用流式细胞仪检测活体鲍倍性

分别取皱纹盘鲍 (Haliotisdiscushannai)足肌和血液制样 ,经DAPI染色后 ,用PartecPAS -Ⅲ型流式细胞仪测定其倍性 ,试验证明三倍体鲍的DNA相对含量是二倍体的 1 5倍 ,切足法和抽取血液法两种制样方法均能得到满意结果 。

流式细胞术(FCM)在贝类倍性检测中的应用

对某种生物来说 ,体内细胞核内所含的DNA量总是一定的。利用流式细胞仪(FCM)可在短时间内准确测出细胞中DNA的含量 ,鉴别有机体的倍性。作者系统地介绍了用流式细胞仪检测鲍鱼、牡蛎、扇贝等经济贝类倍性的方法 ,包括机械法、化学法、抽取血液法及固定贝样的制备法等。另外 ,还报道了实验中新发现的一些现象 ,如牡蛎嵌合体及诱导过程中的非整倍体等。

大鼠骨髓嗜多染红细胞微核的流式细胞仪自动化检测

背景与目的 :建立一种基于单激光流式细胞仪的大鼠骨髓嗜多染红细胞微核率自动化检测方法。材料与方法 :以环磷酰胺诱导雄性Wistar大鼠微核形成 ,采用吖啶橙(acridineorange,AO)荧光染色 ,分别用荧光显微镜及单激光流式细胞仪检测大鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及正染红细胞微核率。结果 :以前置角散射光(FSC)和DNA荧光(FL1)作图 ,大鼠骨髓细胞被分成明显的五个细胞群———有核细胞、嗜多染红细胞、正染红细胞、含微核的嗜多染红细胞及含微核的正染红细胞 ;经环磷酰胺处理的大鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及正染红细胞微核率均呈现良好的剂量_反应关系及时效关系 ;人工显微镜计数结果与流式细胞仪检测结果具有良好的相关性(R=0.949 ,P<0.01) ,二者的曲线拟合方程为 ^Y=1.0967+1.0639X(R=0.949 ,P<0.01)。结论

人外周血网织红细胞微核的流式细胞仪自动化检测

背景与目的 :建立一种基于单激光流式细胞仪的人外周血网织红细胞微核率自动化检测方法。材料与方法 :在本室已建立的大鼠骨髓嗜多染红细胞微核流式细胞仪自动化检测体系基础上 ,使用磁式细胞分选技术 ,富集并分离人外周血中的网织红细胞 ,采用吖啶橙(acridineorange,AO)荧光染色 ,用流式仪检测人外周血中的网织红细胞微核率。结果 :磁式细胞分选技术分离到的CD71阳性红细胞占网织红细胞总量的20 %至90 %,产量在不同个体之间存在显著差异 ,但同一个体其分离效果几乎没有差异 ;网织红细胞经过富集后的人外周血样本被分成明显的五个细胞群———网织红细胞、含微核的网织红细胞、成熟红细胞、含微核的成熟红细胞以及有核细胞 ;7名健康人外周血网织红细胞微核率平均值为2.36‰ ,10名接受累积放疗剂量0、4、10、20、30、40及50Gy后的鼻咽癌患者外周血网织红细胞微核率平均值分别为2.97‰、29.37‰、57.90‰、69.05‰、62.58‰、51.19‰及50.07‰。 结论 :成功建立了基于单激光流式细胞仪的人外周血网织红细胞微核率自动化检测体系。

流式细胞仪检测缺氧/缺血神经细胞凋亡的研究

目的 :研究人神经母细胞瘤细胞株 (SII- SY5Y)缺氧 /缺血后凋亡细胞的百分率及细胞周期的变化。方法 :用流式细胞检测技术 ,用培养的连续细胞系细胞株 ,建立缺氧 /缺血诱导的神经细胞凋亡模型 ,观察随缺氧程度的加重 ,凋亡细胞百分率的变化。结果 :细胞缺氧 /缺血培养 8h可诱导细胞凋亡。流式细胞仪检测结果显示 :在 G1峰前出现一个 G1亚峰 ,为凋亡峰 (Ap峰 ) ,随缺氧程度的加重 ,其凋亡比率递增。细胞周期分析则显示 S及 G2期逐渐下降 ,与凋亡的百分率呈负相关。结论 :缺氧 /缺血损伤可致培养的神经细胞凋亡 ,凋亡比率与缺氧程度呈正相关。缺氧缺血损伤可引起细胞周期的变化 ,G1亚峰峰值与 S、G2期的峰值呈负相关。提示 :缺氧 /缺血损伤引起细胞凋亡过程中 ,细胞增殖及分裂处于抑制状态 ;凋亡是神经细胞缺氧 /缺血损伤的重要死亡形式。

