四价流感病毒裂解疫苗的安全性研究

该研究旨在对四价流感病毒裂解疫苗(IIV4)进行系统研究,以进一步提高其技术性能和临床应用。为此,我们选择了贵州、福建和湖南省等地区作为研究对象,并在2020年9月至2021年6月期间对410名受试者进行了试验。方法 试验方案中,每名受试者均注射了一次IIV4疫苗,在注射前后30天分别采集了5.0 mL的血液样本。通过凝集抑制实验(HI)来测定H1N1、H3N2、BY和BV这四种不同类型的血清抗体水平,并在注射后的0-7天内主动监测其毒副作用。结果 试验结果显示,共有9例患者在试验过程中出现了脱发,但在免疫原性检测方面,对于H1N1、H3N2、BY和BV这四种病毒株,阳转率的95%置信区间(CI)下界均在40%以上,并且免疫后的保护率的95% CI下界也都在70%以上。此外,抗体的几何平均生长倍数(GMI)也都在2.5以上。结论 在整个研究过程中,共发生了103例不良事件,总发生率为25.12%。其中,局部不良事件以接种部位的疼痛、硬结、红肿为主要表现;而系统不良事件主要表现为发热、腹泻、嗜睡;而且大多数不良事件的严重性为1级(轻微)。

四价流感病毒裂解疫苗车间的工程设计探讨

针对国内外主流四价流感病毒裂解疫苗的生产工艺,结合案例对四价流感病毒裂解疫苗生产车间的工艺设计和工程设计特点进行分析。

流感病毒裂解疫苗纯化用分子筛层析介质使用寿命的确定

探索使用分子筛色谱纯化流感病毒裂解疫苗纯化时,色谱介质的最佳使用寿命。方法 在疫苗生产过程中,根据色谱介质的特性主要采用相同的消毒和清洗方式,综合考虑生产过程中色谱介质的柱效及各项参数,评价色谱介质的使用寿命。结果 随着色谱介质使用次数的深入,纯化过程中色谱介质的压力逐渐增加,表明有杂质的聚集,同时对称性因子偏移,色谱柱的柱效的降低也表明了随着杂质在色谱介质中的增多,最终会影响纯化效果。经过综合评估,分子筛色谱介质的纯化寿命暂定为390次。结论 初步确定了色谱层析介质的使用寿命,为规模化的疫苗生产与纯化提供了理论依据。

淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂作用

目的研究探讨淫羊藿多糖对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的免疫佐剂活性。方法淫羊藿多糖G1和G4,生理盐水分别与流感病毒裂解疫苗配伍免疫小鼠,初次免疫后2周收集小鼠血清,ELISA法检测血清中抗体的滴度;MTT法测定脾淋巴细胞增殖反应;ELISA测定IFN-γ和IL-4的水平,流式细胞术测定脾淋巴细胞CD4+、CD8+、CD3+和CD19+亚群。结果初次免疫后,淫羊藿多糖G1和G4能显著提高免疫小鼠血清的抗体滴度;能明显增强脾T淋巴细胞的增殖反应,可以显著提高脾淋巴细胞CD4+、CD8+和CD3+的含量及CD3+/CD19+的比值,诱导分泌IFN-γ的水平升高。结论淫羊藿多糖可增强小鼠对H1N1的免疫应答,可以作为甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的一种新型免疫佐剂。

动态浊度法检测流感病毒裂解疫苗细菌内毒素的含量

目的:探讨动态浊度法检测流感病毒裂解疫苗细菌内毒素含量的可行性。方法:参照《中国药典》2015年版通则1143细菌内毒素检测法,对流感病毒裂解疫苗进行标准曲线可靠性试验、干扰初筛试验、干扰验证试验及内毒素含量测定,并与凝胶法检定的同批疫苗的结果相比较。结果:标准曲线可靠性试验结果符合规定。干扰初筛试验,疫苗稀释160倍、320倍及640倍,回收率在50%~200%之间,均无干扰,干扰验证试验进一步证明疫苗稀释640倍对试验均无干扰作用,浊度法检测的10批流感疫苗细菌内毒素含量均小于该疫苗的限值20 EU·ml^(-1),并与经凝胶法检定的同批疫苗结果一致。结论:采用动态浊度法检测流感病毒裂解疫苗细菌内毒素含量是可行的,值得推广应用。

