加味宣肺透解剂对流感病毒感染小鼠肺部细胞因子表达的影响

目的:观察加味宣肺透解剂对流感病毒感染小鼠肺部TNF-α、IL-β、MCP-1的影响,探讨其药效机制,为临床广泛应用提供理论和实验依据. 方法:将小鼠随机分为5组:正常对照组、病毒感染模型组、利巴韦林组、加味宣肺透解剂高低剂量组.病毒感染后1 h给药,连续给药4 d,2次/日,0.5 mL/次.利巴韦林组,腹腔注射给药,其余各组均灌胃给药,正常对照组和病毒感染模型组,灌服无菌蒸馏水.小鼠以乙醚轻度麻醉后,以25μLFM1病毒液滴鼻,正常对照组用等量无菌生理盐水滴鼻.观察14 d小鼠的生存率;感染后第5天,摘取肺脏,称重,测定肺指数;肺组织福尔马林固定,常规石蜡包埋切片,用SABC免疫组织化学法测定肺组织中TNF-α、IL-β、MCP-1,并进行图像分析.

痰热清注射剂对流感病毒FM1感染小鼠肺损伤治疗作用的研究

痰热清注射剂是由黄芩、熊胆粉、山羊角粉、金银花、连翘等五味药物组成的中药制剂,五药相配具有清热解毒、化痰解痉的功效.在临床治疗中,痰热清注射液主要用于治疗呼吸道感染性疾病,本实验采用流感病毒FM1感染小鼠作为模型,研究痰热清注射液对其肺损伤及免疫功能的影响并阐明其作用机制,为痰热清注射液的临床应用提供理论依据.痰热清注射液对流感病毒FM1感染小鼠的死亡保护作用、血凝滴度、肺指数的影响:结果发现,痰热清注射液大、中、小治疗组小鼠对流感病毒FM1感染后的死亡保护率分别为(45.45、63.63、54.54%),模型对照组为(33.33%),与对照模型组比较,具有明显的保护作用,P值分别＜0.05;痰热清注射液对小鼠肺组织匀浆病毒血凝滴度明显降低,与流感病毒FM1感染模型组比较,差异显著,P＜0.05;痰热清注射液治疗组小鼠肺组织形态结构较为完整,偶可见少量淋巴细胞的浸润;痰热清注射液治疗组小鼠肺指数与模型组小鼠比较,显著降低,P＜0.05.

益气清瘟解毒合剂对流感病毒FM_1感染小鼠肺中IFN-γ,TNF-α,IL-10及IL-6蛋白动态表达的影响

目的:探讨治疗流行性感冒临床效方益气清瘟解毒合剂对炎性细胞因子的影响,从而确定益气清瘟解毒合剂抗流感免疫损伤方面的作用及其作用机制。方法:以流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)感染小鼠为模型,采用双抗体夹心ABCELISA法动态观察益气清瘟解毒合剂干预治疗后肿瘤细胞因子α(TNF-α),白介素6(IL-6),γ干扰素(IFN-γ),白细胞介素10(IL10)的变化。结果与结论:流感病毒感染小鼠后,TNF-α,IL-6,IFN-γ,IL-10的蛋白表达感染模型组高于正常空白组,在第3天TNF-α,I-L6,IFN-γ均达峰值,感染模型组与正常空白组比较,差异显著。益气清瘟解毒合剂组TNF-α,IL-6,IFN-γ较感染模型组有所下降,第3天3个指标下降均差异显著。但益气清瘟解毒合剂组较感染模型组IL-10的水平则有所提高,二者比较,差异显著。说明益气清瘟解毒合剂可以抑制TNF-α,IL-6,IFN-γ细胞炎性因子的表达,提高抗炎因子IL-10的表达水平,从而达到减轻炎性损伤的作用,阐释了临床应用益气清瘟解毒合剂治疗流感,可以缩短病程,减轻炎症的机理所在。

