足细胞骨架相关蛋白的调节及其在细胞生物学中的作用

肾小球血管上皮细胞,也称足细胞,是一种特殊终末分化细胞。足细胞可分为：细胞体,初级突起,足突。微管和中间丝构成足细胞体和初级突起的支架。微丝则是足突的细胞骨架。微丝在同一个足细胞的相邻足突间形成一个高的拱状袢,在袢的弯曲处,微丝连接于初级突起的中间丝和微管上[1]。

活性调节细胞骨架蛋白在颞叶癫痫形成及其认知损害中的作用

颞叶癫痫是难治性癫痫的代表,突触可塑性内在分子机制被认为是颞叶癫痫发病机制及颞叶癫痫所致认知功能损害的核心和基础。活性调节细胞骨架蛋白(Arc)是一效应即早基因,新近发现它在突触可塑性、记忆巩固以及稳态中起到核心作用。神经活性刺激不但诱导Arc迅速产生,且诱发其移动、积聚于被激活神经元的树突,特定蓄积于突触活性位点,从而使其蛋白表达产物定位于刺激到达部位。目前有关Arc与颞叶癫痫发生及认知功能损害的研究尚属空白。

活性调节细胞骨架蛋白在癫痫突触可塑性中的作用

癫痫的发病机制复杂,目前对其研究主要集中在突触可塑性方面。活性调节细胞骨架蛋白(Arc)是即早基因的一种效应子。其编码的mRNA在神经活性刺激下迅速表达,翻译后的蛋白产物能移动、积聚于被激活神经元的突触,特定蓄积于突触活性位点,使其蛋白表达产物在活化的突触部位起作用,使突触可塑性发生持久性改变,因此,Arc mRNA/蛋白的树突定位是突触可塑性的基础。Arc参与突触可塑性需要多种受体共同参与,但在这方面研究尚属空白。

活性调节的细胞骨架蛋白在神经突触可塑性中的作用

活性调节的细胞骨架蛋白(Arc)是一种即刻早基因,在突触可塑性、突触稳态及记忆巩固中起到重要作用。Arc被神经活性诱导产生,其mRNA被迅速运输到被激活的神经元的树突,其蛋白表达产物定位于被刺激的部位,参与神经元突触可塑性的调节,被认为是依赖蛋白质合成的突触可塑性的主要调节因子。

应激损害吗啡奖赏记忆再巩固及其对海马CA1脑区活性调节细胞骨架蛋白(Arc)表达的影响

目的:观察应激是否损害吗啡奖赏记忆再巩固及其对海马活性调节细胞骨架蛋白(Arc)的影响。方法:(1)建立大鼠吗啡条件位置偏爱(conditioned place preference,CPP)模型,给予不同的处理即暴露、应激、暴露后立即应激,观察应激对吗啡奖赏记忆再巩固的作用。(2)建立吗啡CPP模型,暴露6 h后应激,观察应激损害吗啡奖赏记忆再巩固是否存在时间窗。(3)处理测试后的大鼠断头取脑,采用免疫荧光法和Western blot法分析应激对吗啡CPP大鼠海马Arc表达的影响。结果:(1)吗啡奖赏记忆唤起后立即给予应激,其再巩固受到损害(P<0.05)。(2)应激损害吗啡奖赏记忆再巩固作用存在时间窗(P<0.05)。(3)暴露后给予应激组大鼠在CPP测试后海马CA1脑区中的Arc表达下降(P<0.05)。结论:(1)应激可损害吗啡奖赏记忆再巩固,且其作用具有时间窗。(2)应激损害吗啡记忆再巩固可能与其降低海马CA1脑区的Arc表达有关。

