流式细胞术DNA倍体分析在耳鼻咽喉肿瘤快速诊断中的意义

目的:了解流式细胞术DNA倍体分析在耳鼻咽喉-头颈外科肿瘤辅助诊断中的价值。方法:咽喉部新生物(其中炎症组18例,非典型增生组32例,癌组56例包括鼻咽癌21例、喉癌31例、下咽癌4例)作流式细胞术DNA倍体分析和病理学检查,比较2种检查方法的异同。结果:(1)异倍体在炎症组中检出率为11.11%(2/18),在非典型增生组中检出率为93.75%(30/32),在癌组中检出率为83.92%(47/56);(2)炎症组与非典型增生组相比,异倍体差异有显著性(P<0.01),两组间S期细胞差异无显著性(P>0.01);(3)炎症组与癌组比,异倍体差异有显著性(P<0.01),两组间S期细胞差异有显著性(P<0.01);(4)非典型增生组与癌组相比,异倍体差异无显著性(P>0.01),S期细胞差异有显著性(P<0.01)。结论:DNA倍体分析能快速准确诊断耳鼻咽喉-头颈外科肿瘤。

流式细胞术DNA倍体分析在恶性胸腔积液中诊断的价值

目的 探讨流式细胞术(FCM)DNA倍体分析在恶性胸腔积液中的诊断价值。方法 以102例胸腔积液患者(其中恶性45例,良性57例)的胸水分别作流式细胞术DNA倍体分析,癌胚抗原(CEA)及脱落细胞学检测。比较三者之间的敏感性、特导性。结果 1.FCM、CEA、脱落细胞学检测在良、恶性胸腔积液中的阳性率分别为3.5％、82.2％、15.8％、71.1％、7.0％、46.7％,三种方法均有显著性差异(P值均<0.05)。2.FCM、CEA、脱落细胞学检测的敏感性分别为82.2％、71.1％、46.7％,FCM与CEA之间无显著性差异(P>0.05),FCM与脱落细胞学之间差异有显著性(P<0.05)。3.FCM、CEA、脱落细胞学检测的特异性分别为96.5％、84.2％、94.7％,FCM与CEA之间有显著性差异(P<0.05),FCM与脱落细胞学之间无显著性差异(P<0.05)。结论 流式细胞术DNA倍体分析在恶性胸腔积液中其敏感性优于脱落细胞学检测,特异性优于CEA检测,是鉴别良、恶性胸腔积液较理想的检测方法。

基于流式细胞术的蜘蛛抱蛋属植物倍性检测和核DNA含量测定体系的建立

为建立适用于蜘蛛抱蛋属植物的倍性检测及其核DNA含量的流式细胞术方法,以蜘蛛抱蛋属植物成熟叶片为材料,比较了WPB解离液、LB01解离液、Galbraith’s解离液以及改良Galbraith’s解离液制备的细胞核悬液的效果。结果表明:改良Galbraith’s解离液能够更广泛地适用于蜘蛛抱蛋属植物成熟叶片的细胞核悬液的制备且效果较好。利用改良Galbraith’s解离液对12种13个居群的蜘蛛抱蛋属植物进行倍性检测,并通过染色体制片计数法进行验证。结果表明:12种蜘蛛抱蛋属植物的DNA含量的荧光强度峰值范围为1753078.81~5817826.99。其中,11种二倍体植物的峰值范围为1753078.81~2937690.80,四倍体辐花蜘蛛抱蛋的峰值为3892503.69,六倍体泰国蜘蛛抱蛋的峰值为5817826.99。此外,以葱为内标,对以上蜘蛛抱蛋属植物的核DNA含量进行测定和估算,首次估测了11种蜘蛛抱蛋植物的核DNA含量,蜘蛛抱蛋的DNA含量与已有报道的结果相近。其中,二倍体植物的核DNA含量为14.16~18.73 Gb;四倍体辐花蜘蛛抱蛋的核DNA含量为28.33 Gb;六倍体泰国蜘蛛抱蛋的核DNA含量为43.03 Gb。结果可为蜘蛛抱蛋属植物的遗传育种研究、全基因组研究以及喀斯特植物的起源与演化研究提供重要科学依据。

