流式免疫分型联合骨髓细胞形态学分型在急性白血病诊断中的应用

目的分析流式免疫分型联合骨髓细胞形态学分型在急性白血病诊断中的应用。方法选择吉林市中心医院2020年1月—2021年12月收治的70例急性白血病患者作为研究对象。采用流式细胞术对所有患者进行流式免疫分型检测,采用细胞化学染色试剂盒进行骨髓细胞形态学分型检测;检测后对两种分型方式的最终结果进行分析,比较FAB形态学分型与免疫分型结果,并详细记录急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和急性髓系白血病(AML)患者的免疫表型表达水平的差异。结果①FAB形态学分型诊断结果显示,70例急性白血病患者中56例为AML,14例为ALL。②56例AML患者的免疫表型检测结果显示,cMPO表达率最高〔98.21%(55/56)〕,之后依次为CD13〔80.36%(45/56)〕、CD117〔71.43%(40/56)〕、CD33〔67.86%(38/56)〕、CD15〔64.29%(36/56)〕、HLA-DR〔62.50%(35/56)〕、CD34〔57.14%(32/56)〕、CD64〔50.00%(28/56)〕、CD38〔46.43%(26/56)〕、CD14〔39.29%(22/56)〕、CD11b〔32.14%(18/56)〕、CD19〔10.71%(6/56)〕。③14例ALL患者的免疫表型检测结果显示,CD19 cMPO表达率最高〔85.71%(12/14)〕,之后依次为cCD22与CD23〔均为78.57%(11/14)〕、cCD79a〔71.43%(10/14)〕、HLA-DR〔64.29%(9/14)〕、CD10〔57.14%(8/14)〕、CD34〔42.86%(6/14)〕、TdT〔28.57%(4/14)〕、CD2〔14.29%(2/14)〕、CD5〔7.14%(1/14)〕。结论流式免疫分型与骨髓细胞形态学分型联合应用在诊断急性白血病中可以优势互补,取得更好的效果,同时对于B细胞、T细胞系及FAB形态学无法分型的急性白血病患者可借助免疫分型加以诊断,监测微小残留病变,对开展个体化治疗进行指导。

急性淋巴细胞白血病流式免疫分型探讨

目的 对 2 8例急性淋巴细胞白血病 (ALL)进行流式免疫分型研究 ,探讨CD19,CyCD79a ,CD7,CyCD3等白细胞分化抗原在急性淋巴细胞白血病临床免疫分型中的意义。方法 应用双色流式细胞术 ,对 2 8例经细胞形态学、细胞组织化学和临床表现确诊的急性淋巴细胞白血病患者初诊骨髓或静脉血标本进行免疫分型 ,采用CD45 /SSC设门 ,MPO以阳性细胞数≥ 3 %为该表型表达阳性 ,其他白细胞分化抗原以阳性细胞数≥ 2 0 %为该表型表达阳性。结果 14例B细胞系列急性淋巴细胞白血病 (B -ALL)高敏感性和高特异性抗原分别为CD19( 10 0 % )和CyCD79a( 93 % ) ;14例T细胞系列急性淋巴细胞白血病 (T -ALL)高敏感性和高特异性抗原分别为CD7( 10 0 % )和CyCD3 ( 10 0 % ) ;CD10 ,CD3 4,HLA -DR ,CD3 8等非系列相关性早期分化抗原在急性淋巴细胞白血病均有较高的表达频率。结论 在ALL已经明确的情况下 ,CD19和CD79a是确定B -ALL最重要的单抗 ;CyCD2 2是B系列最特异性单抗 ,但敏感性过低 ;CD7和CyCD3是确定T -ALL最重要的单抗。

河南安阳召开“泛太湖白血病淋巴流式免疫分型进展与标准化协作组研讨会”

5月9日上午,由河南省安阳地区医院承办的国家级学术会议——第七届“泛太湖白血病/淋巴流式免疫分型进展与标准化协作组研讨会”在安阳市迎宾馆隆重召开。来自全国30多个省市的近400名血液病学专家、学者参会,并进行为期两天的学术研讨和交流。中国工程院院士、江苏省血液研究所所长、血液学博士、博士生导师阮长耿教授为大会致辞并进行学术讲座。

