小鼠胚胎心脏流出道嵴的发育

目的探讨小鼠胚胎心脏流出道嵴内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞的来源及流出道嵴融合时间充质细胞超微结构的变化。方法用抗α-SMA、抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)单克隆抗体、PlexinA2探针,对胚龄10～14d小鼠胚胎心脏切片进行免疫组织化学和原位杂交染色;透射电镜观察胚龄12.5d时小鼠心流出道嵴的融合过程。结果胚龄10～11d,小鼠神经管及其周围、动脉囊和弓动脉壁可见PlexinA2阳性细胞,并沿动脉囊壁迁入流出道嵴内,部分细胞同时表达α-SMA。胚龄12d,PlexinA2阳性细胞分布在脊神经节、咽前间充质、主肺动脉隔以及主、肺动脉壁。主肺动脉隔显α-SMA强阳性,但动脉壁仅见少量α-SMA阳性细胞。胚龄12.5d,流出道嵴内致密间充质细胞团形成并开始融合,PlexinA2表达较弱,α-SMA表达呈强阳性。在流出道嵴融合开始后,嵴表面的内皮细胞带形成继而断裂消失,由含微丝少、排列稀疏的间充质细胞取代。两侧致密细胞团逐渐靠拢、融合。有的间充质细胞内含较多线粒体和微丝,细胞之间形成细胞连接点;有的间充质细胞含微丝少,细胞膜间断融合。结论流出道心内膜垫内α-SMA阳性间充质细胞来自神经嵴;内皮细胞-间充质细胞转化可能参与了流出道嵴融合;致密细胞团内间充质细胞富含微丝束和细胞连接点或发生细胞膜融合有助于流出道嵴的融合。

α-平滑肌肌动蛋白在人胚心流出道早期发育中的表达

目的探讨人胚早期心流出道心肌和流出道心内膜垫内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达规律及其意义。方法32例C10-C16期[Carnegie分期法,受精后（22±1-37）d]人胚心连续切片,经抗α-SMA、抗α-横纹肌肌动蛋白（α-SCA）、抗肌球蛋白重链（MHC）抗体免疫组织化学染色,观察流出道重塑过程中α-SMA在心肌与心内膜垫内的表达规律。结果人胚发育C10-C15期,心包腔背侧脏壁上皮不断分化为心肌细胞添加至流出道远端,这些心肌细胞α-SMA的表达早于α-SCA和MHC。C16期,流出道嵴近心肌处出现-αSMA强阳性细胞,相邻的心肌细胞伸出突起与其相连。C12-C15期,α-SMA阳性细胞逐渐迁入流出道心内膜垫内,同时可见流出道内皮转为α-SMA阳性,向间充质细胞分化。不同来源的间充质细胞共同参与形成螺旋状流出道嵴。结论α-SMA可作为心肌细胞早期分化的标志;流出道嵴内α-SMA阳性细胞可能部分来自神经嵴,部分为正在向间充质细胞分化的内皮细胞。

小鼠胚胎流出道心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞的分布

背景:早期胚胎心脏流出道心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞参与了流出道的分隔,但在流出道分隔中的分布规律及作用机制仍然不明。目的:观察心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞在流出道分隔过程中分布的时空规律,探讨其与流出道分隔的关系。设计、时间及单位:单一样本观察,于2006-06/2007-12在山西医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:鼠龄3个月的雌性中国昆明小鼠30只,体质量30～32g。方法:妊娠小鼠经乙醚麻醉,收集9～16d胎龄胚胎共32只,制作心脏切片。连续切片每10片取1片做苏木精-伊红染色,其余9片进行免疫组织化学染色。主要观察指标:抗α-平滑肌肌动蛋白、抗结蛋白、抗α-横纹肌肌节肌动蛋白单克隆抗体在胎龄9～16d小鼠胚胎心脏流出道的表达。结果:胎龄10d,可见α-平滑肌肌动蛋白阳性主肺动脉隔形成,同时,α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞沿弓动脉壁迁入流出道心胶质。胎龄11d,流出道心内膜内,α-平滑肌肌动蛋白阳性和α-平滑肌肌动蛋白阴性间充质细胞聚集形成流出道嵴。胎龄12～13d,主肺动脉隔将半月瓣远端流出道分隔为升主动脉和肺动脉干,主肺动脉隔分化为升主动脉和肺动脉干相对的内侧壁。胎龄13d后,半月瓣以下,流出道嵴愈合形成流出道隔,将流出道近段分为左右心室流出道。流出道隔中可见部分α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞聚集呈漩涡状。间充质性流出道隔形成与其肌性化相伴随。结论:流出道心内膜和主肺动脉隔的α-平滑肌肌动蛋白强阳性细胞来自神经嵴。流出道不同部位的α-平滑肌肌动蛋白阳性神经嵴细胞功能不同,与流出道其他细胞成分相互作用,完成流出道的分隔和重建。