利用流式细胞术鉴定桦木染色体倍性和DNA含量

基于流式细胞术(FCM)研究体系,构建能快速、准确鉴定桦木属植物倍性和测定DNA含量的研究体系,是测定不同桦木属植物倍性与基因组大小的有效方法。使用流式细胞术检测7种桦树属类物种,以物种不同生长状态(嫩叶、幼叶、成熟叶)为实验材料,不同存储方式(常温、冷藏和聚乙烯吡咯烷酮保存PVP)进行实验处理,对9种常用的裂解液进行筛选与优化。结果表明:桦木属植物DNA含量测定中,新鲜幼叶以1%PVP浸泡常温保存,并使用MgSO_(4)裂解液制备细胞核悬浮液上机效果最佳;桦木属植物中,基因组倍性依次为黑桦((2.09±0.04)Gb,8倍体)>坚桦((1.53±0.08)Gb,6倍体)>光皮桦((0.87±0.05)Gb,4倍体)=岳桦((0.80±0.07)Gb,4倍体)>垂枝桦((0.46±0.03)Gb,2倍体)=河桦((0.51±0.01)Gb,2倍体)。因此,桦木属植物DNA倍性和DNA含量可以通过FCM研究体系进行测定,且3倍体((0.66±0.02)Gb)子代的鉴定结果表明光皮桦与河桦之间不存在生殖隔离。

利用流式细胞术鉴定甜樱桃砧木细胞核DNA含量和染色体倍性

【目的】研究建立甜樱桃砧木DNA倍性的快速鉴定方法。【方法】以甜樱桃砧木试管苗本溪山樱、‘Colt’、‘兰丁1号’、‘吉塞拉6号’和‘ZY-1’为试材,利用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测甜樱桃砧木细胞染色体的倍性,并通过传统的染色体制片的方法对其结果进行验证。【结果】不同砧木品种间细胞核DNA含量差异显著,且随着倍性水平的增加,细胞核DNA相对含量随之成倍增加。流式细胞术检测结果与染色体制片检测结果一致。【结论】利用流式细胞仪测定甜樱桃砧木的细胞核DNA含量,具有样品制备简单,测量快速,准确度高等优点,是进行倍性鉴定的理想方法。

流式细胞术检测DNA倍体数对鉴别良恶性肿瘤价值的Meta分析

目的探讨流式细胞术（FCM）检测DNA倍体数在良恶性肿瘤鉴别中的应用价值，为临床恶性肿瘤诊断手段的选择提供理论依据。方法由2位研究者独立完成文献筛选，并依据纳入和排除标准，对检索到的所有文献进行二次筛选。使用Meta DiSc1．4对纳入研究的文献数据进行分析，包括异质性检验、敏感度、特异度、诊断比值比（DOR）及受试者工作特征曲线（SROC）等。结果经初筛、补充及二次筛选，共12篇文献纳入研究，包括1340例研究对象，其中恶性肿瘤组516例，良性对照组824例。异质性检验结果显示：灵敏度对数与（1-特异度）对数的Spearman相关系数为-0．343，P=0．275，不存在阈值效应。DOR曲线提示：Cochran．Q=26．49，P=0．0055，表明存在非阈值效应引起的异质性。采用随机效应模型计算合并统计量：敏感度为0．72（95％CI：0．68-0．76，I^2=50．1％）；特异度为0．84（95％CI：0．81～0．86，I^2=65．5％）。绘制DNA倍体数检测良恶性肿瘤的SROC曲线，结果显示：AUC=0．8453，Q＊=0．7768。结论FCM检测DNA异倍体对诊断恶性肿瘤具有较高的准确性，可作为临床良恶性肿瘤鉴别的一项重要辅助手段。

胃肠道间质瘤石蜡组织DNA倍体及CD117流式细胞术分析

目的研究流式细胞术(FCM)检测DNA倍体和CD117对胃肠道间质瘤(GIST)的诊断价值。方法对52例GIST和10例食管平滑肌瘤组织的石蜡包埋块切片经过脱蜡水化,酶消化处理,制成单细胞悬液。同时,制备8例健康体检者外周血单细胞悬液,用FCM分别检测DNA倍体和CD117表达。结果 GIST瘤组织细胞出现异倍体阳性率23.1%(12/52),其中极低度/低度危险组未出现异倍体,中度/高度危险组出现12例,两组异倍体表达阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。52例GIST瘤组织CD117均高表达,食管平滑肌瘤CD117弱表达,两组间CD117表达荧光强度差异有统计学意义(P<0.05)。GIST极低度/低度危险组CD117荧光强度与中度/高度危险组相比,CD117表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DNA异倍体可提示GIST的中高危险度,FCM检测组织单细胞CD117表达可用于GIST的快速筛查。

流式细胞术检测免疫表型和分析DNA倍体对非霍奇金淋巴瘤患者的临床价值

目的:探讨流式细胞术免疫表型检测及DNA倍体分析对于非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者的临床价值。方法:收集2007年8月至2015年3月我院收治的NHL患者80例为研究对象,作为观察组。选取同时期收治的20例反应性淋巴结增生患者为对照组。应用流式细胞术检测免疫表型和分析DNA倍体。结果:观察组患者DNA异倍体检出率、DAN指数(DI)值和SPF均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。NHL-Ⅰ、NHL-Ⅱ患者SPF、DI值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);NHL-Ⅲ和NHL-Ⅳ患者的SPF、DI值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。低度恶性组、中高恶性组患者SPF和DI值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);中高恶性组患者SPF和DI值与低度恶性组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:流式细胞术免疫表型检测并进行DNA倍体分析,通过DI和SPF水平,能够反映肿瘤增殖情况和患者病情的恶化程度、指导预后。