禽流感H9N2型病毒致BALB／c小鼠感染模型的建立与研究

目的建立H9N2型禽流感病毒BALB/c小鼠模型。方法从江苏某农场新分离得到禽流感病毒A/Chicken/Jiangsu/07/2002(H9N2),以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对该病毒的HA、NA基因进行鉴定和测序以确证。病毒经狗肾传代细胞(MDCK)3次单克隆纯化,之后肺对肺传代感染BALB/c小鼠,通过体重丢失、死亡率、半数致死量(LD50)评价病毒的感染性和模型的建立。结果A/Chicken/Jiangsu/07/2002(H9N2)型禽流感病毒通过肺对肺传代能感染小鼠,并且毒性逐渐增强,4次传代后能使小鼠致死,10次传代后病毒的LD50为10-2.17。结论H9N2型禽流感病毒能在实验条件下感染哺乳类,并建立了研究禽流感病毒的BALB/c小鼠模型。

补肾益肺胶囊抑制流感病毒感染免疫粘附机制研究

目的研究补肾疗法抑制流感病毒感染的作用机制。方法昆明种小鼠32只,随机分为空白组、模型组、补肾益肺胶囊预防组和左归丸预防组。以流感病毒 FM1鼠肺适应株滴鼻复制小鼠病毒性肺炎模型。二个预防组于实验第1～7日分别给予补肾益肺胶囊和左归丸,第8日造模,第14日处死。小鼠肺组织病理采用 HE 染色和 Envision System 法 CD54免疫组化染色,光镜下半定量分析,Ridit 检验。结果补肾益肺胶囊可以减轻病毒感染后的肺部炎症反应,作用机制是通过减轻了局部肺组织 CD54的表达而实现的,其作用和左归丸相当。结论补肾方法和补肾益肺胶囊可以通过调节机体免疫粘附机制,减轻肺部急性病毒性炎症反应。

季节性流感病毒H1N1BALB/c鼠肺适应株的建立及其分子机制

目的建立季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株,并对适应的分子机理进行研究。方法以病毒滴鼻感染小鼠,通过在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,观察小鼠存活情况及肺病理改变,来获得季节性流感病毒H1N1的鼠肺适应株。结果季节性流感H1N1 A/Brisbane/59/2007病毒野生型毒株,经过在小鼠体内进行8次传代后,毒力逐渐增强,从无致病力到致死率达到100%,对鼠肺适应株与野生型毒株进行基因比对,发现适应株HA基因发生了3个有义突变。结论野生季节性低致病力H1N1流感病毒可经在小鼠中经过多次传代而获得高致病力H1N1鼠肺适应株,HA蛋白89位Thr至Ile的突变对毒力的增强起决定性作用。

肝移植术后肺部感染的危险因素

1963年Starzl成功实施了世界首例人体原位肝移植术,至今已逾50年。随着手术技术日臻完善,多种高效免疫抑制剂广泛应用,以及对肝脏基础疾病预防、治疗方法的不断进步,肝移植术后生存率明显提高,但肝移植术后肺部感染却依然未得到有效控制,加之目前抗菌药物滥用,耐药菌不断被检出,以及新发流感病毒的出现,使肝移植术后肺部感染问题受到肝移植医生们的关注。

流感病毒感染中的T细胞应答

本文中总结了应用T细胞受体转基因模型和主要组织相容性复合物Ⅰ类四聚体研究流感感染时的效应细胞和记忆细胞应答,包括抗原特异性CDC4CD+T细胞的生成,多样性及其向肺部的移动,以及其在清除病毒中的作用.对于效应细胞和记忆细胞在病毒感染中的作用以及效应细胞如何转变为记忆细胞,都有比较详尽的阐述.