上海市儿童甲型H1N1流感病毒裂解疫苗接种不良反应评价

目的:探讨上海市儿童接种国产甲型H1N1流感病毒裂解疫苗不良反应发生情况。方法:对本市中小学生接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗后,发生不良反应并来我院就诊的192例儿童进行观察记录。结果:所观察的发生不良反应的儿童中,男∶女比例为1.23∶1,年龄6～15岁。192例儿童患者中,接种当天和接种后第1天发生不良反应的分别为72例(37.5%)和70例(36.5%)。临床症状含发热的儿童176例(91.7%),高热51例。以全身伴呼吸系统症状的儿童最多,为181人。在明确记录恢复时间的149例儿童中,以就诊后3 d内恢复的为主,为101例(67.8%)。结论:国产甲型H1N1流感病毒裂解疫苗接种儿童后未出现严重不良反应,安全性较高。

甲型H1N1流感病毒裂解疫苗不良反应调查

目的:分析甲型H1N1流感病毒裂解疫苗接种后药品不良反应(ADR)发生情况。方法:对我院2009年11月3日接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的236例工作人员进行调查,包括ADR发生率、出现时间、持续时间、处理等,并进行统计分析。结果:236例接种者ADR发生率20.34%(48/236),其中局部反应占29.17%(14/48),全身反应占70.83%(34/48)。男女接种者ADR发生率分别为13.41%(11/82)和24.02%(37/154),差异无统计学意义(P>0.05)。接种者年龄21～74岁,各年龄段接种者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.5)。大部分发生ADR者均自愈。结论:成人接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗后不良反应发生率较高,但大多数症状轻微,持续时间短,男女不良反应发生率无显著差异。

流感病毒裂解疫苗临床安全性和免疫原性研究

目的了解流感病毒裂解疫苗的安全性和免疫原性。方法按整群随机抽样原则,对上海市200名18-60岁健康成人进行疫苗接种后临床安全性指标（局部反应、全身反应）的监测。用微量血凝抑制试验检测血清HI抗体,比较血清抗体阳转率、抗体几何平均滴度（GMT）和增长倍数。结果接种疫苗72 h内局部反应率为7.00%;全身反应率为12.00%,其中发热反应率为7.50%,其他全身反应率为4.50%;均以轻度反应为主。H1N1、H3N2和B型免疫后抗体阳转率分别为63.49%、74.07%和56.08%,抗体GMT分别为1∶170.10、1∶128.85和1∶446.79,免疫后比免疫前分别增长到6.93倍、8.72倍和4.90倍。结论此流感病毒裂解疫苗的临床安全性和免疫原性均较好。

四价流感病毒裂解疫苗安全性及免疫原性研究

目的探讨四价流感病毒裂解疫苗(quadrivalent influenza vaccine,QIV)的安全性和有效性。方法用WHO当年推荐的A1型、A3型和2株B型流行性感冒病毒株制备QIV,按照企业注册标准及《中华人民共和国药典》2015版(三部)的要求全面检定后进行毒理试验和免疫原性试验。结果毒理试验结果显示,QIV在动物中未见有害作用的剂量为15μg/株;免疫原性试验结果显示,免疫效果完全能够达到或超过三价流感病毒裂解疫苗(trivalent influenza vaccine,TIV)的免疫效果,且QIV所特有的B2亚型,除最低剂量外,小鼠的血凝抑制抗体(hemagglutination inhibition,HI)滴度均超过了1∶40的阳性水平。结论本试验条件下QIV在动物中具有良好的安全性和免疫原性。

接种流感病毒裂解疫苗发生急性播散性脑脊髓炎1例报告

疫苗对人体来说属于异体物质，接种后机体免疫系统会发生一系列反应，绝大多数人能获得抗感染的有益的免疫应答反应，个别人在获得免疫保护的同时，由于多方面原因，也可发生与免疫接种有关的对机体有损害的反应。2009年4月14日，北京市通州区报告了1例接种流感疫苗后发生“急性播散性脑脊髓炎”的疑似病例，现将情况报道如下。

