锥兰联合茜素红活细胞染色法观察角膜中央碱烧伤内皮细胞愈合过程

目的:研究角膜碱烧伤内皮细胞的愈合过程。方法:锥兰联合茜素红内皮细胞染色法对角膜中央碱烧伤内皮细胞形态学变化进行观察。结果:伤后20分钟内皮细胞已破坏。72小时,损伤区的周边内皮细胞变形向创面内迁移。第7天后缺损区大部分范围均可见梭形细胞覆盖。结论:兔碱烧伤损伤区内皮细胞的修复由邻近内皮细胞变形,增殖和移行长入创面内完成,修复的内皮细胞具有纤维细胞特征。眼科学报1999;15:218-220。

女性尿沉渣白细胞活体染色的临床应用

目的提高女性尿沉渣白细胞检验的准确性及分辨率,为临床提供更有效的诊断和治疗依据。方法用尿沉渣白细胞活体染色法,对尿中死、活白细胞进行染色鉴别、计数,了解尿中死、活白细胞在诊断女性急性尿路感染与非感染中的检测意义。结果女性清洁前未感染组与清洁前、后急性感染组活体染色死、活白细胞百分比比较差异均有显著性意义(P<0.01)。结论尿沉渣白细胞活体染色法为鉴别女性急性尿路感染与否的有效诊断依据。

激光照射小鼠骨髓细胞及大鼠离体染色质的研究

一、前言 激光照射能否诱发遗传物质的变异,国内外尚无定论,须要进一步研究。1969年S.Fine等用红宝石激光照射多种植物,认为没有诱变效应,而1976年C.Zorn等报道激光UV段的微束照射,确能引起染色质畸变。M.W.Bern等(1976)也报道激光照射活细胞染色体,发现有双光子效应。在国内,中山大学遗传组(1976)、安徽农学院徐厚镕(1982)的报道与毛炎麟(1978)、蒋同庆(1980)的结果也互相矛盾。

流式细胞术在感染鼠疟原虫活红细胞检测中的应用

采集感染伯氏疟原虫的ICR小鼠外周血,未经固定的红细胞用Vybrant DyeCycle Green染料和抗小鼠CD71 PE荧光抗体进行双染色(实验组)。以健康小鼠外周血作阴性对照。分别在染色后0、30和60 min利用流式细胞仪进行检测,比较各次结果的一致性。结果显示,阴性对照(健康小鼠血样)与空白对照(感染疟原虫鼠血未作染色)未检出感染红细胞的疟原虫,实验组可检出感染红细胞的疟原虫。组内相关系数(ICC)检验结果显示,3个时间点检测结果的一致性较好(ICC=0.999,P<0.01)。表明未经固定的红细胞用Vybrant DyeCycle Green染料和抗小鼠CD71 PE荧光抗体染色经流式细胞术检测可区分感染疟原虫红细胞。采集的红细胞在一定时间内未作固定对检测结果无明显影响。

消毒剂灭活脊髓灰质炎病毒试验方法的研究

目的:研究消毒剂灭活脊髓灰质炎病毒的试验方法。方法:试验采用细胞感染法,以活细胞染色法(MTT法)和观察细胞病理变化(CPE)法测定中和剂、消毒剂及中和产物对细胞存活性的影响。选择2种常用消毒剂:次氯酸钠和过氧乙酸分别进行悬液定量灭活病毒试验。结果:MTT法测定结果与CPE法观察结果基本一致;过氧乙酸含量为500mg/L作用10min, 对脊髓灰质炎病毒的灭活指数大于4,次氯酸钠有效氯含量300mg/L作用10min对脊髓灰质炎病毒的灭活指数大于4。结论:在预备实验中,MTT法测定中和剂、消毒剂及中和产物对细胞存活性的影响准确可靠;正式试验时,以CPE法观察细胞病理变化更简便易行。

榄香烯静脉输注浓缩液体外抗人体肿瘤细胞疗效实验研究

[目的]了解榄香烯静脉输注浓缩液的体外抑瘤效果。[方法]用CremophorEL作增溶剂配合丙二醇制成2%榄香烯静脉输注浓缩液,进行体外细胞增殖抑制实验(MTT活细胞染色法)。[结果]榄香烯静脉输注浓缩液体外细胞毒实验对多种人体肿瘤细胞:SHG-44人体神经胶质瘤、LAX人体肺腺癌、HL-60人白血病、人体肝细胞癌QGY及人体胃癌MGC,IC50依次为56.07～60.47μg/mL、88.76～92.80μg/mL、39.37～40.14μg/mL、90.26～100.82μg/mL、61.29～83.64μg/mL。[结论]榄香烯静脉输注浓缩液对上述人体肿瘤细胞具有一定的增殖抑制作用。

骨髓telocytes的形态及免疫表型特征（英文）

目的探讨骨髓telocytes(TCs)的免疫表型特征。方法以C57BL/6J小鼠为研究对象,通过扫描电镜原位观察骨髓TCs的形态学特征;分离培养骨髓TCs并利用相差显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察。结果扫描电镜下,骨髓TCs胞体向外发出极其细长的突起(telopodes,Tps),相邻Tps通过直接接触形成相互联系。细胞培养发现TCs胞体较小,呈椭圆形,胞体发出细长的突起(250.33μm),由膨大的粗段(Podom)与细段(Podomer)交替组成。亚甲蓝染色、吉姆萨染色和詹纳斯绿染色均提示为典型的TCs。免疫荧光染色发现CD34、CD117、CD45、CD73和CD90在骨髓TCs中为阳性表达。结论首次成功分离和培养骨髓TCs,并对其形态学和免疫表型特征进行了描述。

