枸杞多糖LBP1C-2靶向钾离子通道β亚基-2活性结构域的探索

目的本研究旨在通过对LBP1C-2靶向Kvβ.2构效关系的探索,阐明LBP1C-2靶向Kvβ.2的活性结构域,为开发具有潜在抗早老痴呆活性的创新药物提供科学依据。方法枸杞多糖LBP1C-2经部分酸水解得到不同的结构片段后,对其进行单糖组成和分子量分析。通过蛋白芯片挑选出潜在靶蛋白,再用表面等离子体共振(SPR)技术验证各结构片段的靶向性。蛋白质免疫印迹以及细胞免疫荧光测试验证其生物学功能。结果通过HuProtTM人类蛋白质组芯片高通量筛选到LBP1C-2的潜在靶蛋白Kvβ.2。SPR实验表明LBP1C-2与Kvβ.2蛋白有较强结合,其结合常数KD为1.9×10^(-7) M。而LBP1C-2的化学降解后各结构片段与靶蛋白Kvβ.2有不同强度结合。其中含鼠李糖和半乳糖醛酸摩尔比为1:1的片段LBP1C-2-1I(18.1kDa)与原多糖LBP1C-2对Kvβ.2结合强度相近为3.3×10^(-7) M。对LBP1C-2-1I结构解析表明其有1,2-Rha与1,4-GalA交替连接组成。而该片段对应的酸水解外液部分LBP1C-2-1O与Kvβ.2也有结合,但与其他片段与该蛋白解离相比,更容易解离。从BV2小胶质细胞中敲减KCNAB2基因(Kvβ.2)后,BV2细胞中Aβ的降解被抑制,表明蛋白Kvβ.2可能是早老痴呆发生发展中的一个功能蛋白。结论LBP1C-2靶向Kvβ.2的主要活性结构域为1,2-Rha与1,4-GalA交替连接组成的主链核心骨架结构。本研究为深化了解LBP1C-2潜在的抗早老痴呆活性提供了重要线索,为基于枸杞多糖抗早老痴呆靶向性药物的设计和开发提供了证据。

离子液体处理对煤微观活性结构的影响

利用X线衍射(XRD)、拉曼光谱(Raman)和红外光谱(FTIR)研究离子液体1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([EMIm]BF4)和1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([BMIm]BF4)对煤中微观活性结构的溶解破坏作用。研究结果表明:离子液体处理煤中的矿物质质量分数降低,芳香层片直径减小,说明离子液体能够溶解除去煤中部分无机矿物质,并对微晶结构的脂族侧链有溶解破坏作用;[BMIm]BF4处理煤的结构有序程度提高,侧链支链等无序结构减少;离子液体处理煤中活性较高的羟基、醚氧键含氧类官能团和甲基、亚甲基脂肪烃类官能团的总体质量分数降低,芳环类C—H基团和C=C基团的活性也减弱。[BMIm]BF4对煤中各类微观活性结构的溶解破坏作用要明显强于[EMIm]BF4的破坏作用。

神府煤孔隙特征及活性结构对自燃的影响研究

利用压汞法和傅立叶红外光谱分析技术,对研究较少的神府煤样进行了测试与分析。结果表明,孔隙结构会影响煤样自燃的难易,但并不能以此判断煤样是否易燃,还要取决于煤表面活性结构的种类和数量;煤氧复合反应中,早期参与反应的活性基团主要有羟基、甲基、亚甲基及酚醇醚酯的碳氧键等活性结构;含氧官能团在SW煤样的氧化过程中起了较大的作用,说明活性结构在煤氧反应中影响较大,其中含氧官能团在煤炭自燃过程中起着关键性作用。

人肝再生增强因子CXXC活性结构的研究

人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)蛋白序列中有一段保守的Cys-Xaa-Xaa-Cys(CXXC)氨基酸序列,针对hALRp的CXXC结构,对hALR分别进行C65A和Q88C突变,表达、纯化突变体蛋白。体外检测hALRp和突变体的黄素腺嘌呤二核苷酸(flavinadenine dinucleotide,FAD)辅助的巯基氧化酶活性,hALR-FAD和hALRQ88C-FAD组与对照组比较有显著差异(P<0.05),hALR-FAD和hALRQ88C-FAD组之间无差异;hALRC65A-FAD组与对照组比较无差异。结果显示,通过C65A突变将CXXC结构破坏后,该突变体的巯基氧化酶活性完全丧失;通过Q88C突变增加一个CXXC序列后,该突变体的巯基氧化酶活性较hALR-FAD未见明显增加;同时,FAD不仅是hALRp发挥巯基氧化酶活性必须的辅助因子,而且有助于hALRp突变体蛋白的复性。

