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寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒H1N1/PR8株感染致小鼠肺炎的作用
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作者 张明惠 米尔扎提·麦麦提 +5 位作者 郝梦 赵璐 季志红 周利润 傅紫盈 马璇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3154-3159,共6页
目的探讨寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒H1N1/PR8株感染小鼠肺炎的影响。方法小鼠随机分为正常组、模型组、达菲组(27.5 mg/kg)、连花清瘟颗粒组(3.3 g/kg)和寒喘祖帕低、中、高剂量组(0.38、0.76、1.52 g/kg)。除正常组外,其余组小鼠均采... 目的探讨寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒H1N1/PR8株感染小鼠肺炎的影响。方法小鼠随机分为正常组、模型组、达菲组(27.5 mg/kg)、连花清瘟颗粒组(3.3 g/kg)和寒喘祖帕低、中、高剂量组(0.38、0.76、1.52 g/kg)。除正常组外,其余组小鼠均采用甲型流感病毒H1N1/PR8株病毒液经滴鼻感染建立肺炎模型。各组连续给予相应药物4 d,取样。测定小鼠体质量、肺指数及抑制率、流感病毒载量、14 d内小鼠死亡率、生存时间;ELISA法检测肺组织中IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α水平,HE染色观察肺组织病理改变并评分。结果寒喘祖帕颗粒中、高剂量组可降低感染后小鼠肺指数,其肺指数抑制率分别为24.01%、32.63%;可降低死亡率,其死亡保护率分别为44.44%、50%。寒喘祖帕低、中、高剂量组均可降低小鼠肺组织中IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平,改善小鼠肺部病变,延长平均存活天数,生命延长率分别为17.84%、24.32%、19.46%。结论寒喘祖帕颗粒可改善流感病毒H1N1/PR8株感染致小鼠肺炎症状,可降低死亡率、延长平均存活天数。 展开更多
关键词 寒喘祖帕颗粒 甲型流感病毒H1N1/pr8 肺炎
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清肺饮对流感病毒A/PR/8/34(H_1N_1)感染小白鼠血凝素抗体、神经氨酸酶抗体的影响 被引量:4
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作者 王成祥 王惠芳 +2 位作者 沈杏生 姜良铎 杜怀棠 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期191-192,共2页
关键词 清肺饮 流感病毒 a/pr/8/34 感染 血凝素抗体 神经氨酸酶抗体
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复方中药对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响 被引量:2
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作者 王学文 刘佐民 +1 位作者 王劲松 李永清 《实验动物科学》 2020年第6期30-36,共7页
目的观察复方中药对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响。方法90只BALB/c小鼠随机分为6组,每组15只,分别为空白对照组、模型对照组、盐酸金刚烷胺对照组(100 mg/kg)、复方中药高剂量组(1.5 g/kg)、中剂量组(0... 目的观察复方中药对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响。方法90只BALB/c小鼠随机分为6组,每组15只,分别为空白对照组、模型对照组、盐酸金刚烷胺对照组(100 mg/kg)、复方中药高剂量组(1.5 g/kg)、中剂量组(0.75 g/kg)与低剂量组(0.375 g/kg)组。中药组连续灌胃2 d后,空白对照组滴鼻生理盐水,其他5组小鼠滴鼻流感病毒感染建立流感病毒小鼠模型,模型建立4 h后空白对照组和模型对照组灌胃去离子水,药物组灌胃不同剂量药物,连续5 d。灌胃结束后无菌取血,小鼠安乐死,取胸腺和脾脏,计算胸腺指数和脾脏指数;采用MTT测定各组的T、B淋巴细胞转化率;ELISA检测肺组织中的细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平。结果与空白对照组相比,模型对照组胸腺指数和脾脏指数,T、B淋巴细胞A值,IL-10和IFN-γ显著下降,TNF-α和IL-6显著升高(P<0.01);与模型对照组相比,复方中药中剂量组胸腺指数和脾脏指数,T、B淋巴细胞A值,IL-10和复方中药高剂量组IFN-γ显著增高,复方中药中剂量组IL-6显著下降(P<0.05),复方中药中、低剂量组TNF-α显著下降,IFN-γ显著升高(P<0.01)。结论复方中药通过调节机体淋巴细胞功能和细胞因子分泌水平,从而改善肺部炎症,是治疗病毒性流感的作用机制之一。 展开更多