一种吲哚二甲川菁染料的合成、光谱性质及其应用

目的合成一种含吲哚环的二甲川菁染料,研究光谱性质、与生物分子的相互作用及其作为荧光探针在活细胞成像中的应用。方法采用UV-vis,1H NMR,IR,HR-MS分析确证产物的结构;采用吸收光谱和荧光光谱法研究二甲川菁染料在不同溶剂中的光谱性质,以及该染料在生理条件下与鲑鱼精DNA(DNA)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶、淀粉酶、糜蛋白酶和牛血红蛋白的相互作用;采用荧光倒置显微镜观察染料对K562白血病细胞的活细胞染色。结果该染料最大吸收波长(λmax)随着溶剂介电常数的增加出现蓝移。染料与DNA相互作用较强,且荧光强度随着DNA浓度的增加而增强,而其他5种生物大分子对染料的荧光强度影响不大。该染料可以穿透活细胞膜,对细胞核染色,可以清晰地看出核仁的荧光较亮,2 h后观察细胞仍有荧光。结论合成了一种光谱性质优良的二甲川菁染料,该染料对核酸(DNA/RNA)有较强的亲和性,属于活细胞通透性染料,是一种潜在的活细胞成像荧光探针。

水溶性吲哚菁染料的合成、光谱性能及其应用

设计、合成了3种水溶性吲哚菁染料(发射波长:690 nm),用核磁共振波谱(NMR)对其进行了表征,测试了菁染料在不同溶剂中的紫外吸收光谱和荧光发射光谱;为了探讨菁染料在生物分析领域的应用性,测定3种菁染料在十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和十二烷基磺酸钠(SDS)两种表面活性剂胶束模拟的生理条件下的吸收和发射光谱,利用循环伏安法(CV)测定了菁染料的光稳定性,在近红外区域观察了染料对肾癌细胞的活细胞染色性能,并计算了3种菁染料的摩尔吸光系数和荧光量子产率。

鱼类雄核发育的研究进展

雄核发育是在雄核控制下发育的一种特殊的有性生殖方式 ,它是鱼类单性发育的重要组成部分。本文全面综述了国内外鱼类雄核发育研究的进展状况。主要包括雌核染色体灭活和雄核二倍化诱导技术。雌核染色体灭活主要通过γ、X和紫外线(UV)等辐射处理完成的 ,其辐射剂量和方法因研究者不同而不同。雄核的二倍化诱导则主要是采用静水压和温度休克阻止第一次有丝分裂来实现的 ,其二倍化诱导条件与研究的种类不同而有所差异。同时 ,本文对鱼类雄核发育在遗传育种中的应用前景作了评价。

Fluorescent vital staining of plant sexual cell nuclei with DNA-specific fluorochromes and its application in gametoplast fusion

DNA－binding fluorochromes are often used for vital staining of plant cell nuclei.However,it is not always sure whether the cells after staining still remain in living state.We chose several criteria to estimate the validity of real vital staining for sexual cell nuclei.These were:the cytoplasmic streaming in pollen tubes whose nuclei were stined,the simultaneous visualization of fluorochromatic reaction and nucleus staining in isolated generative cells,and the capability of isolated.prestained generative or sperm cells to fuse with other protoplasts.The results confirmed that 4,6-diamidino-2-phenylindole(DAPI),Hoechst 33258 and mithramycin could be used as real vital stains,though their efficiency varied from case to case;among them DAPI showed best effect.The fluo rescent vital staining technique offered a useful means foridentification and selection of heterokaryons in gametoplast manipulation studies.

雄甾-3β,5α,6β-三醇衍生物的合成与抗癌活性

目的:合成3β,5α,6β-三羟基雄甾-17β-衍生物并考察其体外抗癌活性,探讨17β-侧链对抗癌活性的影响。方法:以孕烯醇酮为原料经乙酰化、溴仿反应、甲酯化、过氧化氢氧化、水解、再分别进行乙酯化和丁酯化等步骤合成了4个目标化合物;以孕烯醇酮、醋酸去氢表雄酮和薯蓣皂素为原料经过氧化氢氧化等步骤合成了3个目标化合物;3β,5α,6β-三羟基孕甾-20-酮经格式反应等步骤合成2个目标化合物。采用MTT活细胞染色法,对目标化合物进行BEL-7402人肝癌细胞体外增殖抑制实验。结果:合成了9个目标化合物并经元素分析、IR和~1HNMR确证了结构。结论:L7,L11和L12对BEL-7402人肝癌细胞有一定的抗癌活性,L12抗癌活性最好。

复方野马追胶囊抗呼吸道合胞病毒研究

目的观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒(RSV)感染及炎性因子IL-8释放的抑制作用。方法采用细胞病变(CPE)观察和活细胞染色方法,观察复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染细胞的保护。同时,通过ELISA法测定培养上清IL-8的变化。结果复方野马追胶囊对呼吸道合胞病毒感染有抑制作用,其中以治疗法效果最为明显。同时该药对呼吸道合胞病毒感染后引起的IL-8释放也有明显抑制作用。结论复方野马追胶囊具有明显的体外抗呼吸道合胞病毒感染、降低感染后气道炎症因子释放的作用。