磁刺激对小鼠海马原代神经元即刻早期基因和细胞骨架蛋白表达的影响

目的：观察磁刺激对小鼠海马原代神经元c-fos、活性调节的细胞骨架蛋白（Arc）和微管相关蛋白2（MAP2）的表达及神经元突起生长的影响，探讨磁刺激对细胞突起生长的影响机制。方法：体外培养的海马原代神经元，分为对照组，假刺激组，20％（20％强度组）、30％（30％强度组）、40％最大刺激强度组（40％强度组），24h后开始刺激，频率1Hz，最大输出强度3．7T。连续刺激5d后应用荧光显色检测c-fos、Arc和MAP2阳性神经元免疫荧光强度，计数MAP2阳性神经元多突起神经元个数及细胞突起长度，并应用免疫印迹和RT-PCR技术对免疫荧光显色结果进行验证。结果：磁刺激能促进小鼠海马原代神经元突起数目和长度的生长，3个强度组多突起神经元（n≥2）占总神经元的比例以及海马原代神经元突起长度均高于对照组，且30％强度组高于20％、40％强度组，结果有统计学意义。免疫荧光显色30％强度组c-fos阳性神经元比例、Arc和MAP2免疫荧光强度高于相关对照组，差异有统计学意义。免疫印迹和RT-PCR结果同免疫荧光显色结果一致。结论：磁刺激能促进体外培养的海马原代神经元突起生长，其机制可能和c-fos、Arc和MAP2的表达上调有关。

肺表面活性物质相关蛋白A的免疫调节功能

肺表面活性物质相关蛋白A(SP A)是肺表面活性物质相关蛋白中最重要的成分之一。作者概述了SP A的分子结构与免疫的关系 ,以及对微生物、炎症细胞、炎症介质和抗体等的作用 ,提示SP A具有广泛的免疫调节功能。

沉默信息调节因子2相关酶3调控机制及其在奶牛乳腺炎中的作用

沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性去乙酰化酶Sirtuin的家族成员,SIRT3主要调控细胞代谢、生物合成、细胞凋亡及氧化应激等方面。本文主要综述了SIRT3与核因子-κB(NF-κB)、单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)、非酯化脂肪酸(NEFA)和活性氧(ROS)通路的调控机制以及SIRT3在奶牛乳腺炎中的作用,以期为奶牛乳腺炎的靶向治疗提供理论支撑。

肺表面活性物质相关蛋白A、D与临床应用研究

肺表面活性物质（pulmonary surfactant,PS）为磷脂蛋白复合物,其中磷脂约占90%,肺表面活性物质相关蛋（surfactant-associatein,SP）占8%-10%。SP包括亲水性的SP-A、SP-D和疏水性的SP-B、SP-C [1], SP-A、SP-D共同发挥宿主的免疫防御和免疫调节功能。本综述主要讲述SP-A、SP-D的结构功能及其临床应用。

活性调节细胞骨架蛋白mRNA在大鼠岛叶电点燃模型海马中的表达

目的 探讨电点燃和单一电刺激大鼠岛叶模型Arc mRNA在海马中的表达及意义.方法 雄性SD大鼠随机分为点燃组、单一电刺激组、假手术组和正常对照组,每组按时间点分两个亚组.点燃组：建立电刺激岛叶慢性癫痫模型,按时间点实验后断头取脑,应用RT-PCR进行海马Arc mRNA的检测 应用原位杂交进行齿状回Arc mRNA的检测 单一电刺激组：只刺激两次,余同点燃组 假手术组只是不行点燃刺激,余同点燃组 正常对照组不给予手术干预.结果 单一电刺激组、假手术组和空白对照组在3 h时Arc mRNA表达（A值/A值）分别为0.72±0.14,0.75±0.16,0.71±0.14,显著低于点燃组海马组织中Arc mRNA的表达1.78±0.43（P＜0.01）,6 h时4组间Arc mRNA表达差异无统计学意义（P＞0.05） 原位杂交细胞计数显示：点燃后3 h Arc mRNA的表达为（112.8±6.0）个,显著高于单一电刺激组、假手术组和空白对照组Arc mRNA的表达,分别为（46.25±4.35）个,（45.25±6.23）个,（44.75±6.49）个（P＜0.01）,6 h时4组间Arc mRNA表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 岛叶癫痫发作可引起海马Arc mRNA表达增加 突触可塑性在岛叶癫痫中起着重要作用.

