活血荣络方对急性缺血性卒中患者血管新生及脑血流灌注的影响

目的探讨活血荣络方对阴虚血瘀型急性缺血性卒中患者血管新生及脑血流灌注的影响。方法选择2023年1—12月在湖南中医药大学第一附属医院治疗的阴虚血瘀型急性缺血性卒中患者110例,采用随机数字表法分为2组各55例。对照组(脱落4例)给予西医规范治疗,观察组(脱落5例)在对照组治疗基础上给予活血荣络方治疗,2组疗程均为14 d。比较2组治疗前后中医证候评分、神经功能缺损程度NIHSS评分、日常生活能力ADL评分、血清血管新生指标[外周血血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)]水平、脑血流灌注情况[大脑前动脉(ACA)、中动脉(MCA)、后动脉(PCA)的平均血流速度]及治疗14 d后的临床疗效、治疗过程中不良反应发生情况。结果治疗后2组中医证候积分、NIHSS评分均明显低于治疗前(P均<0.05),ADL评分及血清VEGF、BDNF、IGF-1水平均明显高于治疗前(P均<0.05),各动脉平均血流速度均明显快于治疗前(P均<0.05);治疗后观察组中医证候积分、NIHSS评分均明显低于对照组(P均<0.05),ADL评分及血清VEGF、BDNF、IGF-1水平均明显高于对照组(P均<0.05),各动脉平均血流速度均明显快于对照组(P均<0.05)。治疗后观察组总有效率明显高于对照组[96.0%(48/50)比82.4%(42/51),P<0.05]。治疗过程中对照组和观察组不良反应发生率比较差异无统计学意义[3.9%(2/51)比6.0%(3/50),P>0.05]。结论联合活血荣络方治疗阴虚血瘀型急性缺血性卒中疗效优于常规治疗,可明显改善临床症状,促进VEGF、BDNF、IGF-1分泌以利于血管新生,改善脑血流灌注,促进缺损神经功能恢复,从而提高日常生活能力。

基于生物信息学和动物实验筛选缺血性脑卒中血管新生关键基因与活血荣络方的干预作用

目的基于生物信息学探索缺血性脑卒中血管新生的分子机制,并采用动物实验研究活血荣络方的干预机制。方法通过分析转录组数据,筛选缺血性脑卒中血管新生关键基因,验证基因表达差异并进行相关性分析,构建PPI网络。通过R语言clusterProfiler包进行GO、KEGG富集分析,通过Cytoscape 3.9.1软件构建“靶点-中药”对应关系。建立大鼠脑缺血再灌注损伤(MCAO/R)模型,分为假手术组、模型组和活血荣络方低、中、高剂量组(5.85、11.7、23.4 g/kg),进行改良神经功能缺损评分,HE染色检测大鼠脑组织病理损伤情况,Nissl染色检测大鼠脑组织海马区神经元损伤情况,Western blot法检测大鼠脑组织CD44、MT2A、GPNMB、S100A6、VEGFA蛋白表达。结果共得到8个缺血性脑卒中血管新生关键基因,外部数据验证这些关键基因在缺血性脑卒中中的高表达,并发现它们之间存在显著正相关关系。活血荣络方能剂量依赖性地改善神经功能缺损症状,减轻神经元病理损伤,并增加尼式小体数目,升高CD44、MT2A、GPNMB、S100A6、VEGFA蛋白表达。结论活血荣络方通过多靶点机制促进缺血性脑卒中后血管新生,改善神经功能缺损症状,为中医药治疗缺血性脑卒中提供了新的依据和方向。