流式细胞术检测宫颈细胞DNA倍体在宫颈病变中的应用

目的:探讨流式细胞术检测宫颈细胞DNA倍体在宫颈病变中的应用价值。方法:对290例患者的液基细胞学检测后剩余细胞行流式细胞术DNA倍体分析,其中非典型鳞状上皮增生(ASCUS)120例、低度宫颈上皮内瘤变(LSIL)90例、高度宫颈上皮内瘤变(HSIL)60例、鳞状上皮癌(SCC)20例。结果:①异倍体在ASCUS组、LSIL组、HSIL组、SCC组中检出率分别为3.3%、31.1%、85.0%、96.7%。②LSIL、HSIL、SCC 3组的异倍体率与ASCUS组比较有显著性差异(P<0.05);HSIL、SCC 2组的异倍体率与LSIL组比较差异显著(P<0.05);HSIL、SCC 2组的异倍体率之间无统计学差异(P>0.05)。结论:DNA倍体分析可以作为宫颈病变早期的筛查手段。

流式细胞术及DNA倍体分析在胃肿瘤研究中的应用

目的了解胃癌的生物学行为.方法采用流式细胞术测定68例胃癌细胞DNA含量、S期及G2/M期细胞比率,并与胃癌生物学特性进行分析.结果二倍体癌浆膜受侵者S期细胞比率明显高于未受侵者(P<0.05),团块生长者G2/M期细胞比率明显高于弥漫状生长者(P<0.05)、淋巴结转移阴性和转移枚数少于5枚者(P<0.05),淋巴结转移至第2站,以远者G2/M期细胞比率明显高于淋巴结转移阴性和转移至第1站者(P<0.05).结论胃癌细胞DNA含量和细胞比率与胃癌生物学行为有一定关系.

流式细胞术相关性分析急性髓系白血病p21（H－ras）与DNA倍体

用流式免疫法分析３０例初治急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞ｒａｓ癌基因产物ｐ２１蛋白和ＤＮＡ倍体的关系。发现ｐ２１表达阴性者１７例，阳性者１３例。ｐ２１阳性者骨髓与外周血原始细胞百分比较高，外周白细胞数较低。ｐ２１表达不影响疗效。ｐ２１阳性及ＣＲ期有异倍体者易复发。认为ｐ２１对白血病发生、发展有一定作用。

应用流式细胞术探讨大肠癌细胞DNA倍体类型与预后的关系

目的 探讨大肠癌细胞DNA倍体类型与预后的关系。方法 应用流式细胞术对125例大肠癌术后标本的石蜡包埋组织块进行DNA含量分析。结果 异倍体肿瘤占63.2％(79/125),二倍体肿瘤占36.8％(46/125)。二倍体肿瘤的DNA含量明显低于异倍体肿瘤;二倍体肿瘤的G_0/G_1期细胞数明显高于异倍体肿瘤,而S、G_2M期细胞数则明显低于异倍体肿瘤。大肠癌DNA倍体类型与病人一般临床病理特征如:年龄、性别、病理分级,Dukes分期等均无明显关系,但与病人的预后有明显的关系:二倍体肿瘤病人的五年生存率为76.8％;非二倍体肿瘤病人的五年生存率为23.9％,二者经统计学处理的极显著差异(P<0.01)。在同一临床分期及病理分级中,也显示同样的结果。结论 大肠癌DNA倍体性的分析可以作为判定病人预后的一项客观指标,是对Dukes分期及病理组织学分级的一个极有价值的补充指标。

流式细胞术的DNA倍体分析对肺癌早期诊断和预后判断的研究

应用流式细胞术(FCM)对40例肺癌患者经纤维支气管镜活检的新鲜肺癌组织进行DNA倍体检测,探讨肺癌细胞DNA倍体型、DNA指数(DI)、细胞增殖指数(PI)与临床诊断、组织类型、临床分期及预后判断之间的关系。结果表明:(1)肺癌细胞DNA倍体分布为二倍体占22.5％,多倍体占25％,非整倍体占52.5％。(2)细胞增殖周期显示S期比例明显增高,占26.34％。(3)FCM诊断阳性率为87.5％,DI值与临床分期密切相关。(4)倍体类型与肺癌的预后有关。

