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活细胞荧光成像技术连续观察胶质瘤干细胞向内皮细胞分化过程中多种分子标记物的变化 被引量:1
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作者 魏强国 王浩 刘欣民 《生物医学工程学进展》 CAS 2017年第4期196-198,共3页
目的采用活细胞荧光成像技术动态观察胶质瘤干细胞向内皮细胞的分化过程,并分析细胞表面标记物的变化。方法以胶质瘤干细胞株GSC-1为对象,分别进行免疫荧光标记技术和活细胞荧光成像技术观察其在分化过程中分子标记物的变化趋势。结果 G... 目的采用活细胞荧光成像技术动态观察胶质瘤干细胞向内皮细胞的分化过程,并分析细胞表面标记物的变化。方法以胶质瘤干细胞株GSC-1为对象,分别进行免疫荧光标记技术和活细胞荧光成像技术观察其在分化过程中分子标记物的变化趋势。结果 GSC-1置入三维培养基质,细胞随时间增加而增殖,6 h后,细胞突起发生融合,细胞增殖,可清晰地观察到多细胞所形成的圆形、多边形和三角形管道样结构。VEGF诱导下免疫荧光染色观察GSC-1表达CD34随时间增加而增加,6 h时较多GSC-l细胞表达CD34,出现典型的闭合样管腔结构。CD34阳性细胞数间差异存在统计学意义(P<0.05)。活细胞荧光观察追踪单个细胞发现,6 h达到高峰,CD34阴性细胞逐渐出现绿色荧光,提示转变成CD34阳性细胞。结论活细胞荧光成像技术观察结果同传统免疫荧光技术所得到的结果相一致,同时可获得单个细胞从CD34阴性细胞转变为CD34阳性细胞的直接影像证据,可直观、准确地对单个细胞进行追踪。 展开更多
关键词 细胞荧光成像技术 胶质瘤干细胞 内皮细胞 分化 分子标记物
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顺铂联合长春新碱对HCT-8/V肿瘤细胞耐药逆转的实时动态活细胞成像研究 被引量:2
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作者 孙丽娜 张婷 +3 位作者 郭锦锦 余运运 姚新生 孙万邦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1085-1090,共6页
目的:探讨顺铂(DDP)联合长春新碱(VCR)对人结直肠腺癌耐长春新碱细胞(HCT-8/V)增殖、凋亡与自噬的影响。方法:以RT-LCI高内涵技术平台,连续观察120 HCT-8/V细胞的生长规律及连续70 h观察细胞凋亡与自噬。结果:DDP对HCT-8/V有抑制作用,... 目的:探讨顺铂(DDP)联合长春新碱(VCR)对人结直肠腺癌耐长春新碱细胞(HCT-8/V)增殖、凋亡与自噬的影响。方法:以RT-LCI高内涵技术平台,连续观察120 HCT-8/V细胞的生长规律及连续70 h观察细胞凋亡与自噬。结果:DDP对HCT-8/V有抑制作用,但无剂量依赖关系; VCR对HCT-8/V抑制作用与药物浓度梯度呈正比; DDP、VCR对细胞凋亡的影响没有差异; DDP、VCR单独及联合应用可抑制HCT-8/V自噬。结论:DDP联合VCR应用通过抑制HCT-8/V细胞的增殖与自噬实现耐药性逆转。 展开更多
关键词 顺铂 长春新碱 结直肠癌细胞 耐药性 实时动态活细胞成像技术
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mRNA单分子动态成像技术研究进展 被引量:1
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作者 赵艳霞 何丽娜 +2 位作者 崔亚宁 李晓娟 林金星 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-207,共7页
转录后成熟的mRNA与RNA结合蛋白结合,形成信使核糖核蛋白复合物,之后在胞质内沿细胞骨架转运并定位到亚细胞特定区域。在此过程中,mRNA的转运及调控对于mRNA的功能、蛋白质的定位和细胞极性生长的维持发挥着重要的作用。近年来,活细胞... 转录后成熟的mRNA与RNA结合蛋白结合,形成信使核糖核蛋白复合物,之后在胞质内沿细胞骨架转运并定位到亚细胞特定区域。在此过程中,mRNA的转运及调控对于mRNA的功能、蛋白质的定位和细胞极性生长的维持发挥着重要的作用。近年来,活细胞单分子成像技术的发展,为人们深入了解mRNA的动态调控提供了新的契机。通过对活细胞中mRNA和RNA结合蛋白的标记,我们不仅可以检测mRNA的动力学特征,还可以原位检测新合成的蛋白质。本文主要介绍mRNA的定位和翻译过程,重点叙述单分子动态成像技术在分析mRNA动态调控中的应用。活细胞单分子成像技术可以揭示mRNA翻译的动力学特性,并促进我们对mRNA命运的理解,为后续研究mRNA的动态调控提供参考。 展开更多
关键词 MRNA 细胞单分子成像技术 动态调控
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转录因子及其动态成像分析技术的研究进展
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作者 何丽娜 赵艳霞 +3 位作者 崔亚宁 玉猛 李晓娟 林金星 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期87-94,共8页
转录因子是通过直接或间接的方式与顺式作用元件相互作用,从而对靶基因进行调控的一组蛋白。由于转录因子在植物生长发育、响应外界刺激等方面发挥着重要作用,其结构和动态特征一直作为研究的重点。转录因子的基本特征被逐渐揭示,然而... 转录因子是通过直接或间接的方式与顺式作用元件相互作用,从而对靶基因进行调控的一组蛋白。由于转录因子在植物生长发育、响应外界刺激等方面发挥着重要作用,其结构和动态特征一直作为研究的重点。转录因子的基本特征被逐渐揭示,然而关于它们之间是如何响应特定的信号而表现出不同的动态特征,在很大程度上仍是未知的。近年来,随着活细胞单分子成像技术的发展,为学者深入了解转录因子间的动态调控提供了新的契机。本文主要介绍了转录因子的结构特征和研究方法,重点叙述了单分子动态成像技术在分析转录因子动态调控中的应用,以期为后续研究转录因子的动态调控过程提供参考。 展开更多
关键词 转录因子 细胞单分子成像技术 动态调控
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ITO石英晶体电极上不同内皮细胞浓度的粘弹性研究及药物作用评估 被引量:4
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作者 鲍冬芹 潘炜松 +2 位作者 谭成方 沈海波 周铁安 《激光生物学报》 CAS 2017年第3期217-223,共7页