国产四价流感病毒裂解疫苗在婴幼儿接种中的安全性及免疫原性初探

目的初步评价国产四价流感病毒裂解疫苗在婴幼儿接种中的安全性和免疫原性。方法采用单中心、剂量递增、开放设计,受试者为6~35月龄健康婴幼儿,按0、28 d接种低或高剂量试验疫苗。收集安全性数据,随访首剂接种至全程接种后半年内严重不良事件。采集首剂接种前和每剂接种后第28 d静脉血,检测H1N1、H3N2、BV(B/Victoria)、BY(B/Yamagata)型流感病毒血凝抑制抗体。结果本研究低、高剂量组各入组30人,接种后7 d内不良反应发生率为21.7%,28 d不良事件发生率为26.7%,低、高剂量组2个时段不良反应发生率差异均无统计学意义(P值均>0.05)。不良反应发生多为1级或2级,研究期间发生3例严重不良事件,均与试验疫苗无关。全程免疫后第28 d,各型抗体阳转率在30.8%~48.1%,保护率在46.2%~61.5%,各型抗体几何平均滴度(GMT)在25.9~75.8,几何平均增长倍数(GMI)在3.06~5.17;免前阴性人群低、高剂量组H3N2型抗体GMT(1∶13.2 vs.1∶31.7)和GMI(2.64 vs.6.35),组间差异均有统计学意义(P值均<0.05),其他人群2种剂量组各型抗体阳转率、保护率、GMT、GMI差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论6~35月龄婴幼儿可耐受该四价流感病毒裂解疫苗,具有较好的安全性;高剂量疫苗在免疫原性方面略优于低剂量疫苗。

流感病毒裂解疫苗接种后血小板减少性紫癜1例报道

疫苗接种后可引起儿童血小板减少性紫癜的异常接种反应,流感病毒裂解疫苗接种后儿童血小板减少性紫癜较为少见,应加强接种前禁忌证的询问及接种后的观察,预防和减少异常接种反应的发生。

1例接种流感病毒裂解疫苗偶合死亡的调查诊断报告

潍坊市疾病预防控制中心接到接种门诊报告,1名幼儿在接种完流感病毒裂解疫苗后死亡,经市级预防接种异常反应调查诊断专家组诊断,认为幼儿死亡与接种流感病毒裂解疫苗无关,属于疫苗接种偶合症。

流感病毒裂解疫苗病毒种子批的制备和培养条件的研究

目的制备流感病毒裂解疫苗的主代和工作种子批,优化病毒培养条件提高产量,制备高质量的流感病毒裂解疫苗。方法将H1N1、H3N2和B型3株流感病毒分别接种SPF鸡胚,收获尿囊液,制备流感病毒裂解疫苗主代及工作种子批。流感疫苗工作种子批按不同稀释倍数、pH值、收获时间和冷胚时间优化病毒培养条件,制成疫苗,进行产量、安全性和免疫原性研究。结果通过优化不同型别流感病毒的培养条件,提高了抗原的血凝滴度,血凝滴度达到1∶1 024及以上,制备的疫苗具有良好的安全性和免疫原性。结论制备出了高产量和高质量的流感病毒裂解疫苗。

流感病毒裂解疫苗裂解剂去除方法的研究

裂解剂的残余含量是流感病毒裂解疫苗的主要质控指标之一。实验中采用膜超滤法和透析法做了裂解剂去除的比较研究。结果表明,膜超滤法效果优于透析法。其血凝素抗原纯化收率达到90%,裂解剂去除达98%以上;疫苗生产无菌操作和细菌内毒素易于控制,成本低,易于大规模生产。

四价流感病毒裂解疫苗B型血凝素含量的检测方法

目的：建立能准确测定四价流感病毒裂解疫苗中B型血凝素含量（单向免疫扩散法，SRD）的检测方法。方法采用双价抗原参考品SRD法对四价流感病毒裂解疫苗中两种B型血凝素含量进行测定。将B1与B2抗原参考品按质量浓度1∶1混合制备为双价抗原参考品，双价抗原和待检样品与10％裂解剂按9∶1比例裂解30min，分别加入到含有抗血清参考品的1．5％琼脂糖凝胶板上，每孔10μL，置20～25℃放置18～24h，经干燥、染色、脱色，测量结果。验证双价抗原SRD法的重复性和准确性。结果双价抗原SRD法测定的血凝素含量平均值比单价抗原SRD法更接近理论配制值，故双价抗原SRD法比单价抗原SRD法能更能准确检测QIV中两种B型血凝素含量，经验证双价抗原SRD法的重复性及准确性良好。结论双价抗原SRD法提高了四价流感病毒裂解疫苗B型血凝素含量检测的准确性，为精确测定四价流感病毒裂解疫苗中B型血凝素含量提供了有效的方法和数据支持。