单活性结构域T7核酸酶Ⅰ的制备及性质研究

T7核酸酶Ⅰ(T7EⅠ)是一种能特异识别并拆分重组中间体Holliday Junction(HJ)的多功能核酸酶,该酶不仅能特异识别和拆分HJ,而且能随机切刻双链DNA,特异识别并切割双链DNA中的切刻和单碱基错配位点.构建了两种原核表达载体用于表达MBP和His-tag融合的两种T7EⅠ突变体,MBP-T7EⅠ(E20K)和His6-T7EⅠ(E65K).每一种融合蛋白形成的同源二聚体不具有核酸酶活性,通过共表达或两种蛋白质共变性复性、双标签亲和纯化,最终获得具有单个活性结构域的T7EⅠ异源二聚体(T7EⅠ-SAD).以pUC(AT)和pUC19为底物测试T7EⅠ-SAD的HJ拆分活性、随机切刻活性和切刻位点切割活性,结果显示,T7EⅠ-SAD可特异识别并切刻HJ结构,但丧失了同时引入两个切刻位点的能力,其对pUC(AT)的特异切刻活力和对pUC19的随机切刻活力与野生酶相当.逐级变性梯度洗脱实验显示,T7EⅠ-SAD的稳定性与野生型酶接近,二聚体解离需要5.0～6.0mol/L尿素或1.75～2.0mol/L盐酸胍;凝胶阻滞实验表明T7EⅠ-SAD具备与HJ结构特异结合的能力.为具有细胞毒性蛋白的表达提供了一种新策略,同时提供了一种简便直观的蛋白质二聚体稳定性测试方法.

氧化铝包覆层对甲烷燃烧反应钯催化剂活性结构的稳定作用

甲烷具有高的温室效应,因此天然气应用过程尾气中甲烷的消除是一个迫切和亟待解决的环境问题1。Pd基催化剂广泛应用于催化甲烷燃烧反应,并且表现出显著的结构敏感性2。实验和理论计算研究结果均表明Pd-PdOx界面表现出最高的催化甲烷燃烧活性3,4。但是,在强放热甲烷燃烧反应氛围下,PdOx相易高温分解为金属Pd相,从而降低Pd基催化剂活性5。PdOx相高温不稳定性在天然气汽车的废气处理会产生严重的影响。汽车运行过程中多变的操作环境会导致废气处理催化剂工作温度的骤升骤降,高温下PdOx相的分解和低温下金属Pd相较慢重新氧化会导致Pd基催化剂催化甲烷燃烧活性的急剧衰减。

负载Ru催化剂金属表面活性结构的研究

运用原位FT-IR 光谱和TPSR-MS 等技术研究了负载Ru 催化剂的金属表面状态.结果表明催化剂中存在二类静态活性中心:(1)体现金属Ru 本征特性的S_1中心,(2)金属与载体相互作用而产生的S_2中心.在吸附CO 及其加氢反应过程中,S_1中心上处于边、角、棱位置等配位不饱和的金属Ru 原子或原子簇经CO 剥蚀而产生的动态S_3活性中心.CO 在S_1中心上以Ru^(?)CO线式态吸附的,其IR 谱带位于1980～2060cm^(-1)之间.Ru^(?)-CO 在H_2流中进行程序升温加氢反应的TPSR-MS 图上出现450K 左右的低温甲烷峰.焙烧温度升高,则在TPSR-MS 谱图上出现两个甲烷峰,600±50K 的高温甲烷峰归属为S_2中心上以Ru^(δ+)-CO 线式态吸附CO 加氢所致.IR 谱图中的2075±50cm^(-1)峰代表Ru^(δ+)-CO.IR 谱中2135±5和2075±5cm^(-1)这对峰的出现反映了S_3中心的形成.

含辣素活性结构的苯甲酰胺衍生物的合成、抑菌及海洋防污性能

以N-羟甲基苯甲酰胺和含酚羟基的芳香化合物为原料,合成了4种含辣素活性结构的苯甲酰胺衍生物———N-(4-羟基-3,5-二甲基苄基)苯甲酰胺(HDDB)、N-(5-叔丁基-2-羟基苄基)苯甲酰胺(THBHB)、N-(5-甲基-2-羟基苄基)苯甲酰胺(HMBB)和N-(6-甲基-5-羟基-1,3-苯并二氧杂戊环)苯甲酰胺(HBOMB),通过红外光谱(IR)和核磁共振氢谱(1HNMR)进行了结构表征。抑菌实验结果表明,合成的化合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有良好的抑制作用,其中HBOMB对两种菌的最小抑菌质量浓度可达0.062 5 g/L和0.125 0 g/L。将化合物作为防污剂制备成防污涂料,120 d的实海挂板只有少量污损生物附着。

