电针对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用。方法:48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、抑制剂组,每组12只,后3组应用线栓法制备脑缺血再灌注模型。半胱天冬氨酸蛋白酶1抑制剂用Z-YVAD-FMK干预,穴位选取"合谷""尺泽""三阴交""足三里"。采用神经行为学评分评定神经功能症状,2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法观察脑组织梗死情况,电镜观察神经元焦亡,荧光定量PCR和蛋白质印迹检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3及半胱天冬氨酸蛋白酶1表达,免疫荧光染色观察小胶质细胞水平,酶联免疫吸附实验检测白细胞介素1β、白细胞介素18及肿瘤坏死因子α表达水平。结果与结论:(1)与模型组比较,电针组和抑制剂组的神经功能缺损评分、脑组织梗死体积减少(P均<0.05);(2)与模型组比较,电针组和抑制剂组的神经元焦亡减轻;(3)与模型组比较,电针组和抑制剂组的小胶质细胞减少,白细胞介素1β、白细胞介素18、肿瘤坏死因子α表达水平降低(P均<0.05);(4)与模型组比较,电针组和抑制剂组核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3及半胱天冬氨酸蛋白酶1表达水平降低(P均<0.05);(5)表明电针可通过减少小胶质细胞水平、减少炎症反应、下调核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3/半胱天冬氨酸蛋白酶1表达、减轻脑缺血再灌注损伤大鼠的神经元焦亡,发挥神经保护作用。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3、胱天蛋白酶-1、白细胞介素-1β在子宫内膜腺癌中的表达及临床意义

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)在子宫内膜腺癌组织中的表达及临床意义。方法选择徐州市中心医院2014年1月至2016年12月行手术治疗的病人组织蜡块标本,其中121例子宫内膜腺癌、32例子宫内膜不典型增生及50例正常增殖期子宫内膜,免疫组化法检测上述组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β的阳性表达,分析NLRP3、caspase-1、IL-1β表达水平与子宫内膜腺癌病人5年生存率的关系。结果子宫内膜腺癌组病人中NLRP3、caspase-1的阳性率为62.0%、71.1%,在子宫内膜不典型增生组织中的阳性率为46.9%、62.5%,其表达水平明显高于正常增殖期子宫内膜组织中NLRP3、caspase-1的阳性率14%,22%(P<0.05)。子宫内膜腺癌病人组织中NLRP3表达与caspase-1、IL-1β表达呈正相关(r=0.40,P<0.001;r=0.22,P=0.015),caspase-1与IL-1β表达呈正相关(r=0.27,P=0.003)。Kaplan-Meier生存分析显示:NLRP3、caspase-1、IL-1β阳性表达病人5年生存率分别为77.3%(58/75)、80.2%(69/86)、79.1%(53/67),均显著短于阴性表达病人97.8%(45/46)、97.1%(34/35)、92.6%(50/54)(均P<0.05)。Cox回归分析显示NLRP3是子宫内膜腺癌病人预后的独立危险因素[HR=15.375,95%CI:(1.595,148.187),P=0.018]。结论NLRP3、caspase-1、IL-1β可能通过细胞焦亡参与子宫内膜癌的发生发展;NLRP3高表达是影响子宫内膜腺癌病人预后的独立危险因素,可作为潜在的预后分子标志物,为肿瘤提供有效的治疗靶点。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3炎症小体的活化调节与牙周疾病的关系

核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员(NLRP)3炎症小体是一种位于细胞质内的多蛋白质复合体,由其核心成分感知病原体和宿主危险信号后组装而成,通过激活半胱氨酸天冬酰胺特异蛋白酶-1致促炎因子白细胞介素(IL)-1β成熟与分泌参与免疫炎症反应。牙周病是由宿主和微生物因素相互作用导致的局部炎症反应,而IL-1β又是牙周炎发病的关键因素之一。IL-1β的成熟和分泌与NLRP3炎症小体密切相关,且牙周致病菌可调节该炎症小体的表达及活化,因此NLRP3炎症小体对牙周疾病的发生发展和治疗具有重要意义。本文就NLRP3炎症小体的生物学功能、活化机制及其在牙周病学领域的研究进展作一综述。

