成像流式细胞术和免疫荧光技术检测成纤维样滑膜细胞Ahr入核的比较

目的探究成像流式细胞术和免疫荧光技术检测成纤维样滑膜细胞中Ahr入核的差别。方法用15%的DMEM培养人来源的成纤维样滑膜细胞细胞株MH7A,分别用激光共聚焦显微镜和量化成像流式细胞仪(ImageStreamX MarkⅡ)检测空白对照组、Kyn组和Kyn+CH223191组对MH7A中Ahr的入核水平,并采用非参数检验比较两种检测技术检测结果的相关性。结果与空白对照组相比,免疫荧光技术和成像流式细胞术测得的MH7A细胞中Kyn组和Kyn+CH223191组Ahr入核能力增加(P<0.05),两种实验方法测得的三组结果相关性良好,R 2值分别是0.8638、0.9287和0.9018,差异有统计学意义(P<0.05)。结论相较于免疫荧光技术的操作和结果,成像流式细胞术数据处理比较复杂,但所得结果精确度高,避免了实验者的主观性,减少实验误差。

人工智能辅助多参数流式细胞术检测淋巴细胞亚群免疫表型的应用分析

探讨淋巴细胞亚群(LS)免疫表型应用人工智能辅助多参数流式细胞术(FCM)检测的价值。方法 选择医院检验科2023年1月~2024年1月采集的外周血样本研究,样本量为1000例,均接受多参数FCM检测LS免疫表型,包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞等,分别予以传统人工分析、人工智能辅助分析(基于高斯混合模型的多维数据聚类算法),对两种分析方法的一致性进行评价。结果 人工智能辅助分析结果和传统人工分析结果通过一致性检测有974例、未通过一致性检测有26例,一致性检测通过比例为97.40%;人工智能辅助分析单个样本时间均值为1.39±0.21s,传统人工分析单个样本时间均值为55.63±6.94s,差异显著(P<0.05);人工智能辅助分析与传统人工分析结果在不同LS免疫表型差值上对比,CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+/CD3+CD8+比值、CD3-CD19+上有明显差异(P<0.05),但其余项目上对比无差异(P>0.05);人工智能辅助分析质控重复系数、95%CI分别为2.8411%、2.7255%~2.9541%,均在±5%可接受临界值范围,提示人工智能辅助分析测定LS免疫表型百分比可快速检出,且具备良好的重复性。结论 LS免疫表型检测中应用人工智能辅助多参数FCM检测,经人工智能辅助分析不仅可快速分析结果,而且分析结果准确度高,有良好的重复性,与传统人工分析结果一致性高,但可明显缩短分析时间,能满足临床应用基本需求,有应用价值。

流式细胞分析术的教学改革初探

流式细胞分析术是一种多参数、定量且高效的检测分析技术,是科学研究重要的技术手段之一,也是研究生必须掌握的一门实验技术。现行流式细胞分析术的教学存在“重理论、轻实践”的问题,学生在具体科研中难以开展相关实验项目。本文探索推行以研究需求为导向的流式教学改革,充分考虑专业差异,多维的教学模式极大调动了学生的自主能动性,提高了学生科研工作的实际能力。

流式细胞术快速检测T细胞亚群和NKT细胞亚群的免疫荧光变化

利用单克隆抗体与免疫荧光结合的特异性,探讨流式细胞仪检测T细胞亚群和NKT细胞亚群免疫荧光变化。选用培养C57BL/7小鼠脾细胞分别经SEB.COA活化,收集体外扩增10d淋巴细胞为效应细胞,经免疫荧光探针FITC、PI、PerCP和APC标记可同时检测各亚群免疫荧光变化,结果表明SEB活化主要是NKT细胞,它们与COA活化NKT细胞亚群相比比率显著增高。COA活化细胞主要是T细胞亚群。依据免疫荧光原理应用流式细胞术,为进一步研究NKT细胞结构和功能提供一种快速的检测手段。

流式细胞计在免疫荧光测量中去除死细胞影响的方法

用流式细胞计测量免疫荧光的活细胞样品时,死细胞的存在会影响实验结果的准确性。因此消除死细胞的影响对于提高实验结果的可靠性是必要的。我们用低浓度的PI溶液去染死细胞,并利用专门的计算机软件来消除死细胞的影响。本文通过对三种细胞五个不同细胞活性的样品进行测试分析,证明了此方法对于消除死细胞的影响,提高实验结果的准确性是有效的。