依那西普抗体的活性结构保护

采用Gromacs软件,利用分子动力学模拟方法,研究了在真空干燥及水溶液环境下,抗体蛋白药物依那西普在不同保护剂体系中分子结构的稳定性。通过分析依那西普的结构变化以及抗体蛋白与保护剂之间的相互作用,采用单因素方差法,给出了不同保护体系与抗体蛋白之间的差异。结果表明,海藻糖–甘露醇复合保护体系和蔗糖–甘露醇复合保护体系对抗体蛋白的稳定效果明显优于海藻糖单一保护体系,其中海藻糖–甘露醇复合保护体系对依那西普抗体蛋白活性结构的保护效果最好。这说明不同的小分子保护剂可以协同保护蛋白药物的活性结构,溶剂化环境对于抗体蛋白的稳定性具有显著影响,而真空冷冻干燥可以提高其结构的稳定性。

用NMR法分析胰岛素的新型活性结构

美国哈佛大学医学部Q.X.Hua小组用核磁共振法(NMR)测定人胰岛素及其衍生物在溶液中的结构,并发现胰岛素并非是目前由x线结晶分析确定的结构(闭锁型,结合于受体),而是由非闭锁型起作用。Hua等推测:天然型结合于受体时在某种作用下变化成非闭锁型,受体结合部位为A链的N末端的2个疏水基。目前,x线结晶分析不能观察这种非闭锁型的结构。胰岛素的结构含21个氨基酸残基的A链和30个残基的B链,由2个二硫链搭接而成。

依那西普融合蛋白二聚体在真空和水溶液中活性结构稳定性的拉伸模拟方法研究

目的研究单克隆抗体依那西普融合蛋白二聚体在不同状态下的动力学稳定性和热力学稳定性,为其活性保护的研究奠定基础。方法利用Gromacs 4.6分子模拟软件和Amber99sb-ildn分子力场以及拉伸模拟和伞状采样的方法,获取依那西普抗体蛋白的解离自由能和解离拉力的变化。结果研究结果表明,依那西普抗体蛋白在真空中的解离自由能是在水溶液中的10.05倍,其在真空中解离的平均作用力是在水溶液中的3.03倍。溶剂化环境对于抗体蛋白的稳定性具有显著的影响,而真空冷冻干燥可以提高其结构的稳定性。结论拉伸模拟过程中,最大拉力简单易得,且影响因素少,可以用最大拉力表征抗体蛋白二聚体的活性结构稳定性。

铁基超细粒子催化剂的F-T反应性能研究——Ⅰ.Fe-Mn催化剂的反应性能、活性相结构及锰的作用

由复合物控制降解法制得的Fe-Mn超细粒子催化剂同时具有高的CO转化率和较高的低碳烯烃选择性,并能一定程度地抑制甲烷和高沸点烃的生成。反应初期催化剂的活性相是在不断变化的,导致了F-T活性和选择性随反应时间的不断改变。类尖晶石相(Mn_xFe_(3-x)O_4)是高转化率条件下稳定的F-T活性相。在稳态条件下,Mn主要以MnCO_3形式存在,它与铁物相紧密接触可以显著提高低碳烯烃选择性和降低甲烷选择性。

活性炭结构对卷烟主流烟气化学成分吸附效率的影响

为考察活性炭表面结构特性对卷烟主流烟气化学成分吸附效率的影响,分析了5种结构特性不同的活性炭对卷烟主流烟气中挥发性羰基物、酚类化合物、5种挥发性有机化合物(1,3-丁二烯、异戊二烯、丙烯腈、苯、甲苯)和香味成分的吸附效率。结果表明:①吸附效率主要与活性炭的比表面积有关,在用量一定的情况下,烟气成分的吸附效率随活性炭比表面积的增加而增大;②微孔(r<2 nm)含量高的活性炭滞留小分子的能力强,对乙醛、1,3-丁二烯和异戊二烯等小分子化合物的吸附效率较高;同时微孔含量高的活性炭传质阻力大,对酚类的吸附较少,适当增加中孔会增加大分子化合物的吸附效率。③吸附效率与化合物的分子量和沸点有关:挥发性羰基物和5种挥发性有机化合物的吸附效率随化合物分子量和沸点的升高呈升高趋势;酚类化合物的吸附效率明显低于挥发性羰基物和5种挥发性有机化合物的吸附效率,且二元酚的吸附效率低于一元酚的吸附效率;同类香味成分的吸附效率随化合物分子量和沸点的升高呈下降趋势。