黄芪多糖对小鼠免疫细胞信号转导相关分子的影响

为探讨黄芪多糖(APS)免疫调节的作用机理,观察了黄芪多糖对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)生成、对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞内游离钙离子水平和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。结果显示黄芪多糖能明显促进小白鼠腹腔巨噬细胞NO生成,显著升高小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子的水平,引起细胞PKC活性明显升高。提示黄芪多糖通过NO介导信号传递通路,调节脾淋巴细胞内游离钙离子的浓度,升高细胞蛋白激酶活性而影响机体免疫细胞的信号转导,发挥其免疫调节作用。

糖尿病大鼠皮肤组织表皮细胞增殖相关事件的研究

目的研究糖尿病大鼠皮肤组织中表皮细胞的增殖改变及其可能机制。方法12只SPF级SD大鼠随机分为糖尿病组(6只)和正常对照组(6只),糖尿病大鼠以STZ诱导。成模后8周,二组同时采集背部皮肤,观察表皮的组织学特征;流式细胞术检测表皮细胞的细胞周期;Westernblot检测细胞增殖调节因子cyclinD1、cyclinB1和cdk4的表达水平,并测定表皮细胞丝裂期促进因子(MPF)的组蛋白激酶活性。结果与正常组相比,糖尿病大鼠表皮结构欠清晰,部分表皮缺乏复层排列,表皮细胞数量明显减少,表皮层厚度明显变薄;S期和G2/M期表皮细胞百分比均显著降低(P<0.01,P<0.05);糖尿病组cdk4的表达水平显著低于正常组(P<0.05),两组间cyclinD1、cyclinB1表达无显著差异(P>0.05);糖尿病组表皮细胞MPF活性显著降低(P<0.01)。结论糖尿病大鼠皮肤表皮细胞处于明显增殖抑制状态,这种增殖抑制可能与cdk4的低表达和MPF活性下降有关。

活性调节细胞骨架蛋白与岛叶点燃大鼠学习记忆的关系

目的 检测活性调节细胞骨架蛋白（Arc）在模型大鼠海马组织中的表达,探讨Arc与岛叶点燃大鼠学习记忆的关系.方法 成年SD大鼠随机分为模型组、假手术组和空白对照组.应用避暗试验检测各组大鼠学习记忆功能.采用免疫组化、Western blot检测不同时间点Arc蛋白在海马组织中表达水平,运用RT-PGR检测其基因表达水平.结果 慢性电点燃成功后第1天（即点燃0周）,点燃组、假手术组及空白对照组学习记忆能力差异无统计学意义（P＞0.05）.点燃2周：潜伏期（LT）（48.87±3.42）s,穿梭次数（EN）（2.75±0.99）次.点燃3周：LT为（48.71±2.77）s,EN为（2.75±1.15）次.点燃2周、3周与0周相比学习记忆功能增强（P＜0.05）.点燃4周与0周组比学习记忆功能明显下降（P＜0.05）.Arc在各组内蛋白及基因的表达均在1 h开始增加,6 h达到高峰,12 h恢复到基线水平.组间对比,2-3周内峰值最高,上升幅度明显（P＜0.01）,4周峰值及幅度明显下降（P＜0.05）,假手术组、空白对照组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 岛叶电点燃大鼠学习记忆功能及Arc在海马中表达变化趋势一致.Arc与岛叶点燃大鼠学习记忆功能密切相关.