关键词 复方中药 流感病毒a/pr/8/34(H1N1) 小鼠 免疫功能
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宣肺败毒颗粒增加T细胞数量减轻流感病毒肺炎的机制研究
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作者 袁也 马琳 +3 位作者 赵倩茹 赵荣华 方青帝 王彧 《天津中医药》 CAS 2024年第10期1309-1314,共6页
[目的]确定宣肺败毒颗粒在低温高湿环境下,A/PR/8/34(H1N1)流感病毒肺炎小鼠模型的治疗效果及作用机制。[方法]将ICR小鼠置于具有低温高湿环境的人工气候箱中,滴鼻给予流感病毒(A/PR/8/34)建立流感病毒肺炎模型。造模后第5天对小鼠每日... [目的]确定宣肺败毒颗粒在低温高湿环境下,A/PR/8/34(H1N1)流感病毒肺炎小鼠模型的治疗效果及作用机制。[方法]将ICR小鼠置于具有低温高湿环境的人工气候箱中,滴鼻给予流感病毒(A/PR/8/34)建立流感病毒肺炎模型。造模后第5天对小鼠每日给予宣肺败毒颗粒灌胃5 d,观察记录小鼠的行为学评分、体质量、脏器指数、肺部病毒载量、肺部影像学及形态学变化,蛋白印迹法检测炎症关键蛋白NF-κB的表达变化,流式细胞术检测宣肺败毒颗粒对小鼠免疫应答的调节。[结果]与模型组相比,宣肺败毒颗粒给药后小鼠表现出活跃程度上升、大便性状正常、肺部病毒载量降低、小鼠肺部炎性渗出减少,p-NF-κB P65表达降低,CD4+和CD8+T细胞百分比增高。[结论]宣肺败毒颗粒增加T细胞数量,减轻流感病毒肺炎小鼠的炎症反应。 展开更多
关键词 宣肺败毒颗粒 流感病毒(a/pr/8/34) 流感病毒肺炎 T细胞
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葛根汤颗粒对甲型流感病毒感染小鼠TNFR1/NF-κB/JNK等炎症和免疫指标的影响
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作者 马媛虹 程淼 +15 位作者 王明哲 李长安 于会勇 徐红日 李磊 骆长永 郭雨菲 黄廷轩 赵荣华 高双荣 张敬升 崔晓兰 陶夏莉 张光明 郭姗姗 王成祥 《中国中医急症》 2024年第8期1332-1335,1361,共5页
目的基于PR8感染所致病毒性肺炎小鼠模型,探寻葛根汤颗粒抗流感病毒性肺炎损伤的作用机制。方法32只雌性SPF级ICR小鼠随机分为空白组、模型组、奥司他韦组、葛根汤颗粒组,每组8只。滴鼻法建立PR8毒株感染所致病毒性肺炎小鼠模型,计算肺... 目的基于PR8感染所致病毒性肺炎小鼠模型,探寻葛根汤颗粒抗流感病毒性肺炎损伤的作用机制。方法32只雌性SPF级ICR小鼠随机分为空白组、模型组、奥司他韦组、葛根汤颗粒组,每组8只。滴鼻法建立PR8毒株感染所致病毒性肺炎小鼠模型,计算肺指数和肺指数抑制率,应用光镜观察各组肺组织病理变化,运用ELISA和Western blotting法检测各组肺组织炎性细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM1)和炎性免疫蛋白人肿瘤坏死因子受体-1(TNFR1)、核转录因子-κB(NF-κB)、Jun氨基末端激酶(JNK1)表达情况。结果与模型组比较,奥司他韦组和葛根汤颗粒组可降低小鼠肺指数(P<0.001),葛根汤颗粒组对肺指数抑制效果优于奥司他韦组。病理提示,与模型组比较,葛根汤颗粒组可显著减轻支气管炎症反应渗出,减轻肺泡、肺间质和红细胞渗出。ELISA结果显示,与模型组比较,奥司他韦组和葛根汤颗粒组可显著降低IL-6、ICAM1、VCAM1的表达(P<0.001);与奥司他韦组相比,葛根汤颗粒组IL-6含量降低(P<0.01)。Western blotting结果显示,与模型组比较,奥司他韦组和葛根汤颗粒组可降低TNFR1、JNK1蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),葛根汤颗粒可降低NF-κB蛋白的表达(P<0.05)。结论葛根汤颗粒可以降低甲型流感病毒感染小鼠肺组织中IL-6、ICAM1、VCAM1、TNFR1、NF-κB、JNK等炎性因子和炎性免疫蛋白的表达,调节炎症和免疫紊乱,为仲景经典处方临床应用提供基础理论依据。 展开更多
关键词 甲型流感病毒pr8 肺炎 葛根汤颗粒 细胞因子 炎性免疫介质 病理损伤 小鼠
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黄芩苷对甲型流感病毒PR8株的体外抑制作用研究 被引量:5