基于JAK2/STAT3通路探讨活血荣络方对OGD/R后BMEC的干预作用及机制

目的探讨活血荣络方激活Janus酪氨酸激酶2/信号转导和转录激活剂3(Janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)通路对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cell,BMEC)的干预作用和机制。方法培养大鼠BMEC(bEnd.3细胞),建立OGD/R模型;将细胞随机分为正常组(10%空白血清)、模型组(10%空白血清)、活血荣络方组(10%活血荣络方含药血清)、丁苯酞组(10%丁苯酞含药血清)、Stattic组(10%空白血清+10μmol/mL Stattic)、联用组(10%活血荣络方含药血清+10μmol/mL Stattic),并分别给予相应的药物干预24 h。采用CCK-8法检测活血荣络方对OGD/R后bEnd.3细胞活性的影响;采用划痕实验和Transwell迁移实验分别检测活血荣络方对OGD/R后bEnd.3细胞划痕愈合和细胞迁移的影响;采用Western blot法检测bEnd.3细胞中JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、血管内皮细胞生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组bEnd.3细胞存活率、细胞划痕愈合率、细胞迁移数显著降低(P<0.01),JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、VEGFA的表达量升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,活血荣络方组bEnd.3细胞的存活率、细胞划痕愈合率、细胞迁移数显著升高(P<0.01),JAK2、p-JAK2、p-STAT3、STAT3、VEGFA的表达量升高(P<0.05或P<0.01);与Stattic组比较,联用组bEnd.3细胞的存活率、细胞划痕愈合率、细胞迁移数显著升高(P<0.05或P<0.01),STAT3、VEGFA的表达量升高(P<0.05)。结论活血荣络方可能激活JAK2/STAT3信号通路并诱导内皮细胞的增殖、迁移和存活,激活VEGFA表达并减轻脑缺血再灌注损伤,具有神经保护作用。

荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方辅助治疗急性脑梗死的效果及其对脑血流动力学、血清miR-27-3p和miR-409-3p表达的影响

目的:评价荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方辅助治疗急性脑梗死(ACI)的效果及其对脑血流动力学、血清微小RNA-27-3p(miR-27-3p)和微小RNA-409-3p(miR-409-3p)表达的影响。方法:择取我院收治的128例ACI患者作为研究对象,采用随机数表法分为两组,各64例。基础组给予常规治疗,研究组增加荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方。对比两组临床疗效、中医证候积分、脑血流动力学指标、神经因子水平、不良反应。结果:研究组总有效率(93.75%,60/64)高于基础组(81.25%,52/64)(P<0.05);研究组大脑中动脉(MCA)、大脑前动脉(ACA)、大脑后动脉(PCA)血流速度均高于基础组(P<0.05);研究组视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)、陷窝蛋白-1(Cav-1)水平,miR-27-3p、miR-409-3p表达均低于基础组(P<0.05);两组均未出现明显不良反应。结论:荣气理论指导下的祛瘀活血荣络方联合常规治疗能够有效减轻ACI患者临床症状,改善大脑血液循环,调节神经因子水平,提高治疗效果,且安全性高。

活血荣络方对脑缺血再灌注损伤大鼠SIRT1/PGC-1α信号通路的影响

目的观察活血荣络方对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠SIRT1/PGC-1α信号通路的影响,初步探讨其对CIRI的保护机制。方法60只大鼠随机分为假手术组、模型组、活血荣络方组、EX-527组、EX-527+活血荣络方组和艾地苯醌组,采用线栓法建立CIRI大鼠模型。给药组于造模前36 h首次予相应药物灌胃(10 mL/kg),之后每24 h给药1次,共3次,EX-527组和活血荣络方+EX-527组于再灌注前20 min腹腔注射EX-527(5 mL/kg),其余各组在相同时间灌胃蒸馏水或腹腔注射生理盐水。再灌注24 h后对大鼠进行神经功能缺损评分,HE染色观察缺血皮质区损伤情况,试剂盒检测皮质区三磷酸腺苷(ATP)含量,免疫组化检测缺血皮质区沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)蛋白表达,RT-qPCR检测缺血皮质区SIRT1、PGC-1αmRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分升高,缺血皮质区神经元损伤严重,ATP含量减少,SIRT1、PGC-1α蛋白和mRNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,活血荣络方组和艾地苯醌组大鼠神经功能缺损评分降低,缺血皮质区神经元损伤改善,ATP含量增加,SIRT1、PGC1-α蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);EX-527组大鼠神经功能缺损评分升高,缺血皮质区神经元损伤加重,ATP含量减少,SIRT1、PGC-1α蛋白和mRNA表达降低(P<0.05)。与活血荣络方组比较,活血荣络方+EX-527组大鼠神经功能缺损评分升高,缺血皮质区神经元坏死和凋亡增多,ATP含量减少,SIRT1、PGC-1α蛋白和mRNA表达降低(P<0.05)。结论活血荣络方可促进CIRI大鼠ATP生成,改善神经功能缺损症状,其机制可能与激活SIRT1/PGC-1α信号通路有关。

