甲基绿—派洛宁染色法研究进展

甲基绿—派洛宁染色法(MG-P)既往主要应用于显示细胞DNA和RNA,随着细胞化学定量技术,特别是图象分析技术(ICM)的发展,其研究有了很大发展,目前已应用于细胞DNA/RNA的同时定量分析.本文就这方面的进展作一综述.

甲基绿-派洛宁-马休黄组合染色法检测神经元凋亡

目的 :提供一种研究神经元凋亡的形态学方法。方法 :应用甲基绿 -派洛宁 -马休黄组合染色法 ,检测沙土鼠脑缺血后海马神经元的凋亡。结果及结论 :甲基绿 -派洛宁 -马休黄组合染色法能显示细胞质mRNA明显增高时期的凋亡神经元。

六胺银甲绿派洛宁复染法

使用两种或两种以上染色相结合的染色方法,用以辨认比较复杂的病变,已成为病理组织学一种趋势。本文报道一种复合染色法——六胺银甲绿派洛宁复染法,用以显示桥本氏甲状腺炎浆细胞在甲状腺滤泡内及滤泡间的分布。一、溶液的配制:1.0.5%过碘酸。2.0.2%氯化金。3.5%硫代硫酸钠。4.5%硼砂液。5.六胺银储备液:5%硝酸银5ml,3%六亚甲四胺100ml。

甲基绿-派洛宁染色方法在慢性子宫内膜炎诊断中的应用

目的:探讨甲基绿-派洛宁染色方法在慢性子宫内膜炎诊断中的应用。方法:采用Cook甲基绿-派洛宁提纯法染色子宫内膜组织,诊断慢性子宫内膜炎。结果:294例子宫内膜组织有64例诊断为慢性子宫内膜炎。结论:甲基绿-派洛宁染色方法是一种简便、经济、实用的方法,可以做为慢性子宫内膜炎诊断的首选方法。

洋葱内表皮细胞中DNA和RNA染色方法的改进

目的改进洋葱内表皮细胞中DNA和RNA的染色方法。方法使用固定液固定后,以不同浓度的甲基绿派洛宁混合染色液对洋葱内表皮细胞进行染色处理,与传统方法对比,观察染色效果。结果用甲醇冰醋酸固定液固定后,洋葱内表皮细胞不会发生质壁分离,更容易染色;甲基绿与派洛宁的浓度比为3∶2和1∶1时能在细胞中更加分明地将细胞核染成蓝绿色,将细胞质和核仁染成红色。结论用甲醇冰醋酸固定液固定,甲基绿与派洛宁的浓度比为3∶2至1∶1时能得到较好的实验效果。

甲状腺滤泡上皮细胞DNA含量与死亡时间的相关性

目的探讨甲状腺滤泡上皮细胞平均DNA含量变化与死亡时间(PMI)的相关性。方法采用甲基绿-派洛宁(MG-P)染色法结合图像分析技术,测定尸体甲状腺滤泡上皮细胞平均DNA含量变化值,并对其数据进行统计学分析。结果甲状腺滤泡上皮细胞平均DNA含量随死后经过时间的延长而加速降解。平均DNA含量各指标(平均灰度、目标面积、目标面积比)与PMI之间的决定系数R2分别为0.960、0.987、0.988和0.990(P<0.001)。结论尸体甲状腺滤泡上皮细胞平均DNA含量与PMI之间具有明显相关性,甲基绿-派洛宁(MG-P)染色法结合图像分析技术测定在研究甲状腺滤泡上皮细胞DNA含量变化方面具有一定优势。

猪圆环病毒感染后部分免疫器官的组织化学检测

采用非特异性酯酶和甲基绿-派洛宁两种染色方法,对40头猪的淋巴结、脾脏和扁桃体进行研究,利用细胞计数软件,统计分析T、B淋巴细胞的数量变化。结果表明,圆环病毒可导致机体淋巴组织T细胞和B细胞减少,且淋巴细胞数量的变化受伴发病原的影响,其中猪瘟病毒影响最大,伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒次之。