用石英晶体微天平(quartz crystal microbalance,QCM)和活细胞成像技术实时监测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在ITO石英晶体电极上的动态粘附响应过程。在ITO晶体电极上加入不同浓度的HUVEC,测定细胞在QCM上谐振频率以及耗散的实时变化。通过... 用石英晶体微天平(quartz crystal microbalance,QCM)和活细胞成像技术实时监测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在ITO石英晶体电极上的动态粘附响应过程。在ITO晶体电极上加入不同浓度的HUVEC,测定细胞在QCM上谐振频率以及耗散的实时变化。通过ITO电极与光学显微镜的联用,监测了HUVEC在药物处理前后的动态变化过程。用细胞粘弹性指数(QCM的动态电阻变化与频移变化之比,CVI=ΔR/Δf)表征细胞的粘弹性变化,同时通过活细胞成像技术的联用,实时监测细胞的形态变化。结果表明:细胞浓度为10万个/m L时,细胞在ITO电极上铺展完全且粘弹性最大。抑制剂y-27632和激动剂凝血酶thrombin药物处理细胞前后,在显微镜的实时监测下细胞形态变化不明显,但CVI粘弹性指数变化较大,说明QCM信号比光学信号更为敏感,且在药物筛选方面有有很大的应用前景。 展开更多
关键词 晶体电极 内皮细胞 石英晶体微天平(QCM) 活细胞成像技术
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CRISPR/Cas9系统在临床医学研究的应用与改进 被引量:2
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作者 杨育宾 黄卫人 陈巍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期16-23,共8页
癌症与遗传疾病等难治性疾病的发生发展一般是多因素协同的结果,涉及复杂的信号网络及多生物分子的相互作用。了解其中驱动的关键元素有助于为临床上的治疗和研究打开新的突破口。然而,探究驱动元素用于难治性疾病治疗的挑战之一是缺乏... 癌症与遗传疾病等难治性疾病的发生发展一般是多因素协同的结果,涉及复杂的信号网络及多生物分子的相互作用。了解其中驱动的关键元素有助于为临床上的治疗和研究打开新的突破口。然而,探究驱动元素用于难治性疾病治疗的挑战之一是缺乏方便、可编程的基因编辑工具。近年来,新型的CRISPR/Cas9系统由于其组分简单、基因编辑效率高等特点逐渐成为临床医学研究中应用最为广泛的基因编辑工具。本文介绍了CRISPR系统应用于临床研究中的相应进展和潜在挑战。阐述了基于CRISPR系统sgRNA序列重构能改变靶向性及系统本身的可编程性等特性,其可在进行适当的改造和修饰后实现对活细胞染色体的实时成像,用以了解生物体在面临外界刺激时基因组的时空调节。评估了CRISPR系统在基因筛选、免疫治疗和遗传疾病治疗方面的重大价值,尤其是CRISPR系统进行相应改造后系统用在临床研究中安全性与功能性的提升。介绍了CRISPR系统在临床研究中的应用障碍、局限以及对其相应的优化改造,展望CRISPR/Cas9基因编辑技术的应用前景及其在临床医学领域的发展优势,以期能为CRISPR系统的进一步应用与优化提供参考。 展开更多
关键词 临床医学 CRISPR/Cas9系统 CRISPR活细胞成像技术 基因编辑 CRISPR系统的局限和优化
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Endocytosis unplugged: multiple ways to enter the cell 被引量:21
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作者 Sudha Kumari Swetha MG Satyajit Mayor 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第3期256-275,共20页
Endocytosis occurs at the cell surface and involves internalization of the plasma membrane (PM) along with its constituent membrane proteins and lipids. Endocytosis is involved in sampling of the extracellular milie... Endocytosis occurs at the cell surface and involves internalization of the plasma membrane (PM) along with its constituent membrane proteins and lipids. Endocytosis is involved in sampling of the extracellular milieu and also serves to regulate various processes initiated at the cell surface. These include nutrient uptake, signaling from cell- surface receptors, and many other processes essential for cell and tissue functioning in metazoans. It is also central to the maintenance of PM lipid and protein homeostasis. There are multiple means of internalization that operate concurrently, at the cell surface. With advancement in high-resolution visualization techniques, it is now possible to track multiple endocytic cargo at the same time, revealing a remarkable diversity of endocytic processes in a single cell. A combination of live cell imaging and efficient genetic manipulations has also aided in understanding the functional hierarchy of molecular players in these mechanisms of internalization. Here we provide an account of various endocytic routes, their mechanisms of operation and occurrence across phyla. 展开更多
关键词 ENDOCYTOSIS TRAFFICKING membrane CLATHRIN DYNAMIN ACTIN .
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