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作者 秦笙 莫自耀 +4 位作者 招穗珊 关文达 王玉涛 杨子峰 伍时冠 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期280-283,共4页
目的:研究不同来源黄芩苷对甲型流感病毒PR8株的体外抑制作用。方法:制备流感病毒空斑模型,通过预防保护(病毒吸附前给药)和治疗(病毒吸附后给药)2种模式观察黄芩苷对流感病毒不同阶段的抑制作用并结合神经氨酸酶抑制试验寻找其可能的... 目的:研究不同来源黄芩苷对甲型流感病毒PR8株的体外抑制作用。方法:制备流感病毒空斑模型,通过预防保护(病毒吸附前给药)和治疗(病毒吸附后给药)2种模式观察黄芩苷对流感病毒不同阶段的抑制作用并结合神经氨酸酶抑制试验寻找其可能的作用位点。结果:2种受试黄芩苷样品A和样品B对MDCK细胞毒性(半数有毒浓度,TC50)分别为0.099 mg/mL和0.8 mg/mL;黄芩苷A在预防保护和治疗模式中均未发现明显的病毒抑制作用(IC50>0.3mg/mL);黄芩苷B在预防保护和治疗模式中的半数有效抑制浓度(IC50)分别为0.08和0.045mg/mL(选择指数SI为10和17.7),并对神经氨酸酶(NA)活性显示一定的抑制作用(IC50=51.7μg/mL)。结论:市售商品化黄芩苷B有确定的体外抑制流感病毒PR8株的作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 甲型流感病毒pr8 抑制作用 体外
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热毒宁吸入溶液对甲型流感病毒A/PR/8/H1N1感染所致小鼠病毒性肺炎的药理作用研究 被引量:12
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作者 孙静 赵荣华 +8 位作者 时宇静 张广平 包蕾 耿子涵 宋玲 高云航 李晓璐 郭姗姗 崔晓兰 《中国药物警戒》 2021年第12期1101-1105,共5页
目的探讨热毒宁吸入溶液对甲型流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠致肺炎模型的药理作用,为临床应用提供基础。方法实验动物按体质量随机分为8组,分别为正常对照组、模型对照组、利巴韦林对照组、热毒宁注射给药对照组,热毒宁雾化吸入给药高... 目的探讨热毒宁吸入溶液对甲型流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠致肺炎模型的药理作用,为临床应用提供基础。方法实验动物按体质量随机分为8组,分别为正常对照组、模型对照组、利巴韦林对照组、热毒宁注射给药对照组,热毒宁雾化吸入给药高剂量组0.23 g生药/kg(20 min)、中剂量组0.12 g生药/kg(10 min)、低剂量组0.06 g生药/kg(5 min)和极低剂量组0.03 g生药/kg(2.5 min)。采用甲型流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠致肺炎模型,通过检测肺指数、肺部病理变化及肺组织中病毒载量、炎症因子白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量等指标评价热毒宁吸入溶液治疗流感病毒性肺炎的药理作用。结果热毒宁吸入溶液4个剂量组均可不同程度上降低小鼠肺指数、减轻肺组织病理损伤、降低病毒载量及减少IL-6、TNF-α的含量。结论热毒宁吸入溶液雾化吸入给药对甲型流感病毒A/PR/8/H1N1感染所致小鼠病毒性肺炎具有显著治疗作用。 展开更多
关键词 甲型流感病毒a/pr/8/H1N1 病毒性肺炎 热毒宁 吸入溶液 病毒载量 炎症因子
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高增殖性能犬流感CIV-PR8重组病毒的制备 被引量:2
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作者 周洁文 滕巧泱 +6 位作者 闫丽萍 边延峰 张旭 徐大伟 石迎 周雨霞 李泽君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期518-522,共5页