宫颈癌患者核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体的表达变化及其临床意义

目的探讨宫颈癌患者组织和血清中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体相关蛋白的表达水平,分析NLRP3炎症小体在宫颈癌发生、进展和治疗中的潜在作用。方法选取2019年1月至2020年6月海南省人民医院收治的50例ⅠA~ⅡA期宫颈癌患者作为实验组,均行手术治疗,术中留取癌组织和未被肿瘤浸润的癌旁正常宫颈组织;同时选取50例健康女性作为对照组。所有研究对象均留取外周静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中NLRP3、丙氨酸-丝氨酸半胱氨酸-1(ASC-1)、半胱氨酸酶-1(Caspase-1)、白介素-1β(IL-1β)、C-反应蛋白(CRP)、白介素-18(IL-18)和白介素-6(IL-6)的表达水平,采用旋转式血液流变仪检测红细胞沉降率(ESR),采用流式细胞仪检测白细胞数量;采用免疫组化染色法检测实验组癌组织和癌旁组织中NLRP3、ASC-1、Caspase-1的表达情况。结果实验组白细胞数量、ESR、CRP、IL-6、NLRP3、ASC-1、Caspase-1、IL-1β、IL-18水平明显高于对照组(P<0.05)。实验组癌组织中NLRP3、ASC-1和Caspase-1水平明显高于癌旁组织;NLRP3水平与CRP、IL-1β、IL-18、白细胞数量、ESR和IL-6呈显著正相关,IL-1β水平与白细胞数量、CRP、ESR、IL-18和IL-6呈显著正相关,IL-18的水平与白细胞数量、CRP、ESR、IL-1β和IL-6呈显著正相关(P<0.05)。结论NLRP3炎症小体的激活可能参与了宫颈癌的发生和进展,提示NLRP3炎症小体可作为治疗宫颈癌的潜在靶点。

抑郁症与核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3信号通路相互关系的研究进展

抑郁症是常见的精神障碍性疾病之一,其会给患者和家庭带来沉重的经济负担和思想负担[1]。随着人类生活节奏的加快,来自各个方面的精神压力将会不断增加,促使部分人群出现不同程度的抑郁样行为,如心境低落、思维迟缓、意志活动减退等。如果不加以控制外界施加因素,部分人群就会出现抑郁症,其发病机制尚不清楚。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体、炎性因子、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1与烧伤合并吸入性损伤预后的相关性分析

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、炎性因子、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)与烧伤合并吸入性损伤的预后相关性。方法回顾性分析2015年3月至2019年12月北海市人民医院烧伤外科收治的47例烧伤合并吸入性损伤患者的临床资料。根据患者住院期间病情恢复情况分为预后良好组(n=19)和预后不良组(n=28)。收集2组患者的临床资料,包括患者性别、年龄、烧伤后入院时间、烧伤面积、烧伤深度;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法分别检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及外周血单个核细胞中NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA水平。数据行t检验、χ2检验或Fisher确切概率法、多因素Logistic回归分析及Pearson相关性分析。结果2组患者性别、年龄、烧伤后入院时间、烧伤面积、烧伤深度、IL-6比较,差异均无统计学意义(P值均大于0.05)。预后良好组患者IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平分别为(37.28±6.54)pg/mL、(38.26±8.79)pg/mL、1.75±0.35、1.15±0.27,预后不良组患者IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平分别为(49.46±8.87)pg/mL、(76.83±10.58)pg/mL、2.23±0.41、1.94±0.36,2组比较差异均有统计学意义(t=5.11、13.10、4.17、8.13,P值均小于0.05);多因素Logistic回归分析显示,IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平是导致烧伤合吸入性损伤预后不良的独立危险因素(β=1.56、0.87、1.05、1.11,P值均小于0.05)。经Pearson相关分析显示,IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA水平与烧伤合并吸入性损伤预后不良呈正相关(r=0.42、0.39、0.52、0.56,P值均小于0.05)。结论IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体、Caspase-1的水平异常升高可作为烧伤合并吸入性损伤患者预后不良的特征指标,可根据上述指标指导临床进行早期救治,有助于降低烧伤合并吸入性损伤患者的病死率。