9259人接种流感病毒裂解疫苗观察报告

目的：了解流感病毒裂解疫苗接种后不良反应的发生几率，正确认识预防接种反应。方法：以我校9259名接种流感病毒裂解疫苗的人群为对象，进行临床观察，调查预后。结果：在9259剂次流感疫苗使用过程中，AEFI发生56例，AEFI发生率为0．60％，无严重不盘反应。结论：改善预防接种服务质量，增强公众对流感疫苗接种的信心，做好禁忌症筛查，规范安全接种原则，降低AEFI发生率。

134例接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的不良反应监测分析

目的监测接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的不良反应。方法对134例首批接种甲型HINt流感病毒裂解疫苗者进行不良反应监测。结果28例接种者发生ADR，发生率为20．9％，共38例次，其中局部反应为7例次，全身反应为31例次。以1级反应为主，未发现其他异常反应、偶合反应和任何有临床意义的严重不良事件；不良反应主要发生于接种第1d（71．4％）或第2d（25．0oA）；不良反应病程主要为1～2d，其中23倒不良反应者（82．1％）为自行缓解，5例（17．9％）曾使用药物治疗，所有不良反应发生者均治愈。结论接种甲型H1N1流感病毒裂解疫苗可能发生轻度的不良反应，一般很快自愈，该疫苗有较好的安全性。

衍生化GC-MS法测定流感病毒裂解疫苗中游离甲醛含量

目的:建立测定流感病毒裂解疫苗中游离的痕量甲醛的衍生化GC-MS方法。方法:优化衍生化条件后,利用2,4-二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydrazine,DNPH)衍生流感病毒裂解疫苗中的游离甲醛,用环己烷萃取衍生物,以GC-MS法测定。气相色谱-质谱条件为:以Agilent DB-5MS毛细管色谱柱分离,初始温度为60℃,以10℃·min-1的速率升温至150℃,保持2 min,再以10℃·min^(-1)升至260℃,保持5 min。检测器为质谱检测器,电子轰击离子化模式,电子能量70 e V,离子源温度280℃,进样口温度为250℃;扫描方式为选择性离子检测,检测离子m/z 79、210;载气为氦气,流速:1. 0 ml·min-1,分流比为2∶1;进样量:1μl。利用建立的方法测定了两个厂家共10批样品中游离的甲醛含量。结果:甲醛浓度在0. 10～30. 00μg·ml^(-1)内与峰面积呈良好的线性关系(r=0. 999 8),该方法的最低检测限为0. 01μg·ml^(-1),定量限为0. 03μg·ml^(-1)。低、中、高3个浓度的平均加样回收率为95. 3%(RSD=3. 4%,n=9); 10批流感病毒裂解疫苗中痕量甲醛含量均低于中国药典2015年版三部中规定的50μg·ml^(-1)。结论:该方法操作简单,检出限低,专属性强,可用于流感病毒裂解疫苗中游离甲醛含量的质量控制。

流感病毒裂解疫苗裂解剂去除工艺改进及稳定性研究

目的改进流感病毒裂解疫苗裂解剂去除工艺，降低残余卵清蛋白和裂解剂含量，提高疫苗质量，降低成本。方法分别将A1、A3和B型流感病毒纯化液用磷酸缓冲液（PB）沉淀法去除裂解剂，经超滤、除菌制备原液，配制6批半成品，其中3批不含硫柳汞，3批含硫柳汞，经全面检定，并观察放置37℃、25℃和2～8℃不同时间的稳定性。结果该疫苗各项指标均符合《中国药典》（2010年版）三部要求，其中卵清蛋白平均为3．83ng／mL，裂解剂平均为57μg／mL，比改进前分别降低97．9％和69％。37℃放置4周、25℃3个月及2-8℃12个月后检定全部合格。结论该工艺步骤简单，去除卵清蛋白和裂解剂效果明显，是进一步提高疫苗质量和降低成本的有效工艺。