流式细胞免疫分型联合PCR检测抗原受体基因重排在淋巴增殖性疾病诊断与鉴别诊断中的应用

背景与目的:淋巴增殖性疾病是一组病理形态、免疫表型、临床特征高度异质性的疾病。本文旨在评价流式细胞免疫分型联合聚合酶链反应(PCR)检测抗原受体基因重排在淋巴增殖性疾病诊断中的应用价值。方法:分离79例拟诊淋巴增殖性疾病患者的新鲜病理标本(淋巴结、脾脏、胃活检组织和肝穿组织),流式细胞术分析细胞的免疫表型特征;同时采用BIOMED-2多重PCR分析组织的抗原受体基因重排状况及其克隆来源;并与病理诊断及免疫组织化学结果进行比对。结果:患者最终确诊为非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin'slymphoma,NHL)37例(46.8%),霍奇金淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma,HL)3例(3.8%),淋巴组织良性病变34例(43.0%),恶性肿瘤淋巴结转移4例(5.1%)。在19例B-NHL确诊患者中,流式免疫分型和抗原受体基因重排诊断符合率均为94.7%(18例):18例T-NHL确诊患者中,流式免疫分型和抗原受体基因重排诊断符合率分别为72.2%(13例)和50%(9例);在34例淋巴组织良性病变的患者中,流式细胞免疫分型虽未见单克隆幼稚细胞,但有7例(19.4%)抗原受体基因重排呈单克隆性;在3例HL确诊患者中,流式免疫分型未能检测出来,抗原受体基因重排均为多克隆性;4例恶性肿瘤转移患者中(3例转移浸润淋巴结,1例转移浸润肝脏),流式细胞免疫分型均检测到大量异常幼稚细胞,其中3例无特殊抗体标记,另外1例表达幼稚髓系标记;抗原受体基因重排均为多克隆性。结论:应用流式细胞免疫分型联合抗原受体基因重排分析,对于淋巴组织良、恶性增殖的鉴别和不同类型恶性淋巴瘤的诊断,具有很好的辅助价值。

骨髓涂片细胞学检查与流式细胞免疫分型检测结果不相符分析

目的探讨骨髓涂片细胞学检查与流式细胞免疫分型检测结果不相符情况并分析两种检测方法对于造血系统疾病的诊断价值。方法回顾性分析2019年3月至2020年3月由四川大学华西医院实验医学科接收且具有骨髓涂片细胞学检查及流式细胞免疫分型检测结果的疑诊血液病患者5373例作为研究对象,并对两种方法检测结果不相符的病例情况进行分析。结果5373例患者中骨髓涂片细胞学检查与流式细胞免疫分型检测结果总不相符的病例共352例(6.55%)。研究对象中骨髓涂片细胞学检查结果为增生性贫血而流式细胞免疫分型检测结果为异常浆细胞和异常B淋巴细胞病例共2例。结论骨髓涂片细胞学检查对于细胞形态典型者识别度较高,流式细胞免疫分型检测对于缺乏特定形态的异常细胞识别度较高,且在异常细胞较少的样本与预后检测方面优于骨髓涂片细胞学检查。

细胞免疫表型检测在慢性粒单核细胞白血病诊断和治疗监测中的应用

目的：评估流式细胞仪细胞免疫表型检测（FCI）在慢性粒单核细胞白血病（CMML）诊断和监测治疗反应中的临床价值和意义。方法采用多色 FCI 分析法和形态学观察法对109例 CMML 患者和39例随访患者的骨髓标本的免疫表型和形态学进行检测和评价，并对结果进行统计学分析。结果采用 FCI 测得骨髓单核细胞百分比为15％。与形态学分出的单核细胞百分比相关（r ＝0．35，P＝0．0003）。96％患者单核细胞 FCI 发生改变；FCI 观察到的 CMML 粒细胞生成障碍为91．7％明显高于形态学方法测得的82．6％（χ2＝4．10，P＜0．05）。 CMML 患者 FCI CD34＋细胞测定结果为中位数0．7％（范围0．15％～11．60％），但其免疫表型改变非常显著改变个数的中位数为7（范围1～11个）。91％患者出现1阶段原始血细胞缺失或明显减少。39例随访患者中35例使用低甲基化剂（HMA）治疗和4例等待治疗患者的骨髓样品 CD34＋原始细胞均被检测到持续的免疫表型改变，对 HMA 治疗有应答的13例患者单核细胞 CD14表达均正常；而40．9％（9／22）HMA 治疗无应答者单核细胞 CD14表达发生改变（P＝0．030），4例接受造血干细胞移植治疗的患者免疫表型于移植后均正常。结论 CMML 患者的 CD34＋细胞，单核细胞和粒细胞表现出多种 FCI 异常，FCI 能够将恶性增生从反应性单核细胞增多中区分出来，同时也可用于监测 CMML 患者治疗反应。