流式细胞术双色免疫荧光标记观察寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群

目的了解寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群的变化。方法应用流式细胞仪双色免疫荧光标记,检测98例寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群并与102名正常人进行比较。结果银屑病患者外周血CD4+细胞百分数显著高于正常人对照组(P<0.05);NK细胞百分数显著低于正常人对照组(P<0.01),寻常性进行期银屑病患者T细胞和CD4+细胞显著高于静止期银屑病患者(P<0.05),进行期银屑病患者T细胞、B细胞、CD4+细胞百分数均显著高于正常人对照组(P<0.001),NK细胞显著低于正常人对照组(P<0.001)。静止期银屑病患者与正常人对照组相比淋巴细胞亚群各项指标无明显差异。结论寻常性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群的变化主要表现在T、B淋巴细胞特别是CD4+细胞的升高和NK细胞的降低。

流式细胞术免疫荧光测量中的直标及间标

直接标记和间接标记是免疫荧光测量中两种不同的标记方法。在流式细胞计测量中，一般说来，直接标记不易引入样品的非特异性结合，因此引入干扰少，样品的数据好处理，而间接标记由于有放大作用，容易引入非特异结合的干扰，严重时所得数据无法区分特异及非特异信号，造成数据分析的混乱，通过样品实测比较，认为在流式细胞计测量中应用直接样品更为合适。

流式细胞术在鉴别良恶性浆膜腔积液的应用现状与进展

流式细胞分析术是一种高效快速的细胞分析技术,可通过检测细胞表面的标记物或细胞内生物分子来分析细胞的性质和功能。在浆膜腔积液的诊断中,流式细胞术可帮助区分肿瘤细胞和非肿瘤细胞,从而辅助良恶性的鉴别诊断。该研究主要就流式细胞术的基本原理、在浆膜腔积液诊断中的应用及研究现状进行全面的分析和总结,并探讨其优缺点及未来发展方向。

基于流式细胞术与基因组Survey分析白及基因组大小及特征

目的研究白及的核型、基因组大小等特征信息。方法双色荧光原位杂交分析白及的染色体核型;以番茄为内参,流式细胞术检测白及基因组大小;基因组Survey分析获得白及基因组大小、杂合率、GC含量等生物学信息。结果DAPI荧光染色及端粒荧光原位杂交发现白及染色体为二倍体,染色体类型为sm和st型,核型类型为2C。rDNA荧光原位杂交发现白及染色体有1对显示较强的5S rDNA位点和1对18S rDNA位点,5S rDNA位点位于2个同源染色体间隙,18S rDNA位点位于染色体短臂的次缢痕部位。白及基因组大小为2.37 Gb,同时全基因Survey分析得到有效数据60.11 Gb,经过K-mer分析修正及Genomescope评估,白及基因组大小约为2.53 Gb,杂合率约为1.099%,重复序列约占67.45%,GC含量为36.11%,总测序深度为23.73。结论本研究首次获得白及基于5S rDNA和18S rDNA荧光原位杂交核型及增补了白及属植物的基因组大小数据,为白及后续的物种分类、种群进化研究及全基因组测序、组装及去冗余处理等工作提供基础参考数据。

流式细胞仪用于监测HIV/AIDS患者CD4+T淋巴细胞计数的临床应用

本项探究专注于流式细胞仪对HIV/AIDS病例中CD4+ T淋巴细胞数量的有效监测。方法 借助流式细胞仪科技,对HIV/AIDS病例中CD4+ T淋巴细胞亚群进行逐一剖析。样本涵盖了40位身心健康的人士,25位患有轻度至中度HIV/AIDS的病例以及25位深受重度HIV/AIDS影响的病例。结果 无差别于病例的严重程度,轻中度或重度HIV/AIDS病例的CD4+ T细胞估计数均比健康个体有明显下降,尤其在CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+亚群,这种差距表现得更为明显。统计分析结果中,参照组与重度组在CD8+CD45RA+(t=6.571, p<0.001)和CD8+CD45RO+(t=9.581, p<0.001)亚群中的差异具有统计学意义。结论 流式细胞仪技术能有效监测HIV/AIDS患者的CD4+ T淋巴细胞计数,对不同病情程度的患者提供精确的细胞亚群分析,有助于医生更好地理解病情进展和治疗响应,从而为患者提供更合适的治疗方案。