为获得高效表达犬流感病毒(CIV)HA和NA抗原的疫苗株,本实验通过反向遗传操作技术将A/canine/Zhejiang/01/2010(H3N2)犬流感病毒(简称ZJCIV)的HA和NA基因与A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒(PR8)的6个内部基因进行重组,拯救并获得了一株重... 为获得高效表达犬流感病毒(CIV)HA和NA抗原的疫苗株,本实验通过反向遗传操作技术将A/canine/Zhejiang/01/2010(H3N2)犬流感病毒(简称ZJCIV)的HA和NA基因与A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒(PR8)的6个内部基因进行重组,拯救并获得了一株重组病毒CIV-PR8。分别用含100 EID50的CIV-PR8和ZJCIV感染SPF鸡胚,含2×103TCID50的CIV-PR8和ZJCIV感染MDCK细胞,不同时间段取病毒样品测定血凝效价和TCID50值。两者比较表明,CIV-PR8分别在接种后36 h和48 h时血凝效价达到峰值,鸡胚尿液中效价可达210,为野生病毒株的16倍;细胞上清血凝价可达28,为野生病毒株的4倍;病毒增殖曲线表明通过鸡胚扩增和细胞扩增,CIV-PR8的滴度均高于野生病毒株ZJCIV。结果表明,拯救的CIV-PR8增殖能力明显高于野生病毒株ZJCIV,该重组病毒有望成为犬流感疫苗研制的候选病毒株。 展开更多
关键词 流感 重组犬流感病毒 pr8 血凝效价 病毒滴度
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一个复方中药处方对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠肺损伤的影响 被引量:2
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作者 王学文 朱祥宇 李永清 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期75-80,共6页
目的观察一个复方中药处方对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠所致肺损伤的影响。方法将90只雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、病毒对照组、盐酸金刚烷胺组和复方中药高、中、低剂量组等6组,每组15只。中药组连续灌胃2 d后,小鼠滴鼻感染... 目的观察一个复方中药处方对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠所致肺损伤的影响。方法将90只雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、病毒对照组、盐酸金刚烷胺组和复方中药高、中、低剂量组等6组,每组15只。中药组连续灌胃2 d后,小鼠滴鼻感染建立流感病毒小鼠模型,空白对照组滴鼻生理盐水。病毒感染4 h后各组分别灌胃不同剂量药物或生理盐水,再连续灌胃5 d。感染第5天时,计算各组BALB/c小鼠肺指数,测定肺组织匀浆的血凝滴度,并观察肺组织病理形态学。结果与病毒对照组相比,盐酸金刚烷胺组和复方中药制剂中剂量组肺指数显著降低(P<0.01),复方中药制剂低剂量组和复方中药制剂高剂量组肺指数显著降低(P<0.05);各药物组小鼠肺组织血凝滴度均显著降低(P<0.01);各药物组小鼠肺组织病理形态学均有不同程度的改善。结论本研究所用的复方中药处方对流感病毒A/PR/8/H1N1感染的小鼠平均肺指数和平均血凝滴度有明显的降低作用,对其所致肺损伤有明显的改善作用。 展开更多
关键词 复方中药 流感病毒a/pr/8/H1N1 肺损伤 小鼠
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野生H7N9流感病毒与H7N9/PR8重组病毒的生物学特性比较研究
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作者 曲志远 王增 +4 位作者 马树杰 孔晖晖 施建忠 曾显营 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期668-671,共4页
A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)是高滴度鸡胚适应流感病毒株,WHO 1969年将其推荐为流感病毒疫苗株内部基因供体株,本世纪以来其也被广泛用于H5N1流感疫苗株的内部基因供体株。本研究利用反向遗传技术以携带PB2基因K627E突变的PR8内部基... A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)是高滴度鸡胚适应流感病毒株,WHO 1969年将其推荐为流感病毒疫苗株内部基因供体株,本世纪以来其也被广泛用于H5N1流感疫苗株的内部基因供体株。本研究利用反向遗传技术以携带PB2基因K627E突变的PR8内部基因为骨架,以一株H7N9亚型低致病力禽流感病毒CK/HN的表面基因为供体,并在其HA基因引入V^(186)G和L^(226)Q双点突变,构建了一株重组病毒H7N9(HN)/PR8。固相ELISA受体结合特性分析结果显示,野生病毒CK/HN可同时结合α-2,6-糖链(人源受体成分)和α-2,3-糖链(禽源受体成分),并且与前者的亲和力高于后者;重组病毒H7N9(HN)/PR8对α-2,3-糖链的亲和力明显增高,对α-2,6-糖链的亲和力则显著下降。以10~6鸡胚半数感染量(EID_(50))接种SPF鸡后,CK/HN病毒可在鸡体内复制,通过呼吸道和泄殖腔向外排泄,感染鸡血清均转阳;H7N9(HN)/PR8接种的鸡泄殖腔和呼吸道均无病毒排出,也无血清转阳,表明H7N9(HN)/PR8病毒不能在鸡体内复制。本研究为H7N9疫苗株的构建奠定了重要基础。 展开更多