3种高致病性猪蓝耳病疫苗对仔猪免疫器官的损伤作用

【目的】研究3种高致病性猪蓝耳病(PRRS)疫苗(MLV、TJM92、JXA-1R)对仔猪免疫器官的损伤作用。【方法】选取50头初生健康仔猪,分为4组进行免疫:未免疫空白对照组(CK组)、MLV疫苗免疫组(A组)、TJM92疫苗免疫组(B组)、JXA-1R疫苗免疫组(C组)。病理剖检后,制作石蜡切片,通过优化的酯酶染色(α-ANE染色)、甲基绿-派洛宁染色(MG-P)方法统计各免疫器官的酯酶阳性T淋巴细胞和浆细胞(效应B淋巴细胞)比率变化。【结果】各免疫组的免疫器官酯酶阳性T淋巴细胞和浆细胞所占百分比与对照组存在显著或极显著差异。【结论】3种疫苗对仔猪免疫器官均有不同程度的损伤作用,具体表现为JXA-1R疫苗损伤作用最强,TJM92疫苗次之,MLV疫苗最弱。

应用流式细胞术测量网织红细胞

红细胞在骨髓中由原始红细胞经过增殖分化成为早、中、晚不同阶段的幼稚红细胞,然后由晚幼红细胞经过脱核变成网织红细胞。在正常情况下人外周血网织红细胞仅占0.5％-1.5％左右。应用活性染料亮甲酚蓝染色在显微镜下可看到染料与rRNA结合形成的网状沉淀物。在临床上使用这种方法计数1000个红细胞计算出网织红细胞百分数。由于检测细胞少容易造成较大的误差。网织红细胞的主要特征是随其成熟程度核DNA消失,RNA也逐渐减少。

肥大细胞三种染色法的比较研究

目的对肥大细胞的三种染色方法比较，筛选出最佳显示方法。资料与方法，选用手术切除的消化道恶性肿瘤标本９４例，应用硫堇、甲苯胺蓝和甲基绿一派洛宁三种染色法显示肥大细胞，进行同一组织切片分组染色，镜下观察比较分析。结果甲基绿一派洛宁染色法显示肥大细胞效果最佳，此方法除可分别显示出幼稚的肥大细胞和成熟的肥大细胞外，还能清晰地显示出肿瘤细胞及其间质组织等其它的组织成分。结论甲基绿一派洛宁染色法其组织结构清晰，色彩鲜艳，对比度强。适用于组织形态学研究和临床外检的辅助诊断。

牛蛙血细胞核酸和脊髓运动神经细胞的显色观察

目的建立牛蛙血细胞核酸及脊髓运动神经细胞显色方法,更好地服务教学和临床。方法制备临时装片,用福尔根反应和甲基绿-派洛宁对细胞内的核酸进行显色,用甲苯胺蓝染液对脊髓运动神经细胞进行染色。结果福尔根反应后,细胞核呈紫红色,细胞质呈绿色。该反应的最适条件为室温水解2 min,60℃水解8 min,再室温水解2 min,复染40 s。甲基绿-派洛宁染色后,细胞核呈蓝色,细胞质呈粉红色。甲苯胺蓝染色后,脊髓运动神经细胞被染成深蓝色。结论福尔根反应中亮绿复染的最适时间为40 s。甲基绿-派洛宁能够对细胞内的DNA和RNA同时进行定位、定性分析。该研究方法对实验教学、科学研究和临床实践具有一定的理论和实际意义。

几种氧杂蒽衍生物吸收光谱的理论研究

使用密度泛函B3LYP/6-31G(d,p)对派洛宁20、B和Y、罗丹明123等化合物进行几何优化。在优化的几何构型的基础上,使用TD-DFT方法分别计算了这些化合物从基态到10个激发态的跃迁能量、吸收波长和振子强度;发现三种派洛宁衍生物吸收光谱主要是π→π*跃迁,其吸收波长受氨基供电子能力的影响。与派洛宁分子的吸收波长相比,罗丹明衍生物的吸收波长要小一些。

增强型超分子荧光探针对拉帕替尼的识别及其在细胞成像中的应用

通过超分子识别设计了八元瓜环与派洛宁Y超分子荧光探针2PyY@Q[8],研究了该探针对抗癌药物拉帕替尼的识别性质.研究结果表明,该探针在水溶液中对拉帕替尼具有良好的识别能力及选择性,在一定浓度范围内其线性关系良好,其检出限为1.44×10^(-8) mol/L.细胞成像结果显示该探针在前列腺癌细胞中对拉帕替尼具有很好的响应,可用于生物细胞内拉帕替尼的识别检测.