62例急性白血病流式细胞仪免疫分型的特点及预后分析

目的探讨流式细胞仪免疫分型在急性白血病(AL)患者中的表达特点、诊断价值及其预后意义,为建立个体化的治疗提供指导。方法回顾性对我院收治的62例初发AL患者的骨髓细胞形态学、流式细胞仪免疫分型检测结果进行对比分析,了解二者诊断相符率。结合细胞遗传学及分子生物学检查结果进行预后分析,之后分组观察患者治疗反应及生存情况。结果 5例急性白血病患者通过骨髓细胞形态学和组织化学检查未能明确分型诊断,经流式细胞仪免疫分型检测后确定。2例骨髓细胞形态与流式细胞仪免疫分型结果不符,结合细胞遗传学特点,予以修正诊断。AML及ALL均存在跨系表达抗原,AML常见的跨系抗原表达为CD56、CD7、CD19。ALL常见跨系抗原表达为CD13、CD15、CD33。部分分子遗传学异常可对应有异常抗原表达,AML中CD7表达常伴有FLT3/ITD突变。AML伴t(8;21)(q22;q22)/AML1-ETO阳性患者中,60%左右表达CD19。在疗效观察中发现伴有预后不良染色体核型或分子遗传学标志的老年性急性髄系白血病患者(年龄≥70岁)中,非化疗组总生存期(OS)与化疗组相比无差异性(P>0.05)。结论流式细胞仪免疫分型检测可以提高急性白血病分型诊断的准确性,结合细胞遗传学和分子生物学可有效地指导临床制定治疗方案和预后判断。

犬冠状病毒时间分辨免疫荧光分析方法的建立及初步应用

探索建立犬冠状病毒(CCV)的时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)方法并制备试剂盒,并对试剂盒的性能进行初步的评价。本研究将抗CCV的单克隆抗体(MAb)8D6作为包被抗体,用Eu^(3+)标记的7E10 mAb作为检测抗体,制备双抗体夹心法TRFIA试剂盒,并对试剂盒的准确度、特异性、重复性、稳定性、临床样本检测等性能进行评估。本研究制备的CCV时间分辨免疫荧光试剂盒灵敏度为0.68 ng/mL;各浓度CCV标准品在不同水平的稀释度回收率在94.6%~105.6%;同步检测CPV、CD、CPIV、CAV-1标准品均为阴性,特异性好;批内CV为1.91%~5.03%,批间CV为1.82%~6.03%,重复性好;试剂盒在4℃保存6个月,37℃保存7 d后,试剂盒各项性能均无明显变化;临床样本检测结果与RT-PCR方法结果一致。本研究制备的CCV TRFIA试剂盒具有灵敏度、准确度高,重复性、稳定性良好的优点,能够对CCV的临床样本进行大量的筛查,为CCV患病犬的早期确诊提供了一种全新的技术手段。

荧光编码微球—流式细胞和生化分析技术及其最新发展

简述了流式细胞术的发展历史和工作原理。对该技术与荧光编码微球技术相结合而发展起来的高通量细胞和生化分析技术及其最新发展作了评述。流式细胞术是一种对流动液体中排成单列的细胞逐个进行检测的技术 通过检测得到相应细胞的光散射和荧光信号 进而测定细胞的大小、形状、DNA、RNA、表面受体、酶活性、膜通透性和钙流量等 在癌症和爱滋病研究 新药开发、干细胞和基因治疗、遗传学、家畜性别选择、农作物新品种开发等方面部有广泛应用。采用顺序进样技术,则可不必加压而实现少量样品的自动分析和作亚秒水平分子相互作用的动力学测量。将该技术与近年发展起来的荧光染料编码微球技术相结合,则成为一种可以与生物芯片技术相媲美的多组分同时分析技术。采用微流控芯片技术和发光半导体量子点编码微球技术 进一步改善了方法的适用性,某些主要性能甚至超过了生物芯片技术,有望从研究实验室逐步进入临床实验室,最终进入病房和寻常百姓家 成为防病、诊断和监护病人的重要手段。

流式细胞术在淋巴瘤免疫表型分析中的作用

目的探讨流式细胞术免疫表型分析在淋巴瘤诊断中的应用。方法采用流式细胞术对92例淋巴瘤患者进行免疫表型分析。结果在92例受检者中,B细胞NHL67例,T细胞NHL25例。B细胞NHL标记抗原出现频率较高的为CD19、CD22;T细胞NHL标记抗原出现频率最高的为CD7。结论流式细胞术在淋巴瘤的诊断分型方面有重要意义。

磁珠酶联免疫分析和流式细胞仪检测强直性脊柱炎患者HLA—B27比较

目的探讨磁珠酶联免疫分析（immunomagnetic separation and enzyme-linked immunosorbent assay，IMS-ELISA）法检测人类白细胞抗原B27（human leukocyte antigen BZ7，HLA-B27）在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）临床诊断中的应用价值。方法同时用IMS-ELISA法和流式细胞仪（flow eytometry，FCM），对2007年5月～2011年2月在孝感市中心医院就诊的320例AS疑似患者进行HLA—B27检测，根据临床确诊结果和检测结果计算两种方法的结果符合率、敏感度、特异度及阴性预测值、阳性预测值。结果临床确诊AS患者178例，非AS患者142位。IMS-ELISA法争FCM检测结果符合率为98．4%。两法的敏感度、特异度及阴性预测值、阳性预测值分着0为0．972，0．989（X2=0．13，P=0．085）；0．951，0．965（x2=0．02，P=0．098）；0．964，0．986（x2=0．03，P=0．079）；0．961，0．972（x2=0．00，P=0．102），两两比较其差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论IMS—ELISA法和FCM在检测HLA—B27上比较，结果符合率高，敏感度和特异度也较高，临床适用性相接近，适宜在基层医院推广应用。