关键词 H7N9流感病毒 pr8 反向遗传技术 点突变 疫苗株
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高增殖猪流感重组病毒GX1659/PR8的制备与鉴定
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作者 宋祖晨 孟飞 +6 位作者 张丹丹 王飞飞 刘雅茹 陈艳 乔传玲 陈化兰 杨焕良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1103-1107,共5页
为构建一株具有高复制能力的流感病毒疫苗株,本研究利用反向遗传技术以PR8的6个内部基因为骨架,以一株H3N2亚型低致病力猪流感病毒(SIV)GX1659株的HA和NA表面基因为供体,构建了pBD-GX1659-HA和pBD-GX1659-NA重组质粒,转染293T细胞并接种... 为构建一株具有高复制能力的流感病毒疫苗株,本研究利用反向遗传技术以PR8的6个内部基因为骨架,以一株H3N2亚型低致病力猪流感病毒(SIV)GX1659株的HA和NA表面基因为供体,构建了pBD-GX1659-HA和pBD-GX1659-NA重组质粒,转染293T细胞并接种SPF胚,经血凝试验、测序筛选获得了一株重组病毒GX1659/PR8。该重组病毒在鸡胚传20代,血凝价均能达到8 log2以上。每5代病毒的全基因组经PCR和测序鉴定,结果显示,PCR产物均无任何缺失或突变,表明GX1659/PR8具有遗传稳定性。分别利用100 EID_(50)剂量的GX1659和GX1659/PR8感染鸡胚,在不同时间测定鸡胚尿囊液的血凝效价和EID_(50),绘制其生长曲线。结果显示,GX1659和GX1659/PR8分别在接种后60 h和48 h时血凝效价达到峰值,GX1659/PR8效价滴度明显高于亲本病毒GX1659。利用亲本病毒GX1659与重组病毒GX1659/PR8的抗原和阳性血清进行交叉HI试验,测定HI效价及交叉HI效价并对抗原性进行分析。结果显示,亲本病毒GX1659与重组病毒GX1659/PR8抗原性无明显差异。本研究拯救出一株具有稳定遗传性和高增殖性能的H3亚型重组病毒GX1659/PR8,为H3N2亚型流感病毒疫苗株的构建奠定了重要基础。 展开更多
关键词 H3N2流感病毒 pr8 反向遗传技术 生物学特性 疫苗株
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重组高繁殖力疫苗株H5N2(H5/PR8)病毒的制备和鉴定 被引量:6
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作者 施建忠 田国彬 +1 位作者 李雁冰 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期530-534,共5页
作为禽流感疫苗株,不但要求其具有良好的免疫原性,而且要求在生产中具有良好的生长特性,现用的A/Turkey/England/N28/73(H5N2)疫苗株,血凝价28,生长滴度较差。本研究利用自然重组法,预制备一株高繁殖力的预备疫苗株,使它的表面基因血凝... 作为禽流感疫苗株,不但要求其具有良好的免疫原性,而且要求在生产中具有良好的生长特性,现用的A/Turkey/England/N28/73(H5N2)疫苗株,血凝价28,生长滴度较差。本研究利用自然重组法,预制备一株高繁殖力的预备疫苗株,使它的表面基因血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)来源于A/Turkey/England/N28/73(H5N2)毒株,并使其保持原有的良好的免疫原性,内部基因来源于流感病毒PR8,A/Puerto Rico/8/34(H1N1)毒株,并使其重组病毒赋有了流感病毒PR8高繁殖力的特性。实验结果表明,已获得一株高繁殖力的重组流感病毒H5/PR8,血凝价达到211,生长繁殖特性明显增强。抗原性分析显示,H5/PR8重组病毒与亲本毒株H5N2抗原性无明显差异;致病性分析发现,H5/PR8重组病毒的致病能力较亲本毒株H5N2有明显下降。这为疫苗株的改良奠定了坚实的基础,对禽流感灭活疫苗的生产具有重大意义。 展开更多
关键词 流感病毒 重组 H5N2亚型 pr8
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葛根汤颗粒治疗上呼吸道感染所致小鼠病毒性肺炎及死亡保护作用 被引量:5
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作者 赵荣华 孙静 +15 位作者 包蕾 耿子涵 张敬升 庞博 陶夏莉 刘进娜 郭姗姗 徐英莉 李舒冉 周利润 曹姗 陈梦苹 张宇 鲍岩岩 王道涵 崔晓兰 《世界中医药》 CAS 2023年第10期1385-1390,共6页