胸水DNA倍体联合细胞角蛋白-19片段检测对良恶性肺部疾病的鉴别诊断意义

目的探讨胸水DNA倍体联合细胞角蛋白-19片段(CYFRA-21-1)检测对良恶性肺部疾病的鉴别诊断意义。方法回顾性分析2021年5月1日至2023年12月1日浙江省荣军医院收治确诊为非小细胞肺癌伴胸水的患者78例作为病例组,同时纳入同期入院存在胸水的肺部良性疾病患者50例作为对照组。对所有患者的胸水及外周血标本进行DNA倍体及CYFRA-21-1阳性率的检测,并统计比较外周血及胸水标本中DNA倍体、CYFRA-21-1单一检测与联合检测的效能。结果病例组胸水、外周血的DNA倍体和CYFRA-21-1阳性率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);病例组胸水DNA倍体和CYFRA-21-1的阳性率均明显高于外周血,差异均有统计学意义(均P<0.05);胸水DNA倍体联合CYFRA-21-1鉴别良恶性肺部疾病的AUC为0.980,大于单一指标胸水DNA倍体的AUC 0.964和胸水CYFRA-21-1的AUC 0.900,差异均有统计学意义(均P<0.05);胸水DNA倍体联合CYFRA-21-1检测鉴别良恶性肺部疾病的灵敏度为1.00,特异度为0.96,准确度为0.98。结论肺癌患者胸水出现DNA异常增殖及CYFRA-21-1阳性率增高且远早于外周血标本,胸水DNA倍体及胸水CYFRA-21-1联合检测有助于提高良恶性肺部疾病的鉴别诊断效能,值得予以重视应用。

非何杰金氏淋巴瘤的恶性程度与DNA倍体关系的初步分析——36例流式细胞技术分析

本文以石蜡包埋的淋巴结组织材料,采用流式细胞技术分析了36例组织学已确诊的非何杰金氏淋巴瘤的细胞倍体,并以5例慢性淋巴结炎为对照。按照NHL的Working Formulation的分类法:属低度恶性6例中的二倍体与非整倍体各3例。DNA指数均值为1.36±0.88。中度恶性11例中,二倍体5例,非整倍体6例,DNA指数均值为1.37±1.22。高度恶性19例,中二倍体1例,非整倍体18例,DNA指数均值1.80±1.02。经统计学处理:低度恶性比中度恶性P>0.05,无显著性差异,中度恶性与高度恶性P<0.05,有显著性差异。研究显示,通过流式细胞技术,分析NHL的倍体,能从分子生物学水平,克服光镜观察之不足处,比较客观的揭示NHL的恶性度,它有利于临床治疗及观察预后。

流式细胞术检测卵巢恶性肿瘤DNA倍体、细胞周期及Ki67表达

目的：研究卵巢恶性肿瘤：DNA倍体、细胞周期及Ki67含量的表达，探讨其与病理类型，临床分期的关系。方法:采用流式细胞术(Flow cytometry FCM)对54例经病理细胞学确诊的卵巢恶性肿瘤手术新鲜标本进行DNA倍体、细胞周期(S期)、增殖核抗原(Ki67)的检测。结果：DNA异倍体总阳性率为55．6％，临床分I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的DNA异倍体阳性率分别是57．1％、80．0％、52．5％、50．0％。异倍体阳性率最高是浆液性腺癌(70．0％)，其次是粘液性腺癌(50．0％)，不能分类的腺癌(43．8％)。细胞周期(S期)二倍体组少于5％，明显低于异倍体组，有显著差异(P<0．05)。卵巢恶性肿瘤Ki67含量与正常人比较有显著差异。结论：卵巢恶性肿瘤DNA倍体的阳性率、细胞周期、Ki67表达三个指标在各临床分期组，三大病理类型组之间比较接近，只有异倍体阳性组的细胞周期明显高于二倍体组的细胞周期(P<0．05)。提示异倍体阳性的肿瘤细胞增殖比二倍体肿瘤活跃，但对预后的评价还需一段时间的随访观察。

流式细胞术分析舌体鳞癌细胞DNA倍体和细胞周期的意义

目的探讨舌体鳞癌细胞的DNA倍体、细胞周期特征,并分析其临床意义。方法采用流式细胞术测定40例舌体鳞癌标本及10例正常舌体组织中的异倍体、DNA指数、增殖指数和S期细胞比例,并研究这些参数与肿瘤组织分期之间的关系。结果40例舌体鳞癌中,异倍体检出率为70%(28/40);舌体鳞癌与正常舌组织相比,DI、SPF有显著性差异,相对于低分化组而言,高、中分化组的DI、SPF及PI有显著性差异。结论流式细胞仪可用来分析舌体鳞癌的DNA;DI可以鉴别细胞的良恶性;DI、SPF、PI可以作为恶性程度及预后的指标。