应用流式细胞仪检测细胞凋亡的4种方法的比较

[目的]比较4种测定细胞凋亡方法的优缺点。[方法]应用流式细胞仪,分别采用PI单染法、Annexin V-FITC/PI复染法、罗丹明123染色法及Fluo-3染色法测定细胞凋亡。[结果]每种分析方法均有自己优势和不足,在检测过程中应进行多参数分析。[结论]该研究可为后续研究提供试验方法支持。

乳腺癌患者外周血多项免疫指标的流式细胞仪检测及其临床意义

通过用流式细胞仪检测不同临床分期的乳腺癌患者术前术后外周血中多项免疫指标：ＣＤ＋３，ＣＤ＋４，ＣＤ＋８，ＣＤ＋１９，ＣＤ＋１６的淋巴细胞及ｒδＴ细胞所占比例，了解不同临床分期的患者免疫功能状态及其术前术后的变化。结果表明：乳癌患者免疫功能普遍紊乱，特别是细胞免疫功能明显低下，临床分期越晚，这种表现越明显，而术后患者免疫功能有一定改善，因而，流式细胞仪测定上述多项免疫指标，对了解乳腺癌患者病情发展及预后转归有一定的临床意义。

流式细胞仪检测铁皮石斛核DNA初探

目的利用流式细胞仪建立一套快速检测铁皮石斛核DNA的方法,为铁皮石斛倍性育种提供技术支持。方法以二倍体铁皮石斛为试材,通过优化实验材料用量、提取液用量、离心时间、染色剂用量、染色时间对离体培养的铁皮石斛新鲜幼嫩叶片进行核DNA检测。结果表明铁皮石斛最佳流式细胞术条件为叶片150 mg、Otto提取缓冲液2 ml、2 000 r/min离心8 min、PI含量50μg/ml、孵化50min。碎片峰较少,变异系数(CV)低。结论筛选出了较为快速、准确的利用流式细胞仪检测铁皮石斛倍性的方法。

流式细胞仪检测网织血小板的临床意义

血小板(PLT)减少引起的出血是血液系统疾病最常见的临床表现之一.血小板减少的主要原因有血小板生成减少和血小板消耗或破坏过多.网织血小板(RP)是富含核糖核酸类似于网织红细胞的最年轻的血小板.RP的数目反映了人体内血小板的更新速度、血小板的增生情况以及巨核细胞的动力学.本文研究RP在原发性血小板减少性紫癜(ITP)等血小板减少性疾病中的诊断价值,动态观察了ITP和重型再生障碍性贫血(重型再障)治疗后RP变化,探讨RP对临床诊断和用药的指导价值.

流式细胞仪检测HLA-B_(27)抗原初探

目的 建立一种快速、准确的HLA B2 7检测技术。方法 利用流式细胞仪 (FCM)检测HLA B2 7抗原 ,并将结果与基因定型法比较 ,74例临床样本分别用FCM法、PCR ASP基因定型法检测HLA B2 7抗原和基因。结果 FCM法有 2 2例HLA B2 7阳性 ,5 2例阴性 ,与PCR ASP法结果比较 ,阳性符合率 88% ,阴性符合率 10 0 % ,总观察一致率 95 .9% ,二种检测方法无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 可以认为 ,FCM法检测HLA B2 7具有快速灵敏、多参数检测等优点 ,针对不同的样本来源和临床要求 ,与PCR ASP法配合使用 。

慢性胃炎胃黏膜细胞DNA含量和增殖活性的流式细胞仪检测

背景慢性萎缩性胃炎是一种胃癌癌前状态,研究表明正常胃黏膜、癌前病变和胃癌细胞的DNA含量随病变的进展而逐渐增高。目的应用流式细胞仪检测慢性胃炎胃黏膜细胞的DNA含量和增殖活性,探讨两者在慢性胃炎发生、发展过程中的临床意义。方法选取90例经胃镜检查诊断为慢性胃炎者的胃黏膜活检标本,制备单细胞悬液,应用流式细胞仪进行细胞DNA含量和增殖活性检测。结果所有慢性胃炎胃黏膜细胞的DNA倍体类型均为二倍体,但慢性萎缩性胃炎和慢性萎缩性胃炎伴肠化生胃黏膜细胞的增殖指数(PI)较慢性非萎缩性胃炎显著增高(P<0.05)。除慢性非萎缩性胃炎外,其余慢性胃炎组幽门螺杆菌(H.pylori)阳性患者胃黏膜细胞的PI值均较阴性患者显著增高(P<0.05)。结论慢性萎缩性胃炎和H.pylori阳性慢性胃炎胃黏膜细胞的增殖活性显著增高。应用流式细胞仪检测胃黏膜细胞的DNA含量和增殖活性,也许能成为胃癌癌前状态和癌前病变病理诊断的参考指标。