目的:研究葛根汤颗粒对甲型H_(1)N_(1)流感病毒PR8株感染致小鼠病毒性肺炎模型的治疗及死亡保护作用。方法:采用甲型H1N1流感病毒(PR8株)滴鼻感染小鼠造成病毒性肺炎模型,观察小鼠的肺指数和肺指数抑制率,肺内细支气管及肺组织苏木精-伊... 目的:研究葛根汤颗粒对甲型H_(1)N_(1)流感病毒PR8株感染致小鼠病毒性肺炎模型的治疗及死亡保护作用。方法:采用甲型H1N1流感病毒(PR8株)滴鼻感染小鼠造成病毒性肺炎模型,观察小鼠的肺指数和肺指数抑制率,肺内细支气管及肺组织苏木精-伊红(HE)染色病理切片镜下病变观察及等级评分;同时采用流感病毒PR8毒株滴鼻感染小鼠造成死亡保护模型,观察小鼠感染后2周内的死亡情况,计算小鼠的死亡率、死亡保护率、平均存活天数和生命延长率。结果:葛根汤颗粒高、中剂量组可显著降低模型组小鼠肺指数(P<0.01);葛根汤颗粒高、中剂量组与模型组比较可显著减轻支气管炎症反应渗出状况,红肿相对消退,并且缓解病毒感染所致肺泡、肺间质渗出炎症反应及红细胞渗出情况(P<0.01,P<0.05);模型组小鼠死亡率90%,平均存活天数9.95 d,葛根汤颗粒3个剂量组与模型组比较可显著降低小鼠死亡率,延长小鼠平均存活天数,提高生命延长率(P<0.01,P<0.05)。结论:本研究发现葛根汤颗粒可显著降低病毒性肺炎模型小鼠的肺指数,并显著减轻病毒感染所致的小鼠肺内细支气管及肺局部炎症反应损伤,对模型小鼠的肺部炎症反应有明显的治疗作用;同时可显著降低模型小鼠死亡率,延长平均存活天数,提高生命延长率,对感染小鼠有死亡保护作用。 展开更多
关键词 甲型H_(1)N_(1)流感病毒pr8 小鼠病毒性肺炎 葛根汤颗粒 肺指数 肺组织病理 小鼠死亡保护作用 生命延长率 平均存活天数
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H1N1流感病毒树鼩模型生物学特性的研究 被引量:1
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作者 金亮子 吴芳芳 +7 位作者 邓伟 奎秀莹 罕园园 孙晓梅 仝品芬 李娜 王喜军 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期223-229,共7页
目的建立H1N1流感病毒感染树鼩模型,探讨流感病毒动力学变化和在呼吸系统组织中的分布特征。方法选择3~3.5周岁成年树鼩(Tupaia Belangeri Chinensis)24只,雌雄各半,随机分为空白组(B组)和模型组(M组)各12只,使用H1N1流感病毒每只600μL... 目的建立H1N1流感病毒感染树鼩模型,探讨流感病毒动力学变化和在呼吸系统组织中的分布特征。方法选择3~3.5周岁成年树鼩(Tupaia Belangeri Chinensis)24只,雌雄各半,随机分为空白组(B组)和模型组(M组)各12只,使用H1N1流感病毒每只600μL(1×10^(6.8)TCID50/0.1 mL)经鼻腔感染M组树鼩,在-3~10 d期间每天早晨测量肛温,同时采集咽拭子、鼻拭子和血液样本测定病毒载量。并测定2、4、7 d血液中抗流感的中和抗体。2、3、5、10 d随机处死3只树鼩,采集鼻甲、气管、咽部和肺组织进行病毒载量检测,取3、5、10 d组织进行病理学检测。结果M组的树鼩表现为被毛蓬乱、食欲不振、运动迟缓、体温升高和鼻咽分泌物增加等临床症状;感染后1 d开始可以在呼吸道中检测到病毒载量,3 d血液中出现病毒载量;病理结果显示鼻甲、咽、气管和肺组织中均有一定程度的病理改变。结论树鼩感染流感病毒后出现的临床症状与人类极为相似,所建立的流感树鼩模型对研究流感的发病机制与抗流感药物评价提供了有重要价值的工具。 展开更多
关键词 流感 H1N1 a/pr8/34病毒 树鼩 感染 动物模型
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流感病毒为载体重组病毒株rHCV/FLU的构建及初步评价 被引量:1
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作者 孙芳 胡雪凇 +4 位作者 任天宇 段跃强 王希良 张绍庚 杨鹏辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期13-18,共6页
目的构建及拯救以流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株r HCV/FLU并对其进行评价。方法利用反向遗传学技术,选择流感病毒A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,将HCV 1b亚型的E1抗原基因经序列优化插入到PR8流感病毒NS1片段的特定位置,... 目的构建及拯救以流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株r HCV/FLU并对其进行评价。