活血荣络方含药血清对氧糖剥夺/复氧糖损伤PC12细胞线粒体自噬的影响及机制研究

目的基于氧糖剥夺/复氧糖(OGD/R)损伤的PC12细胞模型观察活血荣络方含药血清对线粒体自噬的影响及作用机制。方法采用OGD/R损伤PC12细胞模拟体外脑缺血再灌注损伤模型,将细胞分为正常对照组、模型组、空白血清组、活血荣络方含药血清组和雷帕霉素组,采用相应血清进行干预,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位(MMP),免疫荧光染色检测线粒体-LC3B共定位、线粒体-PINK1-Parkin共定位,Western blot检测微管蛋白1轻链3B(LC3B)、p62、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、Parkin蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组细胞MMP明显降低(P<0.01),线粒体-LC3B共定位无明显变化,线粒体-PINK1-Parkin共定位增强,LC3B、PINK1、Parkin蛋白表达明显升高,p62、TOMM20蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,活血荣络方含药血清组细胞MMP明显升高(P<0.01),线粒体-LC3B共定位和线粒体-PINK1-Parkin共定位增强,LC3B、PINK1、Parkin蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),p62、TOMM20蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论活血荣络方含药血清可减轻OGD/R诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与调控PINK1/Parkin通路,增加Parkin蛋白的线粒体转位,上调LC3B,下调p62、TOMM20蛋白表达,激活线粒体自噬相关。

基于NLRP3炎症小体探讨活血荣络方对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及机制

目的观察活血荣络方对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响,基于NLRP3炎症小体探讨其作用机制。方法72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组和活血荣络方低、中、高剂量组,采用线栓法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型,各组分别于造模前36、12 h及造模后12 h灌胃。对大鼠神经功能缺损进行评分,TTC染色测定脑梗死体积,HE染色观察海马及皮质区病理损伤,ELISA检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量,Western blot检测海马组织NLRP3、pro-Caspase-1、Cleaved-Caspase-1蛋白表达,免疫组化检测海马及皮质区Caspase-1表达,免疫荧光染色检测细胞焦亡。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积百分比明显增加;海马及皮质区神经元胞体缩小变形,核固缩明显;血清IL-1β、IL-18含量明显增加,海马组织NLRP3、pro-Caspase-1、Cleaved-Caspase-1蛋白表达明显升高,海马CA1区及皮质区Caspase-1表达明显升高,皮质区焦亡阳性细胞率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,活血荣络方中、高剂量组和尼莫地平组大鼠神经功能缺损评分和脑梗死体积百分比明显减少;海马及皮质区神经元损伤明显好转;血清IL-1β、IL-18含量明显减少,海马组织NLRP3、pro-Caspase-1、Cleaved-Caspase-1蛋白表达明显降低,海马CA1区及皮质区Caspase-1表达明显降低,皮质区焦亡阳性细胞率明降低少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),以活血荣络方中剂量组作用最明显(P<0.05,P<0.01)。结论活血荣络方能通过抑制NLRP3炎症小体过度激活抑制细胞焦亡,从而改善大鼠脑缺血再灌注损伤。

活血荣络丸Ⅱ指纹图谱的成分鉴定和多成分定量分析

目的:建立复方制剂活血荣络丸Ⅱ中与脑神经活性相关的8种指标性成分的定性定量分析方法。方法:使用Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)和0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B)为流动相,进行梯度洗脱。首先利用三重四极杆-串联质谱(QQQ-MS/MS)对活血荣络丸Ⅱ中马钱苷、巴利森苷A、绿原酸、芍药内酯苷、肉桂酸、β-细辛醚、芍药苷和异欧前胡素等8种指标成分进行质谱定性确证。再采用蒸发光散射检测器(ELSD)测定巴利森苷A的含量,用二极管阵列检测器(DAD)对剩余7种成分进行含量评估。结果:8种成分的质谱信息与对照品相吻合,线性关系良好,且精密度、重复性和稳定性RSD均小于5.0%,加标回收率在92.3%~107.3%。结论:建立的定量方法简单快速、准确,可以为复方制剂活血荣络丸Ⅱ的质量控制提供参考。