芳烃类有机物结构与活性相关的模式参数研究

从理论上探讨有机物生物活性效应的相关模式，选用７种典型分子表征参数，对４７种芳香烃类有机物的大型（Ｄａｐｈｎｉａｍａｇｎａ）毒效应（ＥＣ５０、ＬＣ５０）进行相关分析。结果表明，芳烃类有机物分子对生物活性的影响为：疏／亲水性＞电性效应＞空间效应。实验给出了多元优化回归方程。

抗艾滋病药物环尿素类化合物的结构表征及其生物活性的定量预测

提出一种新的结构描述子———按氢分类的电距矢量 (H MEDV) ,并用于环尿素类化合物抗人类免疫缺陷病毒(humanimmuno deficiencyvirus,简称HIV)活性预测 ,籍以多元线性回归 (MLR)建立了H MEDV与活性之间的相关模型 ,取得了良好的结果 ,相关系数达R =0 .971.另外采用逐步回归 (SMR)从原模型参数中选取了 5个参数建立一新模型 ,其模型相关系数为R =0 .938;继以留一法 (Leave one out,LOO)进行交互检验 ,相关系数与之接近 ,R =0 .90 8;说明了定量结构活性相关模型具有很好的稳定性和预测能力 .

胜利褐煤焦钙催化水蒸气气化反应中活性微结构分析

针对胜利褐煤焦水蒸气气化反应过程中钙组分的催化作用,在脱除矿物质胜利褐煤煤样SL^+中添加CaO在1 100℃热解得到添钙煤焦样品Ca-J,Ca-J经盐酸处理脱除其游离钙组分,得到添钙焦酸洗煤样Ca-J^+,采用BET、SEM-EDS、XRD、FT-IR及XPS等技术对所制备煤样进行表征,并在微型固定床反应装置上进行水蒸气气化反应性测试,对煤样微结构特性进行研究,提出了钙催化水蒸气气化反应中的活性微结构模型。结果表明,水蒸气气化反应中,添钙焦样酸洗前后的Ca-J和CaJ^+碳转化率及反应活性指数基本相同,但比酸洗煤焦样SL^+-J高出许多。样品XPS的Ca2p谱图分峰说明,Ca-J^+中存在Ca(CH_3COO)_2与Ca-OOR两种化学形态的钙。化学分析及SEM-EDS表征均表明,Ca-J^+中钙含量比Ca-J减少了97%以上;XRD表明,Ca-J中游离存在的CaS、CaO经酸洗被脱除;FT-IR表明,Ca-J及Ca-J^+中含有C=O、C-O等特征吸收峰。综合上述结果,可推测"R-O-Ca-O-R'"(R及R'可为脂肪族或芳香族结构体)是钙组分催化胜利褐煤焦水蒸气气化的活性微结构。

取代联苯的定量结构活性相关及联合毒性研究

测定了 18种取代联苯对大型蚤 (Daphniamagna) 2 4h的单一毒性 (2 4h EC50 )及其混合物联合毒性 .对单一毒性进行了定量结构活性相关 (QSAR)分析 ,建立了辛醇 水分配系数 (lgKow)模型 ,理论线性溶剂化能相关 (TLSER)模型及量子化学参数模型 ,表明量子化学参数模型能很好地预测取代联苯的单一毒性 .混合物联合毒性研究表明 ,取代联苯的联合毒性机制为浓度相加效应 ,并且根据浓度相加预测了混合物半数抑制浓度 (EC50mix) ,预测值与实验值非常吻合 .

生物活性多糖结构与功效关系的研究进展

生物活性多糖具有抗肿瘤、抗病毒、降血糖、降血脂等多种生物功能 ,其功能与结构密切相关。多糖结构与功能关系的研究已经成为人们关注的一个热点。

偶氮染料对斜生栅藻的毒性作用及结构活性相关性研究

为了揭示不同结构染料对水生生态系统的毒性作用，研究９种偶氮类及２种蒽醌类染料对斜生栅藻（Ｓｃｅｎｅｄｅｓｍｕｓｏｂｌｉｑｕｕｓ）的生长抑制作用，并通过剖析毒性与结构之间的相关关系，探讨了偶氮染料的毒作用机理．１１种染料对斜生栅藻的４８ｈＥＣ５０在１．０９—４１．２２ｍｇＬ－１之间．偶氮染料分子中所包含偶氮键的个数及芳香环上取代基的亲水性和电性均影响染料的毒性．进一步证实偶氮染料的毒作用机理为ＮＮ键还原为—ＮＨ２后，形成Ｎ离子活性形式与生物大分子发生结合．