方法利用反向遗传学技术,选择流感病毒A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,将HCV 1b亚型的E1抗原基因经序列优化插入到PR8流感病毒NS1片段的特定位置,构建重组质粒p NS1-HCV,测序正确的重组质粒p NS1-HCV与PR8的7个重组质粒p HW191-PB2、p HW192-PB1、p HW193-PA、p HW194-HA、p HW195-NP、p HW196-NA、p HW197-M转染共培养的COS-1和MDCK细胞,经拯救、筛选、鉴定获得流感病毒为载体嵌合HCV抗原表位的重组病毒株,命名为r HCV/FLU,并通过血凝试验、RT-PCR、Western blot、电镜观察病毒形态等方法对重组病毒鉴定。接着,重组病毒接种SPF鸡胚扩大培养、超滤浓缩、蔗糖密度梯度离心纯化。纯化获得的重组病毒抗原,滴鼻免疫Balb/c小鼠,0 d、14 d免疫2次,设置104TCID50、105TCID50、106TCID503个剂量组,初步评价其免疫效果。结果成功拯救重组病毒株r HCV/FLU,血凝效价(HA)为29-10,病毒滴度Log10(TCID50/ml)为6.5。滴鼻免疫小鼠二免后14 d取小鼠血清及脾淋巴细胞,3个剂量组针对流感病毒的血抑(HI)效价均值分别为80、640和1 280,初步证明重组病毒株r HCV/FLU在小鼠体内能够产生较强体液免疫和细胞免疫应答反应。结论成功制备的重组病毒株r HCV/FLU在动物体内具有较好的免疫效果,为新型HCV疫苗的研制提供新的研究策略。 展开更多
关键词 反向遗传学 丙型肝炎病毒 重组病毒 pr8流感病毒
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PR8流感病毒突变株的制备及其在鸡胚上生长特性的研究 被引量:2
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作者 王朝霞 滕巧泱 +6 位作者 戴晓光 黄海碧 张树梅 张旭 徐大伟 李培锋 李泽君 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期788-792,共5页
在前期发现流感病毒WSN株的NS2或NP蛋白突变使病毒在细胞上增殖能力明显提高的基础上,研究了这些突变是否会使PR8病毒效价在鸡胚上进一步提高的可行性,通过反向遗传操作技术获得了NS2E67S和NPP277A两株PR8突变病毒。经过比较突变病毒与... 在前期发现流感病毒WSN株的NS2或NP蛋白突变使病毒在细胞上增殖能力明显提高的基础上,研究了这些突变是否会使PR8病毒效价在鸡胚上进一步提高的可行性,通过反向遗传操作技术获得了NS2E67S和NPP277A两株PR8突变病毒。经过比较突变病毒与野生病毒在鸡胚中的增殖能力,发现NS2E67S突变病毒在鸡胚上增殖后的效价与HA抗原表达量均明显提高,而NPP277A突变病毒在鸡胚上的增殖能力不及野生PR8病毒。该研究结果将对进一步研究病毒基因变异与宿主互作机制奠定基础,有可能通过NS2E67S突变病毒对改良流感疫苗具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 流感病毒 pr8 突变株
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流感病毒PR8F的拯救及其对BALB/c小鼠的致病力 被引量:1
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作者 崔卓栋 柴丹 +7 位作者 溫树波 解长占 孙文超 张萍 韩继成 曹亮 田明尧 金宁一 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2321-2326,共6页
为了研究H1N1流感病毒对BALB/c小鼠的致病相关分子机制、传播机制以及开发新型疫苗,将本实验室保存的A/PR/8/34株的8个质粒参照Paulina构建的流感病毒8质粒突变系统做定点突变,利用反向遗传操作技术,成功拯救出H1N1流感病毒突变株PR8F。... 为了研究H1N1流感病毒对BALB/c小鼠的致病相关分子机制、传播机制以及开发新型疫苗,将本实验室保存的A/PR/8/34株的8个质粒参照Paulina构建的流感病毒8质粒突变系统做定点突变,利用反向遗传操作技术,成功拯救出H1N1流感病毒突变株PR8F。将PR8F株以106 TCID50/100μL的剂量滴鼻感染BALB/c小鼠,观察小鼠临床表现及体质量变化。解剖攻毒后不同时间小鼠并观察体内主要脏器的病理特征,提取各脏器RNA,通过实时荧光定量PCR方法,检测PR8F株在小鼠体内不同脏器中的病毒残留量和在BALB/c小鼠肺脏中的扩增效率。结果表明,H1N1流感病毒突变株PR8F感染小鼠4~7d后全部致死;PR8F株在小鼠体内各脏器中的病毒残留量有很大差异,肺脏中最多,且病毒在肺脏内呈指数形式扩增。本试验建立了H1N1流感病毒PR8F株对BALB/c小鼠的感染模型,为H1N1流感病毒致病机制和传播机制的研究奠定基础。 展开更多
关键词 H1N1流感病毒pr8F 定点突变 病毒拯救 实时荧光定量PCR
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银芩抗感微丸对流感病毒PR8株感染小鼠的治疗作用
