安子合剂对抗磷脂抗体阳性流产小鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:研究安子合剂对抗磷脂抗体(APA)阳性流产小鼠Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(My D88)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗APA阳性流产作用机制。方法:将BALB/c小鼠(♀)随机分为空白对照组、模型组、阿司匹林组(阳性对照,0.019 5 g/kg)和安子合剂低、中、高剂量组(37.7、75.4、150.8 g/kg,以生药计),每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠均以人β2-糖蛋白Ⅰ为诱导剂建立APA阳性流产模型。从妊娠第1天起,各给药组小鼠ig相应药物,空白对照组和模型组小鼠ig等体积生理盐水,每天1次,连续9 d。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应法和免疫组化法测定胎盘组织TLR4、髓样分化蛋白2(MD2)、My D88、NF-κB m RNA及其蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠胎盘组织TLR4、MD2、My D88、NF-κB m RNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,阿司匹林组和安子合剂低、中剂量组小鼠胎盘组织TLR4、MD2、My D88 m RNA及其蛋白表达水平,安子合剂高剂量组小鼠胎盘组织TLR4蛋白表达水平,以及各给药组小鼠胎盘组织NF-κB蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);安子合剂低剂量组小鼠胎盘组织TLR4、MD2 m RNA表达水平和MD2、My D88蛋白表达水平较阿司匹林组更低(P<0.05或P<0.01)。结论:安子合剂可抑制APA阳性流产小鼠TLR4/My D88/NF-κB信号通路转导,这可能是其抗APA阳性流产的作用机制之一。

脐带间充质干细胞促进蜕膜血管内皮生长因子表达改善自然流产小鼠妊娠结局

背景:早期自然流产与母胎界面血管形成障碍或异常有关,人脐带华通氏胶间充质干细胞具有向损伤部位迁移及促血管生成的作用,目前人脐带华通氏胶间充质干细胞作用于早期自然流产蜕膜基质细胞的研究尚未有报道。目的:探讨人脐带华通氏胶间充质干细胞对早期自然流产蜕膜基质细胞增殖、凋亡及血管内皮生长因子表达的影响,以及对早期自然流产小鼠妊娠结局的影响。方法:①分离培养早期自然流产和人工流产蜕膜组织,实时荧光定量PCR和Western blot检测蜕膜组织中血管内皮生长因子的表达;②第3代人脐带华通氏胶间充质干细胞和原代自然流产蜕膜基质细胞共培养72 h,EdU、Annexin V-FITC分别检测蜕膜基质细胞增殖和凋亡情况,实时荧光定量PCR和Western blot检测蜕膜基质细胞中血管内皮生长因子的表达;③复制CBA/J×DBA/2自然流产小鼠模型,孕1,3,5 d尾静脉移植人脐带华通氏胶间充质干细胞悬液0.1 mL(细胞浓度为1×1010 L-1),孕14 d计算胚胎吸收率,ELISA检测外周血中血管内皮生长因子水平;实时荧光定量PCR和Western blot检测蜕膜组织中血管内皮生长因子的表达。结果与结论:①与正常蜕膜组织相比,早期自然流产患者蜕膜中血管内皮生长因子表达显著降低;②人脐带华通氏胶间充质干细胞促进早期自然流产蜕膜基质细胞中血管内皮生长因子的表达,促进细胞增殖、抑制细胞凋亡;③人脐带华通氏胶间充质干细胞促进自然流产小鼠蜕膜组织中血管内皮生长因子表达,进而减少胚胎吸收率;④结果表明,合适剂量的人脐带华通氏胶间充质干细胞可以促进蜕膜中血管内皮生长因子表达,改善早期自然流产妊娠结局。