细胞焦亡相关蛋白在胎膜早破孕妇胎膜组织中的表达及其与妊娠结局的关系

目的:探究细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-1)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)在胎膜早破孕妇胎膜组织中的表达及其与妊娠结局的关系。方法:选择2020年1月至2023年1月于常熟市中医院妇产科就诊并分娩的胎膜早破孕妇135例作为观察组,另选择同期产检并分娩的健康孕妇135例作为对照组,比较两组孕妇胎膜组织中NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA表达。依据妊娠结局将135例胎膜早破孕妇分为妊娠不良组(n=50)和妊娠良好组(n=85),通过单因素和多因素Logistic分析胎膜早破孕妇妊娠不良的独立危险因素;应用Logistic回归模型结合限制性立方样条(restricted cubic splines,RCS)分析胎膜早破孕妇胎膜组织中细胞焦亡相关蛋白表达量与妊娠不良的剂量反应关系;依据独立因素构建列线图预测模型,并对模型进行验证。结果:观察组胎膜组织中NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA表达显著高于对照组(P<0.001)。就诊时间≥2 h、生殖道感染、NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA高表达是胎膜早破孕妇妊娠结局不良的独立危险因素(P<0.05);RCS结果显示,胎膜早破孕妇胎膜组织中NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA表达量与妊娠结局不良呈非线性剂量反应关系,在NLRP3 mRNA表达量为1.20(OR=1.818,95%CI:1.673~1.932)和Caspase-1 mRNA表达量为1.25(OR=2.735,95%CI:1.132~3.821)处发生妊娠结局不良的风险最大;构建的列线图预测模型具有良好的区分度、准确性和临床适用性。结论:NLRP3 mRNA和Caspase-1 mRNA在胎膜早破孕妇胎膜组织中呈高表达,二者是胎膜早破孕妇妊娠结局不良的独立危险因素,随着表达量升高,胎膜早破孕妇妊娠不良的危险性也随之升高。

急、慢性布鲁菌病患者核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体观察

目的比较急、慢性布鲁菌病（简称布病）患者治疗前外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、白细胞介素1β（IL-1B）和IL-18水平，了解急、慢性布病免疫特点，寻找布病临床治疗免疫靶点。方法将2016年3—4月在乌兰察布市地方病防治中心治疗的急、慢性布病患者（急、慢性组）各42名作为研究对象，同时选取当地健康人群20名作为对照组。布病的诊断标准按《布鲁氏菌病诊断标准》进行。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定急、慢性组和对照组血清NLRP3、Caspase-1、IL—1β和IL-18水平。结果急、慢性组和对照组血清NLRP3、Caspase．1、IL-1β和IL．18水平[（1264．40±424．74）、（1350．67±468．93）、（192．96±61．52），（162．74±54．23）、（172．44±60．56）、（120．10±61．52），（47.23±13．79）、（46．68±14．72）、（27．71±8．71），（202．23±65．24）、（169．19±54．33）、（108．62±41．39）ng／L]比较，差异均有统计学意义（F=61．96、6．26、16．68、18．31，P均〈0．01）；与对照组比较，急、慢性组NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18水平均明显升高（P均〈0．05）；与慢性组比较，急性组IL．18水平明显升高（P〈0．05），而急、慢性组NLRP3、Caspase-1、IL-1β水平无明显差异（P均〉0．05）。结论急、慢性布病患者通过NLRP3炎性小体发动的固有免疫应答相同．IL-18水平差异可能对急、慢性布病免疫应答产毕了影响．

基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨苓桂气化方改善射血分数保留心力衰竭早期舒张功能的分子机制