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作者 张双 孙美蓉 +1 位作者 盖晓飞 张玉微 《中国伤残医学》 2012年第11期28-29,共2页
目的:研究银芩抗感微丸对甲型H1N1流感病毒PR8株感染小鼠的治疗作用。方法:在滴鼻感染正常小鼠建立流感病毒肺感染模型的基础上,检测小鼠的肺指数与肺病毒载量。结果:银芩抗感微丸各剂量组均可明显降低甲型H1N1流感病毒PR8株感染小鼠的... 目的:研究银芩抗感微丸对甲型H1N1流感病毒PR8株感染小鼠的治疗作用。方法:在滴鼻感染正常小鼠建立流感病毒肺感染模型的基础上,检测小鼠的肺指数与肺病毒载量。结果:银芩抗感微丸各剂量组均可明显降低甲型H1N1流感病毒PR8株感染小鼠的肺指数与肺病毒载量。结论:银芩抗感微丸对甲型H1N1流感病毒PR8株感染小鼠具有一定的治疗和保护作用。 展开更多
关键词 银芩抗感微丸 甲型流感病毒 pr8 肺指数 病毒载量
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一株A/PR/8/34(H1N1)类似毒株基因特性的进一步研究
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作者 郭元吉 王敏 +1 位作者 程小雯 郭俊峰 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期134-136,共3页
目的 通过病毒粒 7个不同RNA节段核苷酸序列测定和分析 ,进一步排除A/广东 / 6 /91(H1N1)毒株由实验室污染而来。它与A/PR/ 8/ 34 (H1N1)毒株基因组间有哪些RNA节段存在有差异。同时它是否是一株基因重配株 ?方法 病毒粒RNA经逆转录合... 目的 通过病毒粒 7个不同RNA节段核苷酸序列测定和分析 ,进一步排除A/广东 / 6 /91(H1N1)毒株由实验室污染而来。它与A/PR/ 8/ 34 (H1N1)毒株基因组间有哪些RNA节段存在有差异。同时它是否是一株基因重配株 ?方法 病毒粒RNA经逆转录合成cDNA ,经聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,产物纯化 ,采用双脱氧链末端终止法进行核苷酸序列测定。结果 所比较的 7个不同RNA节段中 ,测定毒株RNA6和 7的核苷酸序列与A/PR/ 8/ 34 (H1N1)完全相同。而RNA1,2 ,3,5和 8间核苷酸差异数分别为 2 0 ,5 ,11,7和 6。这些差异导致了所编码的PB2 ,PB1,PA ,NP和NS蛋白分子上氨基酸序列差异数分别为 10 ,2 ,1,0和 4。结论 A/广东 / 6 / 91(H1N1)毒株由A/PR/ 8/ 34 (H1N1)病毒实验室污染而来可完全加以排除。它是A/PR/ 8/ 34 (H1N1)病毒类似毒株 ,而不是基因重配株。 展开更多
关键词 a/pr/8/34 流感病毒 类毒株 内部基因特性
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鱼腥草注射液体内抗流感病毒药效学研究 被引量:16
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作者 刘方舟 时瀚 +5 位作者 时宇静 刘颖 金亚宏 高英杰 郭姗姗 崔晓兰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期399-402,共4页
本研究评价新、老两种鱼腥草注射液制剂在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株,滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠造成肺炎模型,分别进行治疗性和预防性给药,观察小鼠肺指数。结果显示:鱼腥草注射液新、老... 本研究评价新、老两种鱼腥草注射液制剂在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株,滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠造成肺炎模型,分别进行治疗性和预防性给药,观察小鼠肺指数。结果显示:鱼腥草注射液新、老两种制剂对两种流感病毒感染引起的小鼠肺部炎症均有明显治疗作用,且小剂量时新制剂对FM1株治疗作用优于老制剂;新、老两种制剂对两种病毒感染免疫低下小鼠引起的肺部炎症有明显预防作用,且小剂量时老制剂对PR8病毒株的预防作用优于新制剂。鱼腥草注射液可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状,降低H1N1感染小鼠的肺指数,在体内对H1N1流感病毒感染有较好的防治作用。 展开更多
关键词 FM1毒株 pr8毒株 甲型流感病毒H1N1 鱼腥草注射液
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