昼夜环境紊乱对缺血性中风后血管新生的影响及活血荣络方的干预作用

目的观察昼夜环境紊乱对缺血性中风后血管新生的影响及活血荣络方的干预作用。方法SD大鼠随机分假手术组、模型组(MCAO)、活血荣络方组(MCAO+HXRLF)、模型+生物节律紊乱组(MCAO-ECD)及模型+生物节律紊乱+活血荣络方组(MCAO-ECD+HXRLF),建立大脑中动脉闭塞再灌注模型,给药10 d。采用神经功能缺损评分评价神经功能缺损;HE染色观察病理变化;免疫荧光观察海马及皮质CD34数;Western blot法检测血管新生及生物节律关键蛋白;ELISA法检测血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、褪黑素(melatonine,MT)及炎症因子。结果昼夜环境紊乱加重梗死后神经缺损(P<0.01),减少皮质及海马CD34阳性细胞数(P<0.05),降低脑内血管新生蛋白(P<0.05)及血清中VEGF(P<0.01)、MT(P<0.05)水平,升高血清IL-1β(P<0.01)与TNF-α(P<0.05)水平,活血荣络方改善昼夜环境紊乱加重的神经功能缺损(P<0.01),增加皮质及海马区CD34阳性细胞数表达(P<0.05),增加脑组织血管新生蛋白表达(P<0.05),升高血清中VEGF(P<0.01)、MT(P<0.05)水平,降低炎症因子水平(P<0.05)。结论昼夜环境紊乱加重脑梗死后神经功能损伤,抑制血管新生,活血荣络方可逆转该进程,促进血管新生,减轻炎症反应,改善神经功能缺损。

活血荣络汤联合西医常规疗法治疗脑小血管病伴认知功能障碍及步态障碍的临床观察

目的:探究活血荣络汤联合西医常规疗法治疗脑小血管病伴认知功能障碍及步态障碍的临床疗效。方法:选取脑小血管病伴认知功能障碍和步态障碍患者70例,随机分为研究组和对照组,每组35例。对照组给予西医常规疗法治疗,研究组在对照组基础上加用活血荣络汤治疗。治疗4周后,比较两组患者治疗前后连线测验A+B(TMT)结果、步态参数、Berg平衡量表(BBS)评分和日常生活能力量表(ADL)评分变化情况。结果:治疗后,两组患者TMT-A时间和TMT-B时间较治疗前均明显缩短(P<0.05),且研究组均优于对照组(P<0.05);两组患者步长、步速、步频较治疗前均有明显改善(P<0.05),且研究组均优于对照组(P<0.05);两组患者BBS、ADL评分均高于治疗前(P<0.05),且研究组均高于对照组(P<0.05)。结论:活血荣络汤联合西医常规疗法可显著改善脑小血管病伴认知功能障碍及步态障碍患者的信息处理速度和认知功能障碍,有效改善步态障碍,维持躯体平衡,提高日常活动能力。

活血荣络颗粒联合针刺八脉交会穴治疗脑梗死痉挛性瘫痪临床研究

目的观察活血荣络颗粒联合针刺八脉交会穴对脑梗死痉挛性瘫痪的临床疗效及对血清谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)的影响。方法将60例脑梗死痉挛性瘫痪患者随机分为试验组和对照组各30例。2组均予西医基础治疗,试验组加活血荣络颗粒,每日1剂,分2次口服;针刺八脉交会穴,2日1次。15 d为1个疗程,共6个疗程。观察治疗前及治疗半个月、1个月、3个月临床痉挛指数(CSI)评分、中医症状评分,测定血清Glu、Asp水平,观察中医临床疗效。结果治疗半个月、1个月、3个月2组CSI评分、血清Glu、Asp水平、中医症状评分均较治疗前降低(P<0.05,P<0.01)。治疗半个月2组CSI评分比较差异无统计学意义(t=0.329,P=0.743)。治疗1个月、3个月,试验组CSI评分低于对照组(t=-2.636,P=0.024;t=-4.213,P=0.021)。治疗半个月、1个月,血清Glu、Asp水平2组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。治疗3个月,Glu、Asp水平2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗半个月、1个月、3个月,中医症状评分试验组低于对照组(P<0.05)。试验组中医疗效总有效率为86.67%(26/30),对照组为80.00%(24/30),试验组优于对照组(P<0.05)。结论活血荣络颗粒联合针刺八脉交会穴治疗脑梗死痉挛性瘫痪能缓解痉挛程度、改善中医临床症状,其作用机制可能与降低血清兴奋性神经递质有关。