目的观察苓桂气化方对射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)早期模型大鼠心脏舒张功能的干预效应,基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)/胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine-containing aspartate-specific proteases-1,Caspase-1)/消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)通路探讨其潜在的分子作用机制。方法40只自发性高血压大鼠高盐高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素溶液建立HFpEF早期大鼠模型,分为HFpEF组、恩格列净组(1.8 mg/kg)、苓桂气化方低剂量组(4.96 g/kg)、苓桂气化方高剂量组(9.92 g/kg),予相应药物灌胃;正常血压组、空白组予等剂量生理盐水灌胃,连续干预9周。采用超声心动图检测大鼠左心房内径(left atrial diameter,LAD)、舒张早期二尖瓣血流速度(left ventricular early diastolic filling peak velocity,E)与舒张晚期二尖瓣血流速度(atrial systolic left ventricular filling peak velocity,A)比值、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF);酶联免疫吸附测定法检测血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)含量;苏木精—伊红染色观察心肌组织病理变化;蛋白质印迹(Western Blot,WB)法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD和白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果与正常血压组相比,HFpEF组LAD和E/A增加(P<0.05),LVEF无明显变化(P>0.05);血清ANP含量升高(P<0.05);病理观察显示心肌炎症浸润;WB结果示NLRP3、Caspase-1、GSDMD和IL-1β蛋白含量升高(P<0.05),表明建模成功。与HFpEF组比,恩格列净组和苓桂气化方低、高剂量组的LAD和E/A减小(P<0.05),血清ANP含量降低(P<0.05),病理观察显示心肌炎症浸润减轻,WB结果示恩格列净组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方低剂量组NLRP3、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方高剂量组NLRP3、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),其余蛋白含量有下降趋势。结论苓桂气化方能改善HFpEF早期模型大鼠心脏舒张功能,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路、减轻心肌炎症浸润、抑制心房重构相关。

白色念珠菌经组织蛋白酶B途径诱导小鼠腹腔巨噬细胞NLRP3炎性体表达

目的探讨含热蛋白结构域3富含亮氨酸重复序列的核苷酸结合寡聚化结构域(NLRP3)在白色念珠菌诱导的小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子产生中的作用及其激活途径。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,将其分为空白对照组、CA-074Me组、白色念珠菌组、白色念珠菌+10-6mol·L-1CA-074Me组和白色念珠菌+10-5mol·L-1CA-074Me组。实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞内NLRP3 mRNA表达,Western blot检测细胞内溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin B)和胱天蛋白酶-1(caspase-1)p20蛋白质水平,酶联免疫吸附试验测定各组细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果白色念珠菌组细胞内NLRP3 mRNA表达、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白表达、细胞培养上清液中IL-1β水平均显著高于空白对照组(P<0.01)。加入10-5mol·L-1CA-074Me干预后,细胞内NLRP3mRNA表达、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白的表达及细胞培养上清液中IL-1β水平与白色念珠菌组比较显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论白色念珠菌通过活化cathepsin B诱导巨噬细胞NLRP3的表达、caspase-1的活化和IL-1β的分泌。

血清NLRP3、Caspase-1对脓毒症患者疾病转归的评估价值

目的分析血清核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)对脓毒症患者疾病转归的评估价值。方法选择2021年8月至2023年8月承德医学院附属医院重症监护病房收治的106例脓毒症患者,并根据入院后疾病转归情况分为生存组(n=65)与死亡组(n=41)。所有研究对象入院24 h内检测血清NLRP3、Caspase-1水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清NLRP3、Caspase-1对脓毒症患者疾病转归的评估价值。结果死亡组脓毒症患者血清NLRP3、Caspase-1均高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清NLRP3、Caspase-1评估脓毒症患者疾病转归的AUC为0.844(95%CI:0.794~0.894)、0.858(95%CI:0.808~0.908),血清NLRP3联合Caspase-1评估脓毒症患者疾病转归的AUC为0.903(95%CI:0.853~0.953)。多因素回归分析显示,血清C-反应蛋白≥136.65 mg/L[OR(95%CI)=3.047(1.852~5.012)]、N末端脑利钠肽原≥986.39 ng/L[OR(95%CI)=2.591(1.703~3.941)]、NLRP3≥425.63 ng/mL[OR(95%CI)=4.536(2.263~9.096)]、Caspase-1≥7.84 ng/mL[OR(95%CI)=4.055(2.162~7.608)]及APACHEⅡ评分≥32.17分[OR(95%CI)=2.872(1.773~4.651)]、SOFA评分≥7.84分[OR(95%CI)=3.459(1.918~6.240)]均为影响脓毒症患者疾病转归的独立危险因素(P<0.05)。结论血清NLRP3、Caspase-1水平与脓毒症患者疾病转归密切相关,二者有望作为评估脓毒症患者疾病转归的有效指标,且联合评估价值更高。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体在帕金森病中的研究进展