流式细胞仪检测急性脊髓损伤患者外周血T淋巴细胞亚群

应用免疫荧光标记流式细胞仪检测 15例急性 SCI患者外周血淋巴细胞 CD3、CD4、CD8表达的变化 ,与正常人群进行比较。结果发现急性 SCI患者 T细胞 CD3、CD4和 CD4 / CD8比值显著低于正常组 (P<0 .0 1)。这表明急性脊髓损伤后机体T细胞免疫功能受到严重损伤 ,可能与脊髓损伤后机体易受感染状态有一定联系。

流式细胞仪检测乳腺癌DNA含量及倍体(附387例报告)

目的通过对 387例乳腺癌细胞及其中 4 0例癌旁组织的DNA含量及倍体检测结果进行分析 ,了解其临床应用价值。方法采用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM )测定 387例乳腺癌细胞DNA含量及倍体 ,以及其中 4 0例癌旁组织的DNA含量及倍体 ,对照临床资料进行分析。结果乳腺癌组DNA含量及异倍体率、S期细胞百分比分别为 :1.6 8± 0 .5 1、76 .4 9%、15 .2 6± 6 .2 8,癌旁组织组DNA含量及异倍体率、S期细胞百分比分别为 :1.12± 0 .16、12 .5 %、3.12± 0 .86 ,差异明显 (P <0 .0 0 1) ,乳腺癌组明显高于癌旁组织组。乳腺癌组按病理分类及区域淋巴结转移数目分类不同 ,其检测结果各有特点。结论流式细胞仪乳腺癌细胞DNA含量及倍体检测及细胞动力学的分析 ,对研究乳腺癌的生物学特征 ,了解疾病预后、指导临床综合治疗具有重要价值。

流式细胞仪检测中细胞DNA样品制备的探讨

为了获得适合流式细胞仪检测的样品。通过碘化丙啶标记和流式细胞仪对食管癌细胞内DNA含量分布进行分析 ,在不同的时间内对血液中淋巴细胞内DNA含量的测定结果进行研究。结果显示 :结构完整的细胞DNA的荧光点图形成二倍体、四倍体的区域。组A各样品具有良好一致性 ,1～ 3天内差异小 ;组B各样品差异较大。因此细胞的完整性是DNA含量检测的基本条件。细胞经PI染色后若不能及时检测 ,可避光、4℃放置 1～ 3天仍可获得较理想的实验结果。

流式细胞仪检测血小板表面膜蛋白

目的 :探讨对流式细胞仪检测血小板表面膜蛋白中可能出现的问题。方法 :试管中加入抗血小板表面膜蛋白相应抗体及富血小板血浆 (PlateletRichPlasma ,PRP)孵育洗涤后上机测定。结果 :血小板表面膜蛋白测定受样品采集、抗凝剂选择、试剂种类、正确设计及图像分析等因素的影响。结论 :为保证测定结果的准确性 ,应尽快按质控要求完善保证措施 ,建立本单位参考值 。

穿刺活检联合流式细胞仪检测对恶性淋巴瘤诊断和分型临床研究

目的探讨穿刺活检联合流式细胞仪检测对恶性淋巴瘤诊断和分型的情况。方法回顾性分析2009年3月～2012年3月在我市两所医院就诊的恶性淋巴瘤患者62例,均进行流式细胞仪检测和穿刺活检。结果应用流式细胞仪检测结果为:骨髓受累者55例,其中非霍奇金淋巴瘤45例,霍奇金淋巴瘤10例;应用穿刺活检检测结果为:骨髓受累者28例,其中6例在流式细胞仪检测中未检测出;具有统计学差异(P<0.05)。结论应用流式细胞仪检测比应用穿刺活检法有更高的准确度,但也有假阴性的现象,所以应该将穿刺活检联合流式细胞仪进行检测,这样能提高准确度。