流式微球阵列法检测肺结核患者血清部分细胞因子的临床意义

目的:探讨流式微球阵列法(CBA)检测不同类型肺结核患者血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平的临床意义。方法:采用BD CBA Flex Set检测试剂盒和流式微球阵列法(CBA)检测84例肺结核患者(46例活动性肺结核患者及38例非活动性肺结核患者)和30例正常人的6种细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ)的水平。结果:肺结核患者血清IL-2、IL-6、IL-10和IFN-γ的水平显著高于正常对照组(P<0.01或P<0.05),且活动性结核组高于非活动性结核组(P<0.01或P<0.05)。血清IL-4与TNF-α水平肺结核患者与正常对照组无显著性差异。结论:CBA法能快速、灵敏、多参数批量同步定量检测血清中6种细胞因子;这些细胞因子在肺结核的免疫发病中具有重要的意义。

流式微球阵列术(CBA)检测细胞因子室内质控方法的初步建立

目的初步建立细胞因子检测的室内质量控制方法,提高细胞因子检测的质量。方法CBA法检测L-8、IL-10两种细胞因子,利用“即刻法”监控初始的质控数据积累,并结合L-J法计算均值及标准差,绘制质控图。结果IL-1020个质控数据的CV值为13.66%,IL-8前20个质控数据的CV值为18.52%,剔除告警值后的CV值为15.19%;即刻法与L-J图两种质控方法判定结果存在一定差异。结论“即刻法”结合L-J图法可具有较好的精密度和稳定性,基本满足CBA法检测细胞因子室内质控的要求。

流式微球阵列法检测Th1/Th2细胞因子谱在细菌性血流感染中的临床应用

目的探讨Th1/Th2细胞因子谱在细菌性血流感染中的临床应用价值。方法采用回顾性队列研究,纳入2019年9月—2021年8月内蒙古医科大学附属医院住院期间血流感染患者89例,其中革兰阳性(G+)菌感染46例、革兰阴性(G-)菌感染43例,同期健康人对照31例。采用流式微球阵列(CBA)技术检测患者血液样本中Th1/Th2细胞因子谱,并比较各组Th1/Th2细胞因子谱、外周血白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)水平。结果各组Th1/Th2细胞因子谱、WBC、CRP、PCT水平比较差异有统计学意义(P均<0.01),G-菌感染组IL-6、IL-10和PCT水平均显著高于G+菌感染组(P均<0.05)。Spearman相关性分析显示,细菌血流感染组和G-菌感染组的IL-6和IL-10表达水平与PCT水平表现出较强的相关性,而G+菌感染组仅IL-10表达水平与PCT呈较强相关性,IL-6水平与PCT呈中等程度相关。细菌血流感染组和G+菌感染组IL-6表达水平与CRP水平分别表现中等和较强相关性,而IL-10与CRP水平呈弱相关。受试者工作特征曲线显示,细胞因子谱在评估患者是否发生细菌性血流感染方面均表现出中等到高水平的诊断价值(P均<0.05)。在鉴别G+/G-细菌性血流感染方面,IL-6、IL-10、PCT和CRP曲线下面积分别为0.683、0.702、0.655和0.602,IL-10的诊断效能优于其他指标,但无统计学意义。另外,联合检测的诊断效能未显示优于独立检测。结论流式CBA法检测Th1/Th2细胞因子谱可用于细菌性血流感染的诊断,同时对进一步鉴别G+菌和G-菌感染类型有一定诊断价值。

