抗-Mur流式微球检测技术的建立及应用

目的合成Mur血型抗原多肽及重复多肽序列,比较2者抗原性,并建立不依赖新鲜红细胞的可用于抗-Mur检测的流式微球实验技术。方法采用固相化学合成法合成制备生物素Biotin标记的Mur血型抗原多肽及重复多肽序列:Biotin-GGDGDGDGDGDTYPAHTANEVSE和Biotin-GGDGDGDGDGDTYPAHTANEVSETYPAHTANEVSE,经凝集抑制试验验证其抗原特异性后,通过链亲和素streptavidin包被于羧基流式微球表面,建立抗-Mur流式微球检测技术。采用该方法检测本研究室制备的抗-Mur参考血清1份和2 300例临床患者血液标本,并与试管法血凝试验比较。同时验证多肽抗原微球的稳定性和保存期限。结果 Mur血型抗原多肽及重复多肽序列被高效包被于流式微球表面;通过抗-Mur流式微球检测技术可检测出参考血清中的抗-Mur;流式微球检测技术与试管法血凝试验对临床患者血液标本抗-Mur阳性检出率皆为0.35%(8/2 300)。通过对参考血清检测实验比较,流式微球检测技术的Mur血型抗原重复多肽序列阳性检测结果明显优于Mur血型抗原多肽,该多肽抗原微球4℃保存稳定性可维持> 11个月。结论基于合成重复多肽序列抗原的抗-Mur流式微球检测技术用于检测抗-Mur,弥补了临床难以获得Mur表型阳性红细胞及保存期短的局限性,有助于临床常规开展抗-Mur检测。