流式免疫表型特征在判断二次或三次打击淋巴瘤生存结局中的临床价值

目的确立二次或三次打击淋巴瘤(double/triple-hit lymphoma,D/THL)流式细胞免疫表型(flow cytometric immunophenotyping,FCI)特征,分析其与B淋巴细胞白血病(B-LBL)在免疫表型上的差异,并探讨流式免疫表型特征与D/THL生存结局的相关性。方法用多色FCI分析法对40例D/THL患者和25例B-LBL患者的骨髓和外科活检样本免疫表型进行检测和评价,并将流式免疫表型结果与基因亚型以及总体生存率进行统计学分析。结果 90%(36/40)的D/THL病例CD10表达呈阳性,48%(19/40)的病例缺乏表面轻链,45%(18/40)的病例CD45表达呈弱阳性,40%(16/40)CD19表达呈弱阳性,43%(17/40)CD20表达呈弱阳性,28%(11/40)伴随CD19和CD20的弱表达,38%(15/40)的CD19和CD20表达呈差异化表达(variable expression)。Bcl2^+/Myc^+、Bcl6^+/Myc^+和Bcl2^+/Bcl6^+/Myc^+3种基因亚型D/THL之间,Bcl2^+/Myc^+组CD45弱表达和CD20差异表达的发生率明显低于Bcl2^+/Bcl6^+/Myc^+组(P=0.03,0.02);Bcl2^+/Myc^+组中Bcl2阳性率为96%,其他基因亚型组阳性率均为0,差异有统计学意义(P=0);其他流式免疫表型特征发生率差异均无统计学意义。B-LBL的CD45和CD20弱表达发生率明显高于D/THL(χ~2=20.78、20.83,P<0.01);D/THL病例CD19和CD20同时弱表达发生率(28%)稍多于B-LBL病例(12%),但差异无统计学意义(χ~2=2.19,P>0.05);B-LBL的Td T阳性发生率明显高于D/THL(χ~2=30.74,P<0.01)。对30例已经死亡患者进行生存分析显示,不同基因型总体生存率差异无统计学意义(Bcl2^+/Myc^+对Bcl6^+/Myc^+,P=0.08;Bcl2^+/Myc^+对Bcl2^+/Bcl6^+/Myc^+,P=0.13;Bcl6^+/Myc^+对Bcl2^+/Bcl6^+/Myc^+,P=1.0);CD45弱表达和Bcl2阳性预示着较低的总体生存率(χ~2=11.2、10.4,P=0.01、0.015)。结论 D/THL与B-LBL都可以出现CD45和CD20弱表达及Td T阳性,但B-LBL的生存率明显高于D/THL。D/THL患者的CD45弱表达和Bcl2阳性预示着较低的总体生存率。