基于网络药理学的活血荣络方对脑梗死血管新生作用机制研究

目的采用网络药理学方法研究活血荣络方在脑梗死血管新生中的作用及其机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集活血荣络方的主要活性成分并进行初步筛选,采用Swiss Target Prediction数据库预测主要活性成分靶点,通过GeneCards数据库预测脑梗死血管新生作用靶点,二者取交集得出共同靶点。采用String数据库及Cytoscape软件Network analyzer功能构建共同靶点蛋白相互作用网络。采用DAVID数据库结合Cytoscape软件对共同靶点进行GO及KEGG富集分析。结果收集并筛选出活血荣络方422个活性成分、1028个靶点,脑梗死血管新生169个靶点,共同靶点42个,其中IL6、TNF、AKT1、CASP3相互作用最明显,主要调控氧化应激、细胞凋亡、蛋白磷酸化、内皮细胞及平滑肌细胞增殖等生物过程及HIF-1信号通路、癌症途径、TNF信号通路、能量代谢途径、PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路等。结论活血荣络方在脑梗死血管新生中体现了多成分、多靶点、多途径的作用特点,有助于进一步诠释活血荣络方的药理学作用机制。

活血荣络方对Aβ_(25-35)损伤神经胶质细胞Wnt5α、Fz5、CaMKⅡ表达的影响

目的：旨在通过细胞实验,从Wnt5a-Fz5-Ca MKⅡ通路揭示活血荣络方治疗阿尔茨海默病（AD）的分子机制,为中医药治疗阿尔茨海默病提供新思路、新方法。方法：分别将Aβ25-35损伤星形胶质细胞铺板,以（2.53）×104/孔的密度接种到96孔板中,并随机分为6组,分别为2倍活血荣络方组、1倍活血荣络方组、0.5倍活血荣络方组、多奈哌齐组、s FRP组、空白组;待细胞的融合率为85%90%时,含药组分别给予相应的含药血清,s FRP组给予s FRP,空白组予以空白血清。取生长对数期细胞加相应刺激分别处理12、24、48、72 h。分别取细胞上清液分离细胞,用MTT法检测细胞毒力,用流式细胞术检测细胞凋亡;用化学免疫法检测Wnt5、Fz5、Ca MKⅡ的含量。结果：各组OD值随着时间的延长而增高,2倍活血荣络方组72 h OD值明显高于12 h（P〈0.05）,而空白组、s PRF组、2倍、0.5倍活血荣络方组、多奈哌齐组4个时间点见无明显差异（P〉0.05）;各给药组细胞活性均高于空白组（P〈0.05）,其中2倍活血荣络方组细胞活性最高;s FRP组细胞活性低于空白组（P〈0.05）。各组细胞凋亡数目随着时间的延长而增高,其中空白组72 h细胞凋亡比例高于12 h（P〈0.05）,s PRF组72 h细胞凋亡比例明显高于12 h;2倍、1倍活血荣络方组、0.5倍活血荣络方组、多奈哌齐组4个时间点见无明显差异（P〉0.05）;各给药组细胞凋亡比例明显低于空白组及s PRF组,其中2倍活血荣络方组细胞活性最高;s FRP组细胞凋亡比例高于空白组（P〈0.05）。各给药组Wnt5α、Fz5、Ca MKⅡ的表达均高于空白组（P〈0.05）,其中2倍活血荣络方组Wnt5α表达明显高于空白组（P〈0.01）,空白组明显高于s PRF组（P〈0.05）;其它给药组间比较：2倍活血荣络方组明显高于1倍活血荣络方组、多奈哌齐组及0.5倍活血荣络方组（P〈0.01）,1倍活血荣络方组与多奈哌齐组Wnt5α表达程度无明显差异（P〉0.05）,此两组Wnt5α表达均高于0.5倍活血荣络方组（P〈0.05）。结论：活血荣络方能有效提高Wnt5α、Fz5、Ca MKⅡ的表达,减轻神经毒性的积累及细胞凋亡反应的发生,保护神经胶质细胞,延缓AD发病进展,其中以2倍活血荣络方效果最佳。