石杉碱甲对电休克模型大鼠海马磷酸化细胞外调节蛋白激酶及活性调节的细胞骨架联合基因活性的影响

目的观察石杉碱甲对电休克模型大鼠海马磷酸化细胞外调节蛋白激酶（P-ERK）、活性调节的细胞骨架联合基因（ARC）活性的影响。方法大鼠随机分为假电休克对照组和电休克组，再随机分为生理盐水对照组（CS组、ES组）和石杉碱甲组（CH组、EH组）。第1～17天行生理盐水或石杉碱甲灌胃；第8～17天给予假电痉挛刺激或电痉挛刺激；第18天行水迷宫定位航行实验；然后各组大鼠随机取6只处死取海马用Western blot法检测P-ERK蛋白、ARC活性。结果CS组与CH组的潜伏期无显著性差异（P〉0．05）。ES组的潜伏期显著长于CS组（P〈0．01）。EH组潜伏期与CH组无显著性差异（P〉0．05），ES组潜伏期长于EH组（P〈0．05）。CS组与CH组的P-ERK／2、ARC蛋白表达水平达水平无显著性差异（P〉0．05）。ES组的P-ERK1／2、ARC蛋白表达水平显著低于CS组（P〈0．01）。EH组P-ERK1／2、ARC蛋白表达水平与CH组无显著性差异（P〉0．05）；ES组P-ERK1／2、ARC蛋白表达水平低于EH组，差异有显著性（P〈0．05）。结论石杉碱甲能减轻电休克模型大鼠记忆损害，其机制可能与海马P-ERK、ARC的活性增加有关。

TTF-1相关蛋白26磷酸化位点对人SP-B基因表达的影响

目的探讨甲状腺转录因子-1相关蛋白26(TAP26)对人肺表面活性蛋白-B(hSP-B)基因表达的调控机制。方法采用定点诱变PCR技术,分别突变掉TAP26的4个磷酸化位点(S48,S66,T219和T167S168),并获得TAP26的4个相应突变体;通过体外细胞共转染和荧光素酶报告基因活性值检测技术分别检测上述4个突变体对hSP-B基因启动子活性的影响。结果与野生型TAP26比较,突变体质粒TAP26(T167S168→V167A168)、TAP26(S48→A48)和TAP26(T219→V219)分别与hSP-B基因启动子共转染后所测荧光素酶活性值无明显差异(P>0.05);而当DNA浓度为400 ng的突变体质粒TAP26(S66→A66)与hSP-B基因启动子共转染后所测荧光素酶活性值则明显降低(P<0.05)。结论突变体质粒TAP26(S66→A66)不能促进hSP-B的表达,从而TAP26的S66蛋白激酶C(PKC)位点是TAP26移位到细胞核的重要部位。

第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因及其相关蛋白在肿瘤发生发展中的作用

肿瘤是目前危害人类健康的最严重的一类疾病。肿瘤从本质上来说是基因病。各种环境和遗传因素可能以协同或序贯的方式引起细胞非致死性的DNA损害,从而激活原癌基因或（和）灭活肿瘤抑制基因,加上凋亡调节基因的改变,使细胞发生转化，导致肿瘤的发生。第10号染色体缺失性磷酸酶一张力蛋白同源物基因（PTEN）是1997年发现第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因，是继P53和Rb基因之后又一个重要的抑癌基因。本文就PTEN及其相关蛋白在肿瘤发生发展中的关系作一综述。