难治性急性髓系白血病免疫表型特点

分析难治性急性髓细胞性白血病免疫表型特点，探讨免疫表型的预后意义。应用单克隆抗体和流式细胞仪分析55例难治与49例非难治初发急性髓细胞白血病相关免疫表型，结果表明：难治性急性髓细胞白血病与非难治组比较，难治组CD34表达、DR表达，CD34＋／DR＋、CD34＋／CD11B＋共表达阳性率高于非难治组，差异有统计学意义。CD34＋／CD1B＋是免疫表型中独立于年龄和染色体的不良预后因素。结论：我们可以根据流式细胞免疫分型结合年龄，染色体等预后因素，为临康治疗及判断预后提供指导．

高免疫球蛋白血症多发性骨髓瘤临床与实验室综合分析

目的分析多发性骨髓瘤(MM)的临床症状特征和实验室相关指标,了解MM的发病特点,减少临床及实验室误诊、漏诊。方法选择2014年5月—2019年12月在曲靖市第二人民医院住院的20例高免疫球蛋白血症MM患者作为研究对象,另选本院20例健康体检人群作为正常对照组。使用Olympus BX53显微镜观察原始、幼稚浆细胞形态学及比例;使用日本Sysmex-XT 4000 I、Sysmex-XN9000血细胞分析仪及配套试剂进行血液细胞分析;使用法国Sebia-Hydrays 2全自动电泳分析仪和配套试剂进行血清蛋白电泳和血清免疫固定电泳检测,根据检测结果进行免疫球蛋白分型;使用美国BD公司BD FACS Cantoll三激光八色通道进行骨髓流式细胞免疫分型;使用德国SIEMENS BNⅡ特定蛋白仪及配套试剂进行免疫球蛋白、血κ和血λ定量检测。分析所有受检者的临床症状及实验室检查资料。结果20例MM患者均有不同程度贫血表现,以中度正细胞贫血最多见(占45%);临床以骨质疏松、骨痛、腰椎痛最常见(占85%);MM组免疫球蛋白G(IgG)升高12例,IgA升高7例,IgM升高1例。MM组IgG型的IgG水平和IgA型的IgA水平均较正常对照组明显升高〔IgG(g/L):62.05±19.50比8.33±6.59,IgA(g/L):33.99±23.63比1.57±1.12,均P<0.05〕。MM组κ型14例,血清κ为(21.53±12.53)g/L;λ型6例,血清λ为(15.26±6.27)g/L。20例骨髓涂片均检出原始和幼稚浆细胞,平均(32.27±20.41)%;20例血清蛋白电泳均检出M蛋白,平均(46.32±14.88)%。免疫固定电泳显示:20例MM患者中,IgGκ型8例,λ型4例;IgAκ型5例、λ型2例;IgMκ型1例。MM组10例行流式细胞免疫分型患者均检出单克隆浆细胞,9例表达CD38,9例表达CD56,5例表达CD138,2例表达CD27,1例表达CD13,1例表达CD200,胞质κ限制表达7例,胞质λ限制表达3例。尿蛋白和本周蛋白以两者均阳性最多见(占40%),其次为尿蛋白定性阴性+本周蛋白阳性(占25%)。结合临床及实验室相关指标确诊Ⅲ期MM患者15例、ⅡA期4例,ⅡB期1例。结论MM临床表现复杂多样,首诊入住科室多,临床误诊、漏诊率较高,诊断MM时依据细胞形态学结合流式细胞免疫分型、蛋白电泳,能提高MM诊断及分期的准确性,为临床提供可靠依据。