帕金森病是一种常见的神经退行性疾病,其特征是黑质多巴胺能神经元的进行性丧失。虽然帕金森病的病因可能是多因素的,但神经炎症是该疾病发病机制的重要组成部分。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体是调节炎症的多蛋白先天免疫复合物。在帕金森病神经炎症中,NLRP3炎性小体复合物组装募集并激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1),激活的caspase-1切割炎性因子白细胞介素-1β和白细胞介素-18的前体,从而启动下游炎性级联反应,加重多巴胺神经元损伤。本综述中对NLRP3炎性小体在帕金森病病理生物学中最新研究进行总结,并且讨论了通过抑制NLRP3炎性小体缓解帕金森病进展的潜在策略。

辣椒素对脑缺血再灌注损伤大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体表达的影响

目的探讨辣椒素对脑缺血再灌注损伤大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体表达及下游炎性通路激活的影响。方法用大脑中动脉闭塞法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。将24只大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组,每组8只。实验组术前3 h给予腹腔注射辣椒素0.2mg·kg^(-1);模型组和假手术组术前3 h腹腔注射等量二甲基亚砜。用Longa 5分法检测神经功能评分,用2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色测定脑梗死面积,用酶联免疫吸附法检测脑组织白细胞介素-1β(IL^(-1)β)和IL^(-1)8水平,用蛋白质印迹法检测脑组织NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、B细胞淋巴瘤因子-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)蛋白的表达水平。结果脑缺血再灌注24 h后,实验组、模型组和假手术组的神经功能评分分别为(2.46±0.40),(4.02±0.54)和0分;脑缺血再灌注48 h后,实验组、模型组和假手术组的神经功能评分分别为(2.30±0.52),(3.89±0.61)和0分,脑梗死面积分别为(14.22±4.46)%,(30.13±5.88)%和0,IL^(-1)β分别为(27.25±3.45),(35.17±4.40)和(22.12±3.76)pg·m L^(-1),IL^(-1)8分别为(31.30±4.80),(37.22±5.18)和(26.24±4.14)pg·m L^(-1),NLRP3蛋白相对表达量分别为1.31±0.19,2.20±0.33和1.02±0.10,Caspase-1蛋白相对表达量分别为1.26±0.18,2.10±0.24和1.06±0.14,Bax蛋白相对表达量分别为1.23±0.20,2.60±0.52和1.03±0.12,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.99±0.07,0.39±0.12和1.04±0.14。实验组和假手术组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论辣椒素对急性脑缺血再灌注损伤大鼠有一定的保护作用,其机制可能与抑制脑组织NLRP3炎性小体表达及下游炎性通路激活有关。

老年痛风性关节炎患者血清NALP3、Caspase-1、IL-18水平及与肾功能指标相关性分析

血尿酸(SUA)升高是痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)患者的主要病理特征,同时伴有大量的炎症因子浸润,临床表现为痛风石和疼痛等,严重者还可出现关节畸形和功能障碍,造成肾功能损伤,甚至肾功能衰竭[1-2]。研究证实[3-4],炎性因子在AGA的发生发展及肾功能损害中均发挥了重要作用。

基于NF-κB/NLRP3/caspase-1通路研究白及多糖对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜炎症损伤的保护作用

