生物活性跟踪分离法筛选当归挥发油中的有效成分

目的:筛选当归挥发油中对主动脉血管有舒张作用的有效成分。方法:采用细胞膜色谱法(CMC)筛选、高效液相色 谱法分离,并结合离体药理实验确定当归挥发油中的有效成分。结果:在当归挥发油中分离出对主动脉血管有舒张作用 的2种有效成分。结论:化合物在血管CMC模型上的保留特性和其药理作用有显著的相关性。

小球藻热水提取物功能成分的活性跟踪分离

本研究旨在以自由基清除作用和促巨噬细胞增殖作用为导向,对小球藻热水提取物(CPE)的分离纯化产物进行活性跟踪,以确定CPE的主要功能成分。采用高压热水提取、Sevag除蛋白、乙醇沉淀和超滤的方法得到CPE粗多糖,然后通过DEAE52离子交换层析柱和Sephadex G-100对CPE粗多糖组分进一步分离纯化。研究结果表明,通过上述方法对CPE进行分离纯化,得到3种高活性成分PS-1-4-2、PS-1-3-2和PS-2-3-3,经凝胶渗透色谱GPC分析得知其分子质量分别为3.97×10~4 Da、2.28×10~4 Da和4.1×10~3 Da。活性跟踪结果表明,CPE能够清除自由基并促进巨噬细胞Ana-1细胞生长,主要是由于其多种活性组分共同发挥作用,清除自由基作用的功能成分主要集中于PS-1-3、PS-1-4、PS-2-3和PS-2-4,促Ana-1细胞增殖作用的功能成分主要集中于PS-1-3、PS-1-4和PS-2-3。本研究确立了CPE主要功能成分的活性筛选手段,并获得3种新型功能成分,可用于指导小球藻高附加值产品的开发,从而进一步推动微藻能源的产业化进程,实现"高附加值微藻产品、微藻能源与微藻固碳"一体化的示范作用。

岩木瓜化学成分的分离、结构鉴定与杀虫活性

为明确岩木瓜Ficus tsiangii Merr.exCorner的杀虫活性成分及杀虫活性,利用活性跟踪分离技术,通过硅胶柱层析、薄层层析及葡聚糖凝胶等手段对岩木瓜茎和根皮的化学成分进行了分离、纯化,结合化合物理化性质和波谱数据对其结构进行了鉴定。结果表明,从岩木瓜中分离得到4个生物活性化合物,分别为β-香树脂醇乙酸酯、蒲公英赛酮、柯依利素及齐墩果酸。利用胃毒法测定了这些化合物（500μg/g糖）对家蝇Musca domestica成虫的生物活性,其中蒲公英赛酮处理试虫48h后的校正死亡率达到83.33%,表现出较强杀虫活性,并进一步测定了其对试虫的毒力。结果表明,蒲公英赛酮处理家蝇成虫48h后表现出较强毒力,其LC50值为89.82μg/g糖,略低于对照药剂鱼藤酮毒力（LC50值为67.58μg/g糖）。因此,蒲公英赛酮值得进一步深入研究。

活性跟踪法研究地骨皮中抑制NF-κB的化学成分

传统中药地骨皮常用于治疗许多与炎症相关的疾病。该研究目的是确定地骨皮中抑制核转录因子NF-κB(炎症关键调控子)的活性成分。对不同溶剂的地骨皮提取物进行体外抑制NF-κB的活性试验,结果发现乙酸乙酯提取物与甲醇提取物表现出较强的抑制活性。通过活性跟踪分离纯化,获得4种酚酰胺类化合物,分别为:反-对羟基肉桂酰酪胺(1)、反-阿魏酰酪胺(2)、反-咖啡酰酪胺(3)与二氢咖啡酰酪胺(4)。它们对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的NF-κB活性的抑制率差异非常显著,抑制率大小为3>4>2≈1。推测反-咖啡酰酪胺为关键活性成分,其IC_(50)为18.41μmol·L^(-1)。通过构效关系分析说明,反-咖啡酰酪胺C-3位的羟基可能是与NF-κB结合的高亲合位点,而且C-7,8位双键介导了苯环、羰基的π电子共轭作用,从而形成独特的平面空间构型,有助于抗炎分子与靶标蛋白的空间契合。由此推断,含有α,β-不饱和酮及苯环的迈克尔受体结构与邻二酚羟基共同决定了化合物3的生物活性。

活性跟踪法研究地骨皮中的PPARγ激动作用成分

目的:筛选地骨皮中的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂,确定具有调节糖脂代谢作用的潜在活性成分。方法:运用PPARγ受体表达质粒、报告质粒(tk-PPREx3-luc)与编码绿色荧光蛋白(pEGFP-N1)质粒短时转染HEK293细胞的体外筛选模型,通过活性跟踪分离筛选地骨皮中的PPARγ激动剂,评价配体浓度对PPARγ活性的响应。采用与高选择性PPARγ拮抗剂T0070907共孵育培养,分析PPARγ对配体的依耐程度。结果:地骨皮中的脂肪酸类具有较强的PPARγ激动活性,而芳香酸则无明显效果。脂肪酸的活性大小为:棕榈酸>亚麻酸>亚油酸>硬脂酸>油酸>蜂花酸。棕榈酸在1.0-10μg/mL范围内,浓度与PPARγ激动活性呈线性相关。与呲格列酮相比,T0070907能以相同模式阻断棕榈酸对PPARγ的激活作用。结论:地骨皮中具有PPARγ激动作用的主要组分是以棕榈酸为主的脂肪酸类。棕榈酸与呲格列酮类似,对PPARγ的激活作用也与浓度相关,而且PPARγ对棕榈酸也呈配体依耐性。