梅花鹿鹿茸总蛋白对糖尿病肾病大鼠肾损伤的治疗作用及分子机制

目的探讨梅花鹿鹿茸总蛋白提取物(SVPr)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的治疗作用及分子机制。方法将120只Sprague Dawley大鼠按照简单随机数字表法分为对照组、模型组、二甲双胍组、低剂量SVPr组、中剂量SVPr组、高剂量SVPr组,每组20只。模型组、二甲双胍组、低剂量SVPr组、中剂量SVPr组、高剂量SVPr组大鼠造模前禁食12 h,单次腹腔注射链脲佐菌素50 mg•kg^(-1)制备DN大鼠模型;造模成功后,二甲双胍组大鼠给予二甲双胍500 mg•kg^(-1)•d^(-1)灌胃,低剂量SVPr组、中剂量SVPr组、高剂量SVPr组大鼠分别经尾静脉注射质量浓度为1.47、2.94、4.41 g•L^(-1)的SVPr溶液0.1 mL,对照组及模型组大鼠注射等量生理盐水,每日1次,持续给药4周。采用生物化学法检测各组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血糖、24 h尿蛋白水平,酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠肾组织中活性氧(ROS)、核因子-κB(NF-κB)水平,Western blot法检测各组大鼠肾组织中沉默调节蛋白1(SIRT1)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白相对表达量。结果模型组大鼠BUN、SCr、24 h尿蛋白、血糖水平均显著高于对照组(P<0.05);低剂量SVPr组、中剂量SVPr组、高剂量SVPr组和二甲双胍组大鼠BUN、SCr、24 h尿蛋白、血糖水平显著低于模型组(P<0.05);高剂量SVPr组大鼠SCr、24 h尿蛋白水平显著低于二甲双胍组(P<0.05),高剂量SVPr组与二甲双胍组大鼠BUN、血糖水平比较差异无统计学意义(P>0.05);中剂量SVPr组大鼠SCr水平显著低于二甲双胍组,BUN、血糖水平显著高于二甲双胍组(P<0.05);中剂量SVPr组与二甲双胍组大鼠24 h尿蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05);低剂量SVPr组大鼠BUN、24 h尿蛋白、血糖水平显著高于二甲双胍组(P<0.05),低剂量SVPr组与二甲双胍组大鼠SCr水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量SVPr组大鼠BUN、血糖、24 h尿蛋白、SCr水平显著低于中剂量SVPr和低剂量SVPr组,中剂量SVPr组BUN、血糖、24 h尿蛋白、SCr水平显著低于低剂量SVPr组(P<0.05)。模型组大鼠肾组织中ROS、NF-κB水平显著高于对照组(P<0.05);低剂量SVPr组、中剂量SVPr组、高剂量SVPr组和二甲双胍组大鼠肾组织中ROS、NF-κB水平显著低于模型组(P<0.05);高剂量SVPr组大鼠肾组织中ROS、NF-κB水平显著低于二甲双胍组(P<0.05);中剂量SVPr组大鼠肾组织中ROS水平显著高于二甲双胍组(P<0.05),中剂量SVPr组与二甲双胍组大鼠肾组织中NF-κB水平差异无统计学意义(P>0.05);低剂量SVPr组大鼠肾组织中ROS、NF-κB水平显著高于二甲双胍组(P<0.05);高剂量SVPr组大鼠肾组织中ROS、NF-κB水平显著低于中剂量SVPr组和低剂量SVPr组;中剂量SVPr组大鼠肾组织中ROS水平显著低于低剂量SVPr组(P<0.05),中剂量SVPr组与低剂量SVPr组大鼠肾组织中NF-κB水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠肾组织中SIRT1、Nrf-2、HO-1相对表达量均显著低于对照组(P<0.05);低剂量SVPr组、中剂量SVPr组、高剂量SVPr组和二甲双胍组大鼠肾组织中SIRT1、Nrf-2、HO-1相对表达量显著高于模型组(P<0.05);高剂量SVPr组大鼠肾组织中SIRT1、Nrf-2相对表达量显著高于二甲双胍组(P<0.05),高剂量SVPr组与二甲双胍组大鼠肾组织中HO-1相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);中剂量SVPr组大鼠肾组织中SIRT1、Nrf-2相对表达量显著高于二甲双胍组,HO-1相对表达量显著低于二甲双胍组(P<0.05);低剂量SVPr组大鼠肾组织中SIRT1相对表达量显著高于二甲双胍组(P<0.05),低剂量SVPr组与二甲双胍组大鼠肾组织中Nrf-2、HO-1相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);高剂量SVPr组大鼠肾组织中SIRT1、Nrf-2、HO-1相对表达量显著高于中剂量SVPr组和低剂量SVPr组,中剂量SVPr组大鼠肾组织中SIRT1、Nrf-2、HO-1相对表达量显著高于低剂量SVPr组(P<0.05)。结论SVPr可通过上调SIRT1表达来抑制NF-κB转录活性、激活HO-1/Nrf-2抗氧化应激信号,减轻DN大鼠肾损伤。

