流式细胞仪检测缺氧/缺血神经细胞凋亡的研究

目的 :研究人神经母细胞瘤细胞株 (SII- SY5Y)缺氧 /缺血后凋亡细胞的百分率及细胞周期的变化。方法 :用流式细胞检测技术 ,用培养的连续细胞系细胞株 ,建立缺氧 /缺血诱导的神经细胞凋亡模型 ,观察随缺氧程度的加重 ,凋亡细胞百分率的变化。结果 :细胞缺氧 /缺血培养 8h可诱导细胞凋亡。流式细胞仪检测结果显示 :在 G1峰前出现一个 G1亚峰 ,为凋亡峰 (Ap峰 ) ,随缺氧程度的加重 ,其凋亡比率递增。细胞周期分析则显示 S及 G2期逐渐下降 ,与凋亡的百分率呈负相关。结论 :缺氧 /缺血损伤可致培养的神经细胞凋亡 ,凋亡比率与缺氧程度呈正相关。缺氧缺血损伤可引起细胞周期的变化 ,G1亚峰峰值与 S、G2期的峰值呈负相关。提示 :缺氧 /缺血损伤引起细胞凋亡过程中 ,细胞增殖及分裂处于抑制状态 ;凋亡是神经细胞缺氧 /缺血损伤的重要死亡形式。

流式细胞仪检测外周血树突状细胞及临床应用

目的建立简便可靠的外周血树突状细胞DC1、DC2亚群检测方法,探讨DC1、DC2亚群在慢性乙型肝炎患者中改变的意义。方法用流式细胞仪检测27名健康人、29例慢性乙型肝炎患者及19例肝炎肝硬化患者外周血树突状细胞亚群。DC1不表达lin(CD19、CD20、CD56、CD14、CD3),但高表达HLA-DR及CD11c;DC2不表达lin(CD19、CD20、CD56、CD14、CD3),高表达HLA-DR及CD123。结果健康人组外周血DC1为(0.28±0.07)%,绝对计数为(18.6±5.3)×106/L,DC2为(0.22±0.09)%,绝对计数为(14.4±5.8)×106/L。慢性肝炎组DC1变化不明显(P>0.05),DC2百分比和绝对数显著下降(P<0.005),DC1/DC2升高(P<0.005)。肝炎肝硬化患者组DC1、DC2与对照组比较均明显减少(P<0.005)。结论流式细胞仪检测外周血树突状细胞亚群简便、可靠,适合于临床常规开展。DC1、DC2检测在慢性乙型肝炎和肝硬化患者的疾病进程及机体免疫状况评价方面具有重要的临床价值。

慢性胃炎胃黏膜细胞DNA含量和增殖活性的流式细胞仪检测

背景慢性萎缩性胃炎是一种胃癌癌前状态,研究表明正常胃黏膜、癌前病变和胃癌细胞的DNA含量随病变的进展而逐渐增高。目的应用流式细胞仪检测慢性胃炎胃黏膜细胞的DNA含量和增殖活性,探讨两者在慢性胃炎发生、发展过程中的临床意义。方法选取90例经胃镜检查诊断为慢性胃炎者的胃黏膜活检标本,制备单细胞悬液,应用流式细胞仪进行细胞DNA含量和增殖活性检测。结果所有慢性胃炎胃黏膜细胞的DNA倍体类型均为二倍体,但慢性萎缩性胃炎和慢性萎缩性胃炎伴肠化生胃黏膜细胞的增殖指数(PI)较慢性非萎缩性胃炎显著增高(P<0.05)。除慢性非萎缩性胃炎外,其余慢性胃炎组幽门螺杆菌(H.pylori)阳性患者胃黏膜细胞的PI值均较阴性患者显著增高(P<0.05)。结论慢性萎缩性胃炎和H.pylori阳性慢性胃炎胃黏膜细胞的增殖活性显著增高。应用流式细胞仪检测胃黏膜细胞的DNA含量和增殖活性,也许能成为胃癌癌前状态和癌前病变病理诊断的参考指标。

流式细胞仪检测乳腺癌DNA含量及倍体(附387例报告)

目的通过对 387例乳腺癌细胞及其中 4 0例癌旁组织的DNA含量及倍体检测结果进行分析 ,了解其临床应用价值。方法采用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM )测定 387例乳腺癌细胞DNA含量及倍体 ,以及其中 4 0例癌旁组织的DNA含量及倍体 ,对照临床资料进行分析。结果乳腺癌组DNA含量及异倍体率、S期细胞百分比分别为 :1.6 8± 0 .5 1、76 .4 9%、15 .2 6± 6 .2 8,癌旁组织组DNA含量及异倍体率、S期细胞百分比分别为 :1.12± 0 .16、12 .5 %、3.12± 0 .86 ,差异明显 (P <0 .0 0 1) ,乳腺癌组明显高于癌旁组织组。乳腺癌组按病理分类及区域淋巴结转移数目分类不同 ,其检测结果各有特点。结论流式细胞仪乳腺癌细胞DNA含量及倍体检测及细胞动力学的分析 ,对研究乳腺癌的生物学特征 ,了解疾病预后、指导临床综合治疗具有重要价值。

流式细胞仪检测哮喘患儿外周血单核细胞表型的变化

目的:探讨用流式细胞仪检测哮喘患儿外周血中单核细胞表型特征,以了解它与气管中巨噬细胞之间的相互关系和作用.方法:采用全血单克隆抗体CD14、CD16、HLA-DR、CD44、CD69三色或双色荧光标记方法,用流式细胞仪检测细胞的阳性百分率和平均荧光强度.结果:哮喘患儿CD14和CD14+/CD16+中的CD16细胞的平均荧光强度、CD14+/CD16+和CD16-粒细胞的百分率都明显高于健康对照组.结论:哮喘患儿外周血中的单核细胞具有组织中巨噬细胞的特征.