流式微球阵列技术鉴别诊断多发性骨髓瘤患者感染状态及类型的价值

目的:探析流式微球阵列技术(cytometric bead array,CBA)鉴别诊断多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者感染状态及类型的价值。方法:采用回顾性队列研究方法,收集2019年1月—2022年12月医院收治的214例MM患者临床资料,按照是否感染分为MM合并感染患者作为观察组(110例),MM未感染患者作为对照组(104例)。110例感染观察组中,49例为革兰阳性菌感染(G^(+)菌感染组),48例为革兰阴性菌感染(G^(-)菌感染组),13例为真菌感染。所有样本采用CBA检测技术检测Th1/Th2细胞因子谱。比较辅助性T细胞(Th)1/Th2细胞因子谱、C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)水平,观察MM患者未感染及感染状态下Th1/Th2细胞因子谱特征,分析CBA检测技术检测Th1/Th2细胞因子谱评估MM患者感染的价值。结果:观察组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-6、IL-10、CRP和PCT水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组IL-2、IL-4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。G^(-)菌感染组IL-6、IL-10、CRP和PCT水平高于G^(+)菌感染组和真菌感染组,且G^(+)菌感染组IL-6、CRP水平高于真菌感染组,PCT水平低于真菌感染组,差异有统计学意义(P<0.05);感染的3组中IL-2、TNF-α、IFN-γ和IL-4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。绘制受试者工作特征曲线(ROC)显示,TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、CRP和PCT对MM患者感染情况的评估价值均良好,且以IL-6和IL-10的评估价值最为显著;IL-6、IL-10、CRP和PCT评估不同感染类型的MM合并感染患者的价值均良好。结论:相比于传统CRP、PCT等传统指标,CBA技术检测Th1/Th2细胞因子谱对于MM患者早期感染的快速诊断、严重程度评估有重要价值,以TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10水平均明显升高为特征,且有助于进一步辅助鉴别G^(+)菌和G^(-)菌感染类型。

肺癌标志物流式微球阵列的分析性能评价

目的通过探讨检测下限、精密度、特异性、方法学比对和线性范围,评价基于流式细胞仪的肺癌标志物流式微球阵列的分析性能。方法利用流式细胞仪,测试肺癌标志物流式微球阵列试剂盒检测血清中肺癌标志物癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的检测下限、精密度、特异性和线性范围;以蛋白质印迹(Western blotting)法验证抗体识别抗原的专一性;检测血红蛋白、三酰甘油、胆红素对CEA、Cyfra21-1和NSE检测的干扰作用;通过与电化学发光免疫分析法比对,考察了肺癌标志物流式微球阵列的准确性。结果 CEA、Cyfra21-1和NSE的检测下限分别为1.71、3.97、2.27 pg/m L,批内精密度均≤10%,批间精密度均≤15%;特异性结果显示,CEA、Cyfra21-1、NSE的配对抗体能分别专一识别抗原,CEA与同源类似物癌胚抗原相关黏附分子6(CEACAM6)、cyfra21-1与重组人细胞角蛋白18(CK18)、NSE与非神经元特异性烯醇化酶(NNE)无明显交叉反应;三酰甘油、胆红素对血清样本检测无显著干扰作用,500 ng/m L的血红蛋白能够明显干扰Cyfra21-1(P<0.05)和NSE(P<0.05)的检测;流式微球阵列和电化学发光免疫分析的CEA、Cyfra21-1、NSE检测结果的相关系数值分别为0.984 2、0.962 2、0.982 0;CEA、Cyfra21-1、NSE的线性范围分别为355.76 pg/m L^367.74 ng/m L、87.89 pg/m L^107.8 ng/m L、90.12 pg/m L^86.07 ng/m L。结论肺癌标志物流式微球阵列的分析性能符合要求。

