慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中肺表面活性物质蛋白-C表达下降

目的探讨肺表面活性物质蛋白-C(SP-C)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中的作用。方法将大鼠随机分为对照组、香烟烟雾暴露组、脂多糖组和COPD组,每组10只。测定各组大鼠的PaO_2和PaCO_2的水平;透射电镜观察肺组织的细胞微观结构;ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织SP-C蛋白;RT-q PCR检测肺组织SP-C mRNA的表达。结果与其他组相比,COPD大鼠的PaO_2最低,而PaCO_2最高;肺泡Ⅱ型上皮细胞表面微绒毛明显减少(P<0.01);BALF和肺组织中SP-C蛋白表达下降(P<0.01);肺组织中的SP-C mRNA表达下降(P<0.01)。结论 SP-C在COPD大鼠肺组织中表达下调,这种下调可能引起肺通气和肺换气功能障碍。

支原体肺炎患儿血清中表面活性物质相关蛋白-C水平与肺功能的相关性

目的探讨支原体肺炎(MP)患儿血清中表面活性物质相关蛋白-C(SP-C)水平与肺功能的相关性。方法选择2015年1月至2016年12月驻马店市第一人民医院收治的MP患儿19例作为MP组,另选择同期体检健康儿童15例作为对照组,采用酶联免疫吸附试验检测2组儿童血清中SP-C水平;抽取左侧桡动脉血行血气分析,测定动脉血氧分压(PaO_2)和动脉血二氧化碳分压(PaCO_2);检测2组儿童第1秒用力呼气容积(FEV1)和用力肺活量(FVC),评估儿童肺通气功能;比较2组儿童血清SP-C水平、PaO_2、PaCO_2、FEV1及FVC,并分析MP组患儿血清SP-C水平与PaO_2、PaCO_2、FEV1、FVC的相关性。结果 MP组儿童PaO_2显著低于对照组(P<0.05);2组儿童PaCO_2比较差异无统计学意义(P>0.05)。MP组儿童FEV1、FVC及FEV1/FVC显著低于对照组(P<0.05)。MP组和对照组儿童血清SP-C水平分别为(3.92±0.13)、(6.43±0.11)mg·L^(-1),MP组儿童血清SP-C水平显著低于对照组(t=8.512,P<0.05)。MP患儿血清SP-C水平与PaO_2呈正相关(r=0.215,P<0.05),但MP患儿血清SP-C水平与PaCO_2无相关性(r=-1.012,P>0.05)。MP患儿血清SP-C水平与FEV1、FVC及FEV1/FVC均呈正相关(r=0.627、0.391、0.472,P<0.05)。结论 MP患儿外周血SP-C水平低于健康儿童,SP-C水平越低,肺功能障碍越严重。检测MP患儿外周血SP-C水平有助于临床医师判断MP患儿的肺损伤和肺功能情况。

骨髓间充质干细胞移植对大鼠肺纤维化的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（MSC）对博来霉素（BLM）所致大鼠肺间质纤维化治疗作用的可能机制。方法将54只雌性Wister大鼠按随机数字表法分为对照组、BLM组和MSC组，每组18只。对照组气管内注人生理盐水，BLM组气管内注入博来霉素，MSC组气管内注入博来霉素后，立即经尾静脉注入雄性大鼠MSC液0．5ml（细胞数为2．5×10^6个），分别于第7、14、28天各组均处死6只大鼠。检测MSC移植前的5-溴-2-脱氧尿苷（BrdU）标记率，留取肺组织行病理学检查，测定羟脯氨酸含量，采用双重免疫荧光法检测BrdU标记的MSC是否表达Ⅱ型肺泡细胞（ATⅡ）特异性标志物肺表面活性蛋白-C（SP-C）；RT-PCR法检测不同时期肺组织和骨髓中SP-CmRNA表达量，观察肺损伤后自身骨髓动员是否参与Ⅱ型肺泡细胞的修复。结果BrdU标记的MSC于48h终浓度为10μmoL／L时标记率〉98％，且传代细胞可连续标记。MSC组7、14、28d的肺组织冰冻切片中均可见到BrdU标记的MSC定位于肺组织并同时表达SP-C。28d时MSC组与BLM组肺纤维化程度评分分别为（2．17±0．26）分和（2．83±0．24）分，肺组织羟脯氨酸含量分别为（138±21）mg／g和（184±19）mg／g。肺组织中SP-CmRNA的表达量分别为0．98±0．15和0．59±0．14，且两组在不同时期骨髓中SP-CmRNA表达量均较对照组明显增加。结论骨髓间充质干细胞可定植于肺组织，并转化为Ⅱ型肺泡细胞，可阻止肺纤维化的进展，同时损伤诱导自身骨髓动员增强也参与修复过程。

Janus激酶／信号转导和转录激活因子3对重症急性胰腺炎大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的体外作用研究

目的探讨Janus激酶／信号转导和转录激活因子3（JAK／STAT3）信号转导通路在重症急性胰腺炎（SAP）肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用。方法用牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型，取血清备用。将经原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞随机分组，对照组加入不含SAP大鼠血清的Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）培养液；SAP组加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液；SAP＋AG490组用JAK激酶抑制剂AG490预处理细胞，加入含SAP大鼠血清的DMEM培养液。用电泳迁移率改变分析法（EMSA）检测STAT3活化状态；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测mRNA表达；蛋白质免疫印迹法（Westernblotting）检测蛋白水平；流式细胞技术检测肺泡表面活性物质相关蛋白C（SP—C）表达和肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡。结果与对照组比较，SAP组STAT3活性增强，STAT3 mRNA和蛋白表达均增强，SP—C蛋白表达下降（2hSP—C荧光指数0．69±0．02比1．02±0．03，P〈0．01），肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[（11．55±1．10）％比（5．30±0．36）％，P〈0．053；与SAP组比较，SAP＋AG490组STAT3活性减弱，STAT3mRNA和蛋白表达减弱，SP—C蛋白表达下降（2hSP—C荧光指数0．48±0．10比0．69±0．02，P〈0．01），肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡增加[（13．92±0．82）％比（11．55±1．10）％，P〈O．05]。结论提示JAK／STAT3信号转导通路参与了SAP肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的病理生理过程。