活血荣络方对Aβ25-35诱导的星形胶质细胞阿尔兹海默病损伤的抑制作用及其机制研究

目的:本研究旨通过生物信息学和细胞实验研究,揭示活血荣络方治疗阿尔兹海默病的分子机制。方法:通过GeneCards、String、DAVID数据库预测AD疾病潜在靶点,并对潜在靶点进行"蛋白-蛋白"互作网络(PPI)、GO分析,绘制"靶点-GO"热图。同时采用体外Aβ25-35损伤星形胶质细胞诱导AD细胞模型,并随机分为6组,分别为空白组、多奈哌齐组、sFRP、0.5倍活血荣络方组、1倍活血荣络方组、2倍活血荣络方组组,加相应刺激分别处理12 h、24 h、48 h、72 h。采用MTT法检测细胞活性、免疫组化法检测APP、Aβ蛋白定位、定量表达,以初步验证生物信息学预测结果。结果:收集筛选出AD共35个靶点,其中APP、APOE、PSEN1、PSEN2、SNCA相互作用明显,且APP、APOE在GO中显著富集。MTT结果显示各组OD值随着时间的延长而增高,各药物组细胞活性均高于空白组,其中2倍组细胞活性最高;sFRP组低于空白组。免疫组化结果显示药物组Aβ及APP的表达均低于空白组,2倍活血荣络方组均低于其它给药组,并且各组Aβ及APP表达随时间延长有逐渐减少趋势,但2倍活血荣络方组减少最明显。结论:基于"阴虚血瘀-荣气虚滞"理论立方的活血荣络方可能通过多靶点、多成分、多通路发挥治疗AD疾病的作用,并进一步实验验证其治疗作用可能与抑制APP、Aβ蛋白的表达,降低AChE活性,从而改善神经突触炎症毒性有关。

活血荣络片对APP/PS1双转基因小鼠认知能力及Aβ沉积的影响

目的:探讨活血荣络片治疗阿尔茨海默病的机制,指导临床治疗。方法:APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、模型+复方丹参片组(低、中、高剂量)、模型+多奈哌齐组,同月龄KM小鼠作为正常组。给予相应药物治疗2月后,行Morris水迷宫实验评估小鼠学习及记忆能力,Western Blot检测脑组织Aβ的含量。结果:1Morris水迷宫:模型组小鼠逃避潜伏期、首次进入区域时间与其他各组相比明显延长,穿越区域次数最少,与正常组及其他给药组比较有明显差异(P<0.05或P<0.01);APP/PS1双转基因小鼠中,高剂量活血荣络片组小鼠综合表现最优。2Western Blot检测:模型组小鼠脑组织中Aβ表达最高,与正常组及其他各组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01);其含量随活血荣络片剂量增加而减少。结论:活血荣络片可通过减少APP/PS1小鼠脑内Aβ的沉积,改善小鼠的空间学习及记忆能力,并减轻小鼠海马组织神经元的损伤。

基于“TF-miRNA”反馈环探讨活血荣络方对脑梗死大鼠的保护作用及机制

目的基于活血荣络方对"转录因子(TF)-微小RNA(miRNA)"反馈环的影响,研究其对脑梗死大鼠的保护作用。方法通过GEO、TargetScans、starBase、TransmiR v2.0数据库,采用R语言构建"TF-miRNA"反馈环。将大鼠随机分为假手术组、模型组、活血荣络方组及丁苯酞组,建立MCAO/R模型,灌胃给药7 d;采用mNSS(改良神经功能缺损评分)、HE(苏木素-伊红染色)、Nissl(尼氏染色)分别评价各组大鼠神经功能、病理及尼氏小体情况;RT-PCR法检测"TF-miRNA"反馈环中KLF4、KLF5、miR-206、miR-429及反馈环反向VEGF mRNA表达。结果生物信息学构建出"KLF4-miR-206""KLF4-miR-544""KLF4-miR-429""KLF5-miR-429""EBF1-miR-429"5个"TF-miRNA"反馈环。与假手术组比较,模型组mNSS,KLF4、KLF5、VEGF mRNA与miR-206、miR-429表达升高(P<0.01);与模型组比较,活血荣络方组与丁苯酞组mNSS 1 d无明显变化(P>0.05),3、7 d mNSS降低(P<0.01),KLF4表达升高,miR-206、miR-429表达降低(P<0.01);活血荣络方组KLF5、VEGF表达升高(P<0.05);丁苯酞组KLF5、VEGF表达升高(P<0.01);且药物均能改善脑梗死大鼠的病理损伤。结论活血荣络方能上调TFs(KLF4、KLF5)、下调miRNAs(miR-206、miR-429)的表达,打破脑梗死大鼠中存在的"TF-miRNA"反馈环,可能通过介导VEGF的表达促脑梗死后血管新生,起到神经保护作用。