目的:探究白及多糖对溃疡性结肠炎(UC)大鼠核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)通路蛋白表达及对肠道屏障损伤的影响。方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)+乙醇法建立UC模型,并将SD大鼠随机分为空白组、模型组、白及多糖低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组、柳氮磺胺吡啶阳性组(0.67 g/kg),除空白组外,其余各组均建立UC模型。白及多糖低、中、高剂量组和阳性组分别灌胃给予相应剂量白及多糖和柳氮磺胺吡啶,空白组和模型组灌胃给予10 ml/kg生理盐水,各组大鼠连续给药2周,1次/d。末次给药12 h后,观察大鼠一般行为并对大鼠进行疾病活动指数(DAI)评分;取大鼠结肠组织,苏木精-伊红染色观察组织病理形态;ELISA检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)、炎症因子IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及肠道屏障功能受损指标二胺氧化酶(DAO)和肠型脂肪酸结合蛋白(i-FABP)水平;Western blot检测结肠组织通路蛋白NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠形体消瘦、大便稀溏、结肠组织可见黏膜溃疡、充血、扩张及炎症细胞浸润等病理损伤,DAI评分、结肠组织MPO、IL-1β及TNF-α含量、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达均升高(P<0.05),DAO和i-FABP含量均降低(P<0.05)。与模型组比较,白及多糖各剂量组及柳氮磺胺吡啶组大鼠DAI评分、结肠组织病理损伤程度、MPO、IL-1β及TNF-α含量、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达均降低(P<0.05),DAO和i-FABP含量均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性,高剂量白及多糖改善效果与柳氮磺胺吡啶相近(P>0.05)。结论:白及多糖可抑制NF-κB/NLRP3/caspase-1通路激活,降低炎症反应和肠屏障损伤,改善UC症状和肠黏膜损伤。

参芍口服液对糖尿病肾病大鼠肾脏NLRP3炎症复合体相关蛋白表达的影响

目的探讨参芍口服液对糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾脏核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症性复合体(以下简称NLRP3炎症体)表达的影响及对肾脏的保护作用。方法选择健康雄性Wistar大鼠45只,随机分为模型组、治疗组、对照组各15只。模型组、治疗组予一次性腹腔注射STZ制备DN模型,对照组腹腔注射等剂量的生理盐水。造模成功后,治疗组给予参芍口服液250 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均干预12周。各组大鼠干预12周后,以代谢笼收集24 h尿液,检测24 h尿量及尿蛋白定量(PRO),断尾取血测定血糖、血清Scr、血BUN。采用Masson染色法观察肾脏组织病理改变。采用免疫组化法检测肾脏组织NLRP3炎症体成分核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、IL-1β蛋白定性表达,采用Western blot法检测肾脏组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达量。结果治疗组、对照组血糖、24 h尿量、PRO、血Scr、血BUN均低于模型组(P均<0.05)。模型组肾小球中重度纤维化,系膜基质重度增生,基底膜明显增厚;治疗组病理改变较模型组明显减轻。模型组肾脏组织中NLRP3、Caspase-1及IL-1β的定性及定量表达均高于对照组及治疗组(P均<0.05)。结论参芍口服液可降低DN大鼠血糖水平、减轻肾脏纤维化、保护肾功能,其机制可能与降低肾脏组织中NLRP3炎症体相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达有关。

模式识别受体NLRC3的生物学效应及在免疫相关疾病中的研究进展

固有免疫系统是宿主抵御病原微生物攻击的第一道防线.可以快速识别并产生免疫反应,清除致病微生物.然而,强烈的免疫反应可能会导致过度炎症,甚至自身免疫性疾病.含胱天蛋白酶活化和募集结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体3(NLRC3)位于细胞质中,是固有免疫系统的重要负调节因子,可以抑制体内过度的免疫反应.NLRC3既能够通过影响核因子κB(NF-κB)和干扰素基因刺激因子(STING)相关信号通路,减少促炎细胞因子的产生;还能通过干扰含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性体复合体的组装和活性来抑制炎症反应.此外,还可以通过调控磷脂酰肌醇激酶3/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/mTOR)等通路影响细胞的代谢、增殖、凋亡等生物学行为.NLRC3对细胞功能的这些调控作用,与感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等多种免疫相关性疾病的发生发展密切相关,通过调控NLRC3的表达可能成为治疗这些疾病的一个有效途径.