细胞因子对血流感染的早期预测价值研究

目的探讨细胞因子12项对临床血流感染的早期应用价值。方法收集北京清华长庚医院从2023年5月至2024年1月所有血培养阳性的患者标本,通过基质辅助激光解吸电离的飞行时间质谱技术(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)或细菌鉴定卡鉴别血流感染细菌菌种,通过纳入和排除标准进行筛选后,包括革兰氏阴性细菌(Gram-negative,G-)感染患者55例,革兰氏阳性细菌(Gram-positive,G+)感染患者46例。通过贝克曼流式细胞微球阵列法(cytometry bead array,CBA)检测G-与G+两组患者血流感染同期血浆中细胞因子12项水平,筛选出鉴别G-与G+细菌有显著性差异的细胞因子,并通过ROC曲线比较不同细胞因子及组合鉴别G-菌与G+菌的诊断效能,获取最佳临界值及其灵敏度和特异性。结果G-菌感染组IL-6、IL-8、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-α血浆水平显著高于G+菌感染组(P<0.05)。作6种细胞因子受试者工作曲线(receiver operator characteristic curve,ROC),IL-6鉴别G-/G+菌的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.796,最佳cut-off值为115.29pg/mL,诊断灵敏度为72.7%,特异性为82.6%;IL-8鉴别G-/G+菌的AUC为0.670,最佳cut-off值为55.75pg/mL,诊断灵敏度为85.5%,特异性为50.0%;IL-10鉴别G-/G+菌的AUC为0.715,最佳cut-off值33.62pg/mL,诊断灵敏度为52.7%,特异性为84.8%;IL-17鉴别G-/G+菌的AUC为0.561,最佳cut-off值2.41pg/mL,诊断灵敏度为70.9%,特异性为67.0%;TNF-α鉴别G-/G+菌的AUC为0.716,最佳cut-off值1.75pg/mL,诊断灵敏度为49.1%,特异性为78.3%;IFN-α鉴别G-/G+菌的AUC为0.641,cut-off值1.79pg/mL,诊断灵敏度为58.2%,特异性为83.6%;IL-6、IL-8、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-α6项联合鉴别G-与G+菌感染的AUC为0.817,灵敏度为63.6%,特异性为89.1%,诊断效能优于单个细胞因子。结论细胞因子联合模型辅助临床早期鉴别G-/G+菌血流感染,为临床早期抗生素选择提供依据。

T淋巴细胞相关细胞因子在儿童免疫性血小板减少症转归中的意义

目的检测原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿外周血T淋巴细胞相关细胞因子水平,分析其在儿童ITP患儿临床预后评估中的意义。方法选择2016年7月至2017年12月新乡医学院第一附属医院儿内科收治的ITP患儿108例为研究对象,根据病情转归分为新诊断ITP组(n=67)、持续性ITP组(n=25)及慢性ITP组(n=16);选择同期体检健康儿童40例作为对照组。采用流式微球阵列技术(CBA)检测ITP患儿治疗前、慢性ITP患儿治疗后12个月及对照组受试者血清白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A水平,分析其与儿童ITP预后的关系。结果新诊断ITP组、持续性ITP组、慢性ITP组患儿血清IL-2、IL-17A水平高于对照组(P<0.05),慢性ITP组患儿血清IL-2水平高于新诊断ITP组、持续性ITP组(P<0.05),慢性ITP组患儿血清IL-17A水平高于新诊断ITP组(P<0.05);新诊断ITP组、持续性ITP组、慢性ITP组患儿血清IL-4、IL-10水平低于对照组(P<0.05),慢性ITP组患儿血清IL-4、IL-10水平低于新诊断ITP组(P<0.05);4组受试者血清IFN-γ、TNF、IL-6水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。慢性ITP患儿治疗后12个月血清IL-2、IL-6、INF-γ、IL-4、IL-10、TNF、IL-17A水平与治疗前比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论ITP患儿血清IL-2、IL-17A水平升高,IL-4、IL-10水平降低,在慢性ITP患儿更显著,可能提示与疾病呈慢性发展有关,有助于判断ITP患儿病情转归。

HIV-1感染通过诱导IL-6促进可溶性PD-1的表达

目的探索艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者血浆中可溶性程序性细胞死亡受体1(sPD-1)表达水平增高的原因。方法采用流式微球阵列多重蛋白定量检测技术,检测HIV-1感染者(HIV组)和健康人(HD组)外周血13种炎症性细胞因子的含量,分析其与血浆sPD-1水平的相关性;体外分析相关细胞因子对外周血单个核细胞sPD-1表达水平的影响。结果 HIV组(n=31)血浆sPD-1蛋白含量平均(295.21±167.7) pg/mL,显著高于HD组(n=30)的(104.69±72.04)pg/mL(P<0.000 1);此外,HIV组血浆γ干扰素(IFN-γ)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)、人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10、IL-12、IL-33等7种炎症性细胞因子含量显著高于HD组,且MCP-1(P<0.000 1,r=0.581 2)和IL-6(P=0.006 1,r=0.350 1)含量与血清sPD-1水平呈正相关,而重组人IL-6可显著增强健康人外周血单个核细胞表达sPD-1(P=0.000 3)。结论 HIV-1可能通过诱导炎症性细胞因子IL-6的分泌,进而促进sPD-1的表达。