探讨Double/Triple Hit淋巴瘤的流式免疫表型特征在疾病诊断及生存结局相关性中的应用

目的确立二次或三次打击淋巴瘤(Double/Triple-Hit lymphoma,D/THL)流式免疫表型特征,研究与B淋巴细胞白血病(B-LBL)在免疫表型上的差异,并探讨流式免疫表型特征与D/THL生存结局的相关性。方法采用多色FCI分析法对40例D/THL患者和25 B-LBL患者的样本的免疫表型进行检测和评价,并将流式免疫表型结果与基因亚型以及总体生存率进行统计学对比分析。结果 90%(36/40)的D/THL病例CD10表达呈阳性,近一半病例(48%,19/40)缺乏表面轻链。45%(18/40)的病例CD45表达呈弱阳性,40%(16/40) CD19表达呈弱阳性,43%(17/40) CD20表达呈弱阳性。28%(11/40)显示伴随CD19和CD20的弱表达,38%(15/40)的CD19和CD20表达呈差异化表达(variable expression)。在不同基因亚型之间,除Dim CD45和BCL2阳性发生率达有差异外(BCL2+/MYC+组Dim CD45发生率明显低于BCL2+/BCL6+/MYC+组(P=0.03); BCL2+/MYC+组中bcl2阳性率为96%,而其它基因亚型组阳性率均为0%),其它表型发生率差异均无统计学意义(P>0. 05)。与B-LBL相比,B-LBL的CD45和CD20低表达发生率明显高于D/THL(X^2=20.78、20.83,); CD19和CD20同时弱表达在D/THL发生率稍多(28%D/THL vs. 10%B-LBL),但差异无统计学意义(X^2=2.31)。B-LBL的TdT阳性发生率明显高于D/THL(X^2=30.74,)。对30例已经死亡患者进行了生存分析显示,不同基因型总体生存率无显著性差异(BCL2+MYC+对BCL6+/MYC+,P=0.08; BCL2+MYC+对BCL2+/BCL6+/MYC+,P=0.13; BCL6+/MYC+对BCL2+/BCL6+/MYC+,P=1.0); Dim CD45和Bcl2阳性预示着与较低的总体生存率(X_1~2=L11.2,10.4,P=0.01,0.015)。结论 D/THL流式免疫表型特征研究有助于D/THL鉴别诊断。对流式免疫表型与疾病结局的生存分析结果,将有利于临床对D/THL整体预后进行危险分层管理,以便能针对特定病人及时采取个体化治疗。

急性白血病患者八色流式免疫表型分析起始管方案的建立

目的建立急性白血病(AL)患者八色流式免疫表型分析起始管方案。方法用胞膜CD3(CD3)、CD19、CD10、CD34、CD45、胞浆CD79a(cCD79a)、髓过氧化物酶(MPO)和胞浆CD3(cCD3)等8种抗体建立八色流式染色方案。膜表面抗体直接染色;膜内抗体经固定破膜,再染色后上机检测。将3个血小板减少患者骨髓标本分别进行抗体的单色染色和缺一色染色;最后对17例确诊的AL初发患者标本进行检测。结果用单色染色来确定染色方案中各抗体的检测电压及荧光补偿;缺一色染色中,阳性细胞群较单色染色变化均<10%,表明方案中的各抗体相互作用小。17例AL初发患者中,6例急性B淋巴细胞白血病原始细胞均为CD34和CD19阳性,5例cCD79a阳性和4例CD10阳性;4例急性T淋巴细胞白血病患者均为cCD3阳性;6例急性髓细胞白血病均为CD34和MPO阳性;1例B+T混合表型AL患者CD34、cCD3、CD19、cCD79a及CD10均为阳性,MPO和CD3为阴性,此检测方案能够确定各类AL的细胞类型。结论建立了AL患者八色流式免疫表型分析起始管方案,操作简便快速,适用于临床检测。

流式细胞免疫表型分析在恶性淋巴瘤诊断中的应用研究

目的:探讨流式细胞免疫表型分析在恶性淋巴瘤诊断中的价值。方法:128例淋巴结肿大病例同时行细胞病理学、组织病理学、免疫组化及流式细胞免疫表型分析,其中38例同时行淋巴结细针穿刺针吸细胞学检查。结果:共诊断42例恶性淋巴瘤,其中霍奇金淋巴瘤4例、非霍奇金淋巴瘤32例,淋巴结细针穿刺针吸细胞学结合流式细胞免疫表型分析与组织病理结合免疫组化检查比较,对非霍奇金淋巴瘤诊断差异无统计学意义。结论:流式细胞免疫表型分析在非霍奇金淋巴瘤诊断中可发挥重要作用,是诊断非霍奇金淋巴瘤的重要辅助手段。

多发性骨髓瘤的流式细胞免疫表型研究进展

尽管多发性骨髓瘤(MM)患者经治疗后能达到完全缓解,但大部分患者最终会复发。复发的根源在于体内残留有少量的MM细胞。为更早地监测MM复发,提高患者的生活质量,目前已有多种检测方法应用于临床,监测疾病的状态,其中多参数流式细胞仪在血液病检测中的价值已被越来越多的学者认同。为了更好地了解MM这一恶性血液病,更好地指导临床实践,对MM细胞的流式细胞免疫表型(FCI)研究进展予以综述。