Sysmex XE-2100血液分析仪外周血造血干细胞检测与CD34^+流式细胞仪检测的相关性

目前．已有许多疾病可应用干细胞（stem cells）来治疗．而由于脐带血中的干细胞（cord blood stern cells）是属较后期、功能限制在一个系统的造血干细胞，因此在临床应用上，主要用于血液恶性病、先天性代谢缺陷以及免疫缺损病变．以及用来恢复因化学治疗或放射线治疗受伤害的骨髓功能。因此需要一种方便快捷的方法来检测外周血造血干细胞．我们这次将评价Sysmex XE-2100血液分析仪外周血造血干细胞的检测功能。

微波热凝诱导骨骼肌细胞凋亡的流式细胞仪检测

目的 观察微波热凝后骨骼肌外周细胞凋亡情况。方法 暴露兔胫前肌,行微波热凝,分别于热凝后0、4、8、12、24 h取热凝区外周3 mm处组织,流式细胞仪检测凋亡率以及热凝区域组织学观察。结果 热凝部位与正常组织界限明显,光镜下可分为4区即电极插入区、中央区、过渡区和正常参考区。流式细胞仪检测显示,热凝可诱导外周区域出现细胞凋亡,热凝后8 h达到最高峰,凋亡率可达45.94％。结论 微波热凝可诱导细胞凋亡的发生。

穿刺活检联合流式细胞仪检测对恶性淋巴瘤诊断和分型临床研究

目的探讨穿刺活检联合流式细胞仪检测对恶性淋巴瘤诊断和分型的情况。方法回顾性分析2009年3月～2012年3月在我市两所医院就诊的恶性淋巴瘤患者62例,均进行流式细胞仪检测和穿刺活检。结果应用流式细胞仪检测结果为:骨髓受累者55例,其中非霍奇金淋巴瘤45例,霍奇金淋巴瘤10例;应用穿刺活检检测结果为:骨髓受累者28例,其中6例在流式细胞仪检测中未检测出;具有统计学差异(P<0.05)。结论应用流式细胞仪检测比应用穿刺活检法有更高的准确度,但也有假阴性的现象,所以应该将穿刺活检联合流式细胞仪进行检测,这样能提高准确度。

自配试剂在COULTER流式细胞仪检测HLA-B27中的应用探讨

目的探讨美国COULTER流式细胞仪试剂国产化问题。方法将自配全血溶解试剂、鞘液及清洗液的理化性质、精密度、准确度与原装试剂进行对比分析。结果自配试剂与原装试剂理化性质一致,采用自配试剂连续10天测定20份病人标本HLA-B27并与原装试剂对比,结果两者呈高度正相关r>0.98。结论自配美国COULTER流式细胞仪试剂完全可以代替原装进口试剂进行HLA-B27的检测。

流式细胞仪检测人外周血淋巴细胞亚型的实验探讨

流式细胞仪(flowcytometry,FCM)是单克隆抗体技术、激光技术、电子计算机技术等学科高度发展、综合的结晶,FCM的应用标志着医学生物学研究进入了细胞和分子水平,为微观认识细胞提供了精密、准确的方法。测定琳巴细胞亚型对了解机体的免疫功能状态,指导临床诊疗等均有重要的参考价值。采用流式细胞仪检测,具有简单、快速、计数细胞量大、重复性好、灵敏度高等优点,但在实验中也存在很多影响因素。为此,对可能出现的问题作简要探讨。

流式细胞仪检测肾小球疾病患者尿巨噬细胞的应用研究

目的 研究尿巨噬细胞计数与肾小球肾炎细胞增生程度的关系。方法 用流式细胞仪 (FCM )测定 36例肾小球肾炎患者尿巨噬细胞计数和尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值 ,并与肾活检结果进行对照。结果 2 2例增生性肾炎患者尿巨噬细胞计数为 5 6 1 7± 185 7个 /ml,尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值为 4 8± 1 7;14例非增生性肾炎患者尿巨噬细胞计数为 2 8 5± 15 3个 /ml,尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值为 0 6± 0 2。增生性肾炎患者的两项指标均明显高于非增生性肾炎组 (P <0 0 1) ,且在IgA肾病中随系膜细胞增生程度的加重 ,尿巨噬细胞计数则明显升高 (P <0 0 5 )。结论 尿巨噬细胞计数和尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值可作为判断肾小球细胞增生程度的指标之一。

流式细胞仪检测人类白细胞抗原-B27与微量细胞毒法的比较

人类白细胞抗原-B27（human leucocyte antigen，HIL-B27）是HLA-I类分子基因中B位点上的1个等位基因，是经典的HIA位点编码的I类主要组织相容性复合物基因产物之一。表达在细胞表面的I类分子是由HIL编码的重链、B2微球蛋白和内源性多肽形成的稳定的三聚体复合物，其相对分子质量为44000。现已证实HIL-B27有11个亚类，其中HIL-B2705是大多数非亚洲人群的主要亚类，而HIL-B2704则是中国人和许多其他亚洲人群最多见的亚类。该基因与多种疾病有相关性，与强直性脊柱炎（ankylosing spoildylitis，AS）相关性最高。

流式细胞仪检测HIV感染者细胞内病毒复制研究现状

关于艾滋病病毒（HIV）感染者细胞内病毒检测的研究是HIV研究领域近年来的一个新进展。准确掌握艾滋病病毒感染者细胞内病毒复制的状况对于了解疾病的进展，评价临床治疗效果具有重要意义。以下对这一新理论作一简要综述。