呼吸系统流感病毒感染通过菌群介导的Th17细胞依赖的炎症诱导肠道免疫损伤

流感是一种发生于多种禽类和哺乳动物的感染性呼吸系统疾病。临床上最普遍的症状包括咳嗽、发热和头痛等,同时还经常伴有腹痛、呕吐和腹泻等胃肠道感染样症状。但是为什么主要发生于肺部的流感病毒感染会引起肠道的损伤？其中的机制目前还不清楚。

麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染小鼠肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的效应机制

目的:探讨麻杏石甘汤对流感病毒肺部感染模型肺组织TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达的效应机制。方法:选取80只SPF级Balb/c小鼠为研究对象,根据随机数字表法分为对照组、模型组、奥司他韦组、麻杏石甘汤组,每组20只。比较各组肺组织TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB水平。结果:给药后3 d,与对照组相比,模型组TLR2、TLR4、NF-κB水平升高;与模型组相比,给药组TLR2水平降低,奥司他韦组和麻杏石甘汤组TLR4水平降低,麻杏石甘汤组NF-κB水平降低(P<0.05)。给药后7 d,与对照组相比,模型组TLR4、MyD88水平升高;与模型组相比,麻杏石甘汤组TLR4、MyD88水平降低,奥司他韦组MyD88水平降低(P<0.05)。结论:麻杏石甘汤通过调节TLR2/4-MyD88信号通路蛋白表达水平起到流感病毒肺部感染抗病毒的作用。

黄芩素体内抗甲型流感病毒作用的研究

【目的】观察黄芩素的体内抗甲型流感病毒作用。【方法】选用NIH小鼠,随机分为正常对照组,模型组,病毒唑组(剂量为0.07 g.kg-1.d-1),黄芩素高、中、低剂量组(剂量分别为100、10、1μg.kg-1.d-1);采用甲1型流感病毒肺适应株FM1滴鼻感染复制模型后,检测各组肺指数、肺指数抑制率、存活率及死亡保护率,并行肺组织病理检查。【结果】模型组肺指数和存活率显著性降低,与正常对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),肺组织出现明显炎性突变;黄芩素高剂量组可显著性升高肺指数和存活率,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05),并可明显改善模型小鼠的肺组织炎性突变,作用与阳性对照药病毒唑相仿。【结论】黄芩素具有一定的体内抗甲型流感病毒作用。

SARS病毒感染金黄地鼠研究

Roberts A等人为了评价疫苗和抗SARS病毒药物的有效性，建立了金黄地鼠小动物模型。他们用滴鼻的方法用SARS病毒感染了5周龄金黄地鼠。根据检测结果，SARS病毒在肺脏和鼻甲骨中以高滴度复制。下呼吸道的病毒滴度在攻毒第2天达到高峰，第7天后消失。在攻毒后第14天，在部分地鼠鼻甲骨检测出有低滴度病毒复制。病毒在攻毒早期就在上呼吸道复制，病理检查发现呼吸道上皮细胞坏死，随后引起炎症反应，局部硬化，病毒被清除，肺组织最终被修复。

β-防御素-2在呼吸机相关性肺炎中的表达

目的观察机械通气大鼠铜绿假单胞菌(PA)肺部感染前后肺组织β防御素2(BD2)基因和蛋白质表达的变化,探讨肺组织BD2在呼吸机相关性肺炎(VAP)发生机制中的作用。方法58只健康清洁级雄性成年SD大鼠随机分为对照组和机械通气组。机械通气组大鼠采用经口气管插管机械通气24h后,经气管内注入PA复制肺部感染模型。对照组中大鼠无需机械通气,直接气管内接种PA复制肺部感染模型。采用逆转录聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白免疫印迹(Westernblot)技术测定大鼠BD2基因和蛋白质表达的变化。结果机械通气组重度肺组织病理变化大鼠占47.6%,明显高于对照组的28.5%(P<0.05)。机械通气组中BD2基因和蛋白质表达水平的上调在3h后显著低于对照组(P均<0.05)。机械通气组接种PA6h后血培养阳性率为40.0%,显著性高于对照组的6.7%(P<0.05)。机械通气组支气管肺泡灌洗液中PA培养阳性率持续为100.0%,而对照组从3h的100.0%降至24h的33.3%(P<0.05)。对照组存活率为80.0%,机械通气组为40.0%,两组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论BD2基因和蛋白质表达上调水平的下降可能与VAP的发生和发展有关。