3例确诊的肝脾γδT淋巴瘤临床诊断及特征分析

目的:探讨肝脾γδT细胞淋巴瘤(HSTCL)的临床表现、病理学特征、免疫表型特点。方法:回顾性分析3例肝脾γδT细胞淋巴瘤患者的临床资料并文献复习。结果:男性2例,年龄分别为18岁、62岁;女性1例,23岁;2例男性有肝脾大、B症状、EB病毒感染,其中1例有乙肝病毒感染;3例均有血象减低、骨髓受累、肝功能异常、乳酸脱氢酶、铁蛋白升高、无淋巴结肿大。3例骨髓细胞学中幼稚细胞明显增多,胞体中等或偏大,胞浆量丰富,胞核类圆形或不规则,染色质细致,核仁明显;免疫分型均表达CD3、CD2、CD7、TCRγδ,部分CD56及CD16阳性,1例初始部分表达CD8,后不表达CD8,3例均不表达CD4、CD5、CD57、TCRαβ;2例检测到TCRD单克隆重排基因片段,1例未检测到单克隆重排基因片段。3例接受化疗患者,2例因感染死亡,1例行异基因造血干细胞移植随访10个月仍完全缓解。3例患者从有临床症状到确诊时间分别为2个月、5个月、8个月,其中2例确诊到死亡时间分别为7个月、6个月。结论:肝脾γδT淋巴瘤常侵犯骨髓,早期行骨髓细胞流式免疫分型明确诊断;该型淋巴瘤对化疗多耐药,预后差,异基因造血干细胞移植可能是治疗方法。

罕见急性早幼粒细胞白血病伴嗜碱性粒细胞增多

急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)是一种特殊类型的急性髓细胞性白血病,占同期急性骨髓性白血病的10%~15%[1-2]。其发病机制是15号和17号染色体易位t(15;17)(q24;q21)形成早幼粒细胞白血病-维甲酸受体(promyelocytic leukemia-retinoic acid receptor,PML-RARα)融合基因而导致粒细胞分化受阻、而异常早幼粒细胞大量增殖[3-6]。

正确认识眼内淋巴瘤分子病理检查结果

近年来日益强大的眼内液分子/细胞生物学检测技术因其简便、快捷和高效的特点,使得眼科医生在诊断眼内淋巴瘤时倾向于单纯只依据此类方法而淡化病理诊断的重要性。眼内液分子/细胞生物学技术因其本身只能"间接提示肿瘤细胞存在"的局限性而不能作为眼内淋巴瘤的确诊依据。眼内组织/细胞病理仍然是眼内淋巴瘤诊断的金标准,其价值和地位不能被其他任何分子/细胞生物学检测手段所替代。理解并掌握各种诊断、检测技术的优势和局限性,规范和优化眼内组织/细胞病理标本的采集、保存和送检流程有助于提高眼科临床医生对眼内淋巴瘤的诊断效率和医疗质量。

变异性多毛白细胞白血病1例

1.病例简介 女性患者,70岁,因"左上腹闷胀9个月"于2003年12月22日来我院血液科就诊.患者2003年3月出现左上腹闷胀不适伴纳差、乏力、头晕、无恶心、呕吐、返酸、腹痛等症状,至同年11月因症状明显就诊于安徽省马鞍市人民医院,查血RT:WBC91.3×109/l LY87.1%RBC2.85×1012/lHb91g/l PLT67×109/l,腹B超示:脾重度肿大,下极达髂嵴水平.

五种临床常规方法应用于骨髓增生异常综合征诊断效能的比较

目的分析血常规、骨髓细胞涂片、活检、骨髓流式免疫分型(FCM)及分子遗传学检查对初诊骨髓增生异常综合征诊断的应用价值。方法回顾性分析芜湖市第二人民医院2014年8月-2020年11月收治的75例初诊骨髓增生异常综合征患者的血常规,比较骨髓涂片、活检及FCM对粒、红、巨各系病态造血及原始细胞的检出率,分析分子遗传异常与病态造血的关系,评估各项检查在初诊骨髓增生异常综合征诊断中的应用价值。结果75例初诊骨髓增生异常综合征患者中,骨髓涂片对红系、粒系病态造血检出率高于活检(红系:76.0%vs.45.3%,粒系:48.0%vs.24.0%),差异有统计学意义(P=0.002、0.010),而对巨核系病态造血的检出率低于活检(32.0%vs.40.0%),差异有统计学意义(P=0.048);且对骨髓增生程度及纤维组织增生判断,活检有明显优势。FCM对粒系发育异常(52.7%)及原始细胞检出率(36.3%)高于活检和涂片。分子遗传异常组的初诊骨髓增生异常综合征患者中细胞发生病态造血的概率(90.0%)高于正常组(82.4%)。涂片、活检及FCM联合检测对红系、粒系、巨核系病态造血检出率(80.0%、58.6%、50.7%)和原始细胞检出率(40.0%)均高于涂片、活检及FCM单一检查手段。结论骨髓涂片、活检、FCM及分子遗传学检查在初诊骨髓增生异常综合征诊断中各有优势,联合项检测可提高诊断阳性率。