活血荣络片对大鼠MCAO模型脑组织MVD表达的影响

目的:观察活血荣络片对大鼠大脑中动脉缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型脑组织MVD表达的影响。方法:采用线栓法制作SD大鼠MCAO模型,随机分为假手术组、模型组、实验组,对照组,分别在缺血后24 h、3 d、5 d、7 d四个时间点经TTC染色测定脑梗死体积,免疫组化法测定MVD表达。结果:TTC染色测定脑梗死体积显示,对照组、实验组与模型组相比在各时间点梗死体积均有所缩小,差异有统计学意义(P<0.05);实验组与对照组相比,3 d时脑梗死体积缩小明显,有显著统计学意义(P<0.01),余时间点稍缩小,有统计学意义(P<0.05)。MVD表达测定,实验组、对照组MVD单位面积内计数在各时间点均较模型组显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组相比,实验组在24 h、3 d时表达增高,有统计学意义(P<0.05);在5 d、7 d时明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:活血荣络片可缩小梗死体积,促进脑缺血区MVD增加,其作用机制可能与促脑血管新生有关。

活血荣络片对急性脑梗死患者血浆CF6及线粒体游离Ca^(2+)浓度水平的影响

目的:探讨活血荣络片对急性脑梗死患者血浆中CF6及线粒游离Ca^(2+)浓度水平的影响。方法:将60例急性脑梗死患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。两组均给予奥扎格雷钠、疏血通注射液、小牛血清去蛋白注射液,并同时口服阿司匹林肠溶片作为常规治疗。治疗组在常规治疗基础上加用活血荣络片,每次6片,口服,每日3次;对照组在常规治疗基础上加用磷酸吡哆醛丁咯地尔胶囊,每次1粒,口服,每日2次。观察两组患者临床疗效及治疗前后中医证候学变化、CSS评分变化、ADL评分、CF6及线粒游离Ca^(2+)浓度水平变化情况。结果:对照组有效率为83.33%,治疗组有效率为93.33%,两组有效率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后CSS评分、ADL评分、血浆CF6及线粒体游离Ca^(2+)浓度水平均较治疗前得到改善,且治疗组优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:活血荣络片治疗急性脑梗死疗效确切,能有效降低血浆CF6水平,抑制Ca^(2+)内流,从而有效地抗血小板聚集、降低血栓形成风险,并能较好地清除氧自由基减轻脑缺血损伤。

活血荣络片对AD模型小鼠AchE和ChAT表达的影响

目的观察活血荣络片对阿尔茨海默病(AD)小鼠脑组织乙酰胆碱酯酶(Ach E)和乙酰胆碱转移酶(Ch AT)表达的影响。方法将50只APP/PS1双转基因AD模型小鼠随机分为模型组、低剂量活血荣络片组、中剂量活血荣络片组、高剂量活血荣络片组、多奈哌齐组,每组10只。同期将同月龄的10只KM小鼠作为正常组。每天灌胃1次,连续治疗2个月。治疗结束后,取各组小鼠脑组织,采用Western Blot检测Ach E和Ch AT蛋白含量。结果与正常组相比,AD模型组小鼠脑组织Ach E蛋白表达提高、Ch AT蛋白表达降低(P<0.01);与模型组相比,低中高剂量活血荣络片组、多奈哌齐组脑组织Ach E蛋白表达降低、Ch AT蛋白表达增高(P<0.01);与多奈哌齐组比较,中、高剂量活血荣络片组降低Ach E蛋白表达的变化无统计学意义(P>0.05),而高剂量活血荣络片组提高Ch AT蛋白的表达(P<0.05)。结论活血荣络片可一定程度上抑制AD模型小鼠脑组织Ach E蛋白的表达并促进Ch AT蛋白的表达。

活血荣络片治疗阴虚血瘀型阿尔兹海默病的临床观察

目的:观察活血荣络片治疗阿尔兹海默病的临床疗效。方法:采用随机对照法,将60例阿尔兹海默病患者分为治疗组、对照组,对照组予盐酸多奈哌齐片口服,治疗组在对照组治疗的基础上加服活血荣络片,两组均进行8周的治疗,通过观察治疗前后中医症候积分及痴呆相关指标变化来评价疗效。结果:两组治疗后痴呆均较前改善,治疗组总有效率为83.3%,对照组为60.0%,治疗组优于对照组(P<0.05)。治疗后治疗组MMSE积分、Barthel指数积分的改善均较对照组明显(P<0.05)。结论:活血荣络片治疗阴虚血瘀型阿尔兹海默病有较好的临床疗效。