SARS恒河猴动物模型比较病理学研究

目的综合对比 SARS 患者和恒河猴动物模型的病理学改变,为恒河猴动物模型应用于阐明 SARS 病变机制等研究提供理论依据。方法 SARS 病毒感染8只恒河猴,在感染后不同时间安乐死动物,应用光镜、组织化学、免疫组化法对动物的各脏器进行观察研究,并与人类 SRAS 患者的病理改变进行比较。结果人类 SARS 患者的主要病理变化主要包括肺部病变,免疫器官损伤及全身中毒性脏器损伤三方面,恒河猴动物模型出现的病理改变基本符合人类 SARS 病变特点。结论SARS 病毒感染的恒河猴具有类似人类 SARS 的病理改变,可以作为 SARS 发病机制等研究的模型动物。

艾滋病合并肺孢子菌肺炎1例及文献复习

肺孢子菌肺炎（Pneumocustis pneumonia,PCP）又称卡氏肺孢子虫肺炎,此病是由肺孢子菌引起的双肺间质性的改变,其为条件性肺部感染性疾病,亦是获得性免疫缺陷综合征（Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS）的最常见的机会性感染之一,发病率相对较高,现随着临床上免疫抑制剂的较为广泛应用,对于肿瘤放、化疗的认知普及,尤其是HIV的感染，其发病率逐年呈递增趋势，是AIDS患者确诊的指征性疾病。

H7N9流感病毒在4种细胞中培养情况的研究

目的了解H7N9流感病毒在不同细胞中增殖的感染动力学差异。方法将H7N9流感病毒分别接种于鸡成纤维细胞(DF-1)、狗肾细胞(MDCK)、人支气管上皮细胞(BEAS-2B)、人肺腺癌细胞(A549),观察病毒在各细胞内增殖后细胞病变效应(CPE)、血凝实验滴度及50%组织培养细胞感染剂量。结果 H7N9流感病毒在A549细胞中培养36 h可达到血凝效价最高,同时可见明显CPE,在DF-1及MDCK细胞中培养72 h后血凝效价达到最高;在BEAS-2B细胞中增殖不明显,培养液对豚鼠血无明显凝集,且培养超过96 h尚无明显CPE。DF-1细胞、MDCK细胞、A549细胞对病毒的TCID50实验结果分别为10^(-4.34)、10^(-5.13)、10^(-3.84)。结论本实验使用的H7N9流感病毒不能有效感染BEAS-2B细胞并在其中增殖,但是可以在DF-1、MDCK及A549细胞中有效增殖。增殖能力以MDCK细胞最强,DF-1细胞略弱,A549细胞次之。A549细胞对病毒的吸附能力较强,可快速达到增殖的高峰。

SARS-CoV对幼年和成年布氏田鼠的感染研究

采用鼻腔喷雾法(CCID50=105.7)研究了SARS冠状病毒(SARS-CoV)对成年和幼年布氏田鼠的感染效果.成年动物攻毒后出现死亡,表现为口鼻有出血,肠道出血;肺组织呈出血性间质性肺炎改变,肝、脾、肾、胰腺组织均呈淤血性改变;存活动物肺组织呈间质性肺炎,局灶出血及肺气肿改变,其他脏器未见明显病变.幼年动物攻毒后未见死亡但行动较为迟缓,主要脏器未见明显异常;早期肺组织有局限性肺炎改变,且病毒分离为阳性;同居对照组的一只动物有肺组织局灶性肺炎.结果表明,SARS-CoV可以很强地感染布氏田鼠;成年布氏田鼠比幼年动物对SARS-CoV更敏感;布氏田鼠有望成为一种比较理想小型SARS动物模型.