流式细胞免疫表型分析在恶性淋巴瘤诊断中的应用研究

目的:探讨流式细胞免疫表型分析在恶性淋巴瘤诊断中的价值。方法:128例淋巴结肿大病例同时行细胞病理学、组织病理学、免疫组化及流式细胞免疫表型分析,其中38例同时行淋巴结细针穿刺针吸细胞学检查。结果:共诊断42例恶性淋巴瘤,其中霍奇金淋巴瘤4例、非霍奇金淋巴瘤32例,淋巴结细针穿刺针吸细胞学结合流式细胞免疫表型分析与组织病理结合免疫组化检查比较,对非霍奇金淋巴瘤诊断差异无统计学意义。结论:流式细胞免疫表型分析在非霍奇金淋巴瘤诊断中可发挥重要作用,是诊断非霍奇金淋巴瘤的重要辅助手段。

免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能评价

目的评价免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能,为临床选用不同方法的检测试剂盒提供依据。方法选取2022年11月至2023年2月广西中医药大学第一附属医院110例患者的血清作为试验样本,以美国Critical Diagnostics公司的Presage ST2试剂为对照,验证巴迪泰(广西)生物科技有限公司的免疫荧光分析法ST2蛋白检测试剂。使用线性回归分析法分析两种方法的相关性,通过Kappa检验分析两种方法定性判断检测结果的一致性,采用Bland-Altman Plot分析两种方法定量检测结果的一致性。结果线性回归分析法拟合的一元线性回归方程为y=0.9878x+1.6977,相关系数r=0.9959;Kappa检验的Kappa系数=0.901;Bland-Altman Plot分析结果显示,Mean±1.96s范围内检测结果的占比为96.36%(106/110)。结论巴迪泰(广西)免疫荧光分析法的ST2试剂与酶联免疫吸附法的Presage ST2试剂检测ST2蛋白的相关性密切、一致性高,等效性良好,均可满足临床检验需求。

绿色荧光染料SYTO 16在脑肿瘤细胞流式细胞分析中的应用

背景与目的:确定肿瘤细胞DNA的含量在恶性肿瘤的恶性程度分级诊断中很重要。本研究比较SYTO 16与碘化丙啶(PI)两种染料的异同,旨在找到一种适合于在脑肿瘤活细胞中检测DNA含量的染料,研究使用SYTO 16染色后用流式细胞仪分选出的活细胞不同周期细胞的特性。方法:用FACS Calibar流式细胞仪测定DNA含量。用FACS Vantage SE流式细胞仪根据不同的细胞周期分选细胞。免疫组化染色。结果:SYTO 16能用于DNA含量的测定,但测定的结果与PI测定的结果不同,测定的G0/G1期的比例高于PI测定的结果,(P<0.05)。SYTO 16能用于活细胞的DNA含量的测定,测定活细胞的结果与固定后细胞的结果比较,二者无显著性差异(P>0.05)。两种荧光是不同的,通过不同时相的观察还可以看出SYTO染色后的细胞其荧光消失较快。结论:SYTO16可以用于脑胶质瘤细胞DNA含量的测定并且可用于活细胞。如果染色后稳定性及线粒体、细胞粘连等方面的影响能避免的话,可用于细胞的分选。

流式细胞分析仪在细胞因子检验中的应用价值

目的分析流式细胞分析仪在细胞因子检验中应用的价值。方法选取2023年2—5月在江苏盛泽医院接受健康体检者和门诊住院患者(共112例)血浆标本,运用流式细胞分析仪分析血浆标本的8项细胞因子精密度、准确度和线性范围验证实验结果。结果低值和高值连续5 d检测结果变异系数(coefficient of variability,CV)均≤15%。低值和高值连续5 d检测结果准确度均符合(偏差≤±15%)范围。8项细胞因子检测试剂盒在流式细胞分析仪上检测结果均在范围内呈线性,满足准确度(r2≥0.98)的标准范围,r2分别为0.9988、1.0000、1.0000、0.9998、1.0000、0.9994、0.9995、0.9843。结论流式细胞分析仪在细胞因子检测中的应用的准确度、可靠性和重复性较好,能满足临床需求,可广泛应用于实验室相关检测当中。