血管紧张素Ⅱ对降钙素基因相关肽受体重构网络调节

血管紧张素Ⅱ受体（ANGIIR）和降钙素基因相关肽受体（CGRPR）同属于G蛋白藕联受体家族。研究发现，单独激活ANGIIR或CGRPR对血管平滑肌细胞（VSMC）起促增值或增生作用；同时或序贯激活两受体却抑制VSMC增殖或增生。目前已知，CGRP受体是由降钙素受体样受体（calcitonin receptor-like receptor CRLR）、受体活性修饰蛋白-1（receptor activity modifying protein RAMPl）、受体组分蛋白（receptorcomponentproteinRCP）三个组分组成。

SIRT1对低氧诱导肺动脉内皮细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨沉默信息调节因子1相关酶(SIRT1)对低氧诱导肺动脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法体外培养人肺动脉内皮细胞,将细胞分为8组:对照组、低氧组、SRT1720(SIRT1激动剂)组、EX-527(SIRT1抑制剂)组、低氧+SRT1720组、低氧+EX-527组、低氧+TEMPOL(mitoROS抑制剂)组和低氧+NAC(ROS抑制剂)组。正常组细胞置于正常细胞培养箱中培养,低氧模型细胞置于3%O2,5%CO_(2)低氧舱中处理24 h,其余组分别予SRT1720、EX-527、TEMPOL和NAC处理24 h后低氧处理。DHE和MitoSOX染色法检测细胞内及线粒体活性氧水平,试剂盒检测细胞MDA水平,免疫荧光法检测细胞沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)、核苷酸结合寡聚化片段结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、发动蛋白相关GTP酶(Drp1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)水平,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位水平,ELISA法检测细胞炎症因子IL-1β和IL-18水平,免疫印迹法检测细胞Gasdermin D(GSDMD)蛋白水平。结果与对照组相比,低氧组肺动脉内皮细胞的SIRT1蛋白表达降低(P<0.01),胞内ROS、mitoROS、MDA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Drp1蛋白表达和炎症因子IL-18和IL-1β水平均升高(P均<0.01),线粒体膜电位(MMP)水平、Mfn2蛋白表达均降低(P均<0.01)。与低氧组相比,低氧+SRT1720组、低氧+TEMPOL组和低氧+NAC组人肺动脉内皮细胞的SIRT1蛋白表达增加(P均<0.05),胞内ROS、mitoROS、MDA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Drp1蛋白表达和炎症因子IL-18和IL-1β水平均降低(P均<0.05),MMP水平、Mfn2蛋白表达均增加(P均<0.01);而低氧+EX-527组人肺动脉内皮细胞的胞内ROS、mitoROS、MDA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Drp1蛋白表达和炎症因子IL-18和IL-1β水平均升高(P均<0.05),MMP水平、Mfn2蛋白表达均降低(P均<0.05)。结论SIRT1可通过抑制线粒体ROS的形成和NLRP3介导焦亡发生,对低氧诱导肺动脉内皮细胞损伤有保护作用。

急性放射性肺损伤肺表面活性物质相关蛋白A的表达及视黄酸的调节作用

放射性肺损伤是核辐射事故、骨髓移植预处理及胸部肿瘤放射治疗后常见的并发症，发生率为5％～10％，目前发病机制不清，治疗无特效方法。防治放射性肺损伤是胸部肿瘤放射治疗研究的热点之一。视黄酸是维生素A的衍生物，先前我们的研究结果表明视黄酸能减弱肿瘤坏死因子仅（TNF—α）对肺泡上皮细胞的损伤，也有学者报道视黄酸能促进肺泡修复。