穿刺活检联合流式细胞仪检测对恶性淋巴瘤诊断和分型临床研究

目的：探讨穿刺活检联合流式细胞仪检测对恶性淋巴瘤诊断和分型，为临床该病的诊疗提供指导参考。方法：选择近3年在我院就诊的经确诊为恶性淋巴瘤48例患者，所有患者都进行了穿刺活检联合流式细胞仪检测，对比分析检测结果。结果：流式细胞仪检测得出89．58％（43／48）的骨髓受累者，其中72．92％（35／48）为非霍奇金淋巴瘤、16．67％（8／48）为霍奇金淋巴瘤，运用穿刺活检检测得出45．83％（22／48）的骨髓受累者，其中10．42％（5／48）的骨髓受累者在流式细胞仪检测未得出结果，2组差异有统计学意义（P＜0．05）；经检测出恶性淋巴瘤分型结果：a 型35．42％（17／48），b 型1．42％（5／48），c 型52．03％（25／48），d型2．08％（1／48）。结论：穿刺活检和流式细胞仪检测对恶性淋巴瘤诊断和分型中的重要辅助手段，2种方式联用能提高疾病诊断的准确度。

无皮损母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤1例并文献复习

母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤(BPDCN)是一种临床上呈高度侵袭性淋巴造血系统恶性肿瘤,极为罕见。2001年,由于肿瘤细胞具有母细胞性细胞学特征并且表达CD56,世界卫生组织(WHO)将其命名为母细胞性自然杀伤细胞(NK细胞)淋巴瘤。但是随后研究又证实CD56并不是NK细胞的特异性表达,而是来源于浆细胞样树突细胞(pDC),因此,2008年WHO将造血与淋巴组织肿瘤进行系统化的分类,将BPDCN归入急性髓系白血病及相关的前体细胞肿瘤中,将不符合BPDCN标准的其他CD4、CD56阳性肿瘤暂时命名为来源不确定的白血病。

髓过氧物酶（MPO）孤立表达在急性B淋巴细胞白血病患者生存结局中的临床价值

目的探讨孤立表达MPO非典型B-ALL患者在临床预后方面与B-ALL和MPAL(B系/髓系)的差异,非典型B-ALL中流式MPO孤立表达阳性的频率以及流式与细胞化学和免疫组化在MPO阳性结果方面的一致性。方法对217例B-ALL样本,31例B-All-isoMPO和19例MPAL(B/myeloid)3组患者样本的流式免疫表型、细胞化学和免疫组化进行回顾性分析和评价,并对结果数据采用生存分析评估3组患者MPO表达对CIR,EFS和OS的影响。结果在2013到2017年间所有诊断为B-ALL和MPAL(B/Myeloid)的白血病病例中,B-All-isoMPO病例约占总体的11.6%(31/267)。B-ALL-iso MPO组在校正年龄、WBC和性别差异后复发风险仍明显增加(HR2.57、95%CI 1.01-6.15、P=0.031)。单因素分析结果显示B-ALL-iso MPO患者EFS显著低于B-ALL(log-rank检验P=0.0053)。B-ALL、B-ALL-isoMPO和MPAL 3组的生存率在对数秩检验上差异无显著性(P=0.7137)。结论BALL患者孤立表达MPO可能会明显增加患者复发风险并显著降低EFS。

外周血检出成熟淋系肿瘤细胞51例血液学分析

目的:探讨成熟淋系肿瘤外周血累及患者的流式免疫表型及形态学以及其他血液学特征。方法:回顾性分析51例在外周血中经流式细胞术以及形态学检查检出外周血淋系肿瘤细胞患者的外周血实验室特征。结果:51例流式细胞术检出异常细胞并最后确诊为成熟淋系肿瘤的外周血累及患者中免疫表型异常51例,外周血片形态学发现异常细胞30例。结论:循环成熟淋系肿瘤细胞见于多种淋系肿瘤,形态学多有异常,但需要靠流式细胞术确认,尤其是新诊断者。