2001—2012年国内主要PCV2流行基因型演变趋势

猪圆环病毒2型(PCV2)是严重危害世界养猪业的重要病毒性疾病。本文从GenBank随机选择和下载了281株国内分离的PCV2全基因组序列病毒株,研究PCV2基因型与PMWS的相关性,以及在2001年至2012年期间国内主要PCV2流行基因型的演变趋势。研究分析表明PCV2基因型与PMWS没有明显的相关性,但从2003年后在国内多数省份PCV2流行基因型发生了变化,即基因型从PCV2a(2群)演变成PCV2b(1群),且PCV2b占主导作用。因此,针对国内PCV2流行基因型的演变趋势,可选择相匹配的疫苗进行有效地防控。

重组流行性乙型脑炎病毒E基因原核表达条件的优化

目的:对重组流行性乙型脑炎病毒E基因(JEVE)进行优化表达研究。方法:采用正交实验设计L9(34)方案,通过SDS-PAGE分析,对诱导时机、诱导时间、IPTG浓度、诱导温度四因素对重组产物表达的影响进行了研究。结果:菌体在37℃培养条件下,当LB培养基OD600达到0.8时,加入终浓度为0.025mmol/L的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(Isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导4h,可获得较高表达量的重组乙脑病毒E蛋白。结论:获得较为满意的表达条件,为下步纯化和进一步大规模生产奠定了基础。

谷胱甘肽转硫酶M1基因型与胃癌易感性的研究

目的:探讨中国汉族人群GSTM1基因型与胃癌易患性的关系,为胃癌高危人群的确定和胃癌的一级预防提供分子生物学手段。方法:501例,分为胃癌(GC)组、慢性萎缩性胃炎(CAG)组、慢性浅表性胃炎(CSG)组、胃溃疡(GU)组、十二指肠溃疡(DU)组及正常对照组,采用统一的调查表,调查年龄、性别、学历、职业、吸烟史、饮酒史、饮食习惯、肿瘤家族史等。采用序列特异性引物的聚合酶链反应(PCR-SSP)检测GSTM1基因型测定组的基因型频率,ELISA法测定Hp感染,病例对照研究方法进行流行病学分析。结果:单因素分析显示与胃癌有关联的危险因素为年龄、性别、文化程度、职业、HP感染、吸烟、GSTM1空白基因型,其中大蒜为保护性因素;多因素分析显示与胃癌有关联的危险因素分别为HP感染、GSTM1空白基因型,大蒜仍为保护性因素。HP感染与GSTM1空白基因型对胃癌的发生存在协同作用;吸烟与GSTM1空白基因型存在协同作用。结论:具有GSTM1基因型的个体发生胃癌的危险性增加,该基因型可以认为是胃癌易患性的标志。检测该基因型能够对胃癌高危人群的确定,对胃癌的早期发现和一级预防提供有益的线索。

牛病毒性腹泻病毒分型一步法RT-PCR检测方法的建立及应用

为了建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的分型检测方法,并掌握长春地区BVDV的流行规律。本研究根据BVDV-1型和BVDV-2型的5’-UTR基因序列差异设计鉴别检测引物,经一步法RT-PCR反应条件的优化,建立了BVDV分型一步法RT-PCR检测方法,并应用该方法对长春地区采集的380份样品进行检测。结果表明:该方法最佳退火温度为51℃,最佳模板含量为5.7μg,检测牛肠道病毒(BEV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛轮状病毒(BRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)均为阴性;对BVDV-1型和BVDV-2型的检测灵敏度可以分别达到0.58 ng RNA和0.51 ng RNA,相对于病毒分离方法的符合率为92.31%,长春地区BVDV阳性率为24.21%,其中BVDV-1和BVDV-2阳性率分别为15.53%和7.37%。以上结果表明,本研究建立的BVDV分型一步法RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和准确性,长春地区BVDV的流行优势基因型为BVDV-1型。

亚洲HIV-1基因型的流行特征(1990—2020年)

目的调查亚洲国家和地区1990—2020年HIV-1毒株基因型流行分布特征,为疫苗研发提供参考。方法整理HIV sequence database中1990—2020年亚洲23个国家和5个地区报告的共计86949例HIV-1感染者的毒株类型及相关信息,比较亚洲HIV-1在不同时间段和次区域间的流行差异,阐明亚洲HIV-1毒株类型的地区分布特征。结果亚洲地区HIV-1毒株主要类型为B(B’)亚型(33.39%),CRF01;E(28.29%),C亚型(17.68%)和A亚型(12.59%)。HIV-1基因型在北亚、南亚、东亚、东南亚和中亚5个次区域间的分布差异具有统计学意义(χ^(2)=205874.44,P<0.001),但临近次区域间的毒株流行类型具有一定的相似性。结论亚洲区域的HIV-1毒株类型流行情况日渐复杂,基因型别多样化。多国联合开展艾滋病流行监测,强化跨国合作对于新型疫苗设计和效力测试十分必要。

乳房炎牛乳中产β-内酰胺酶肠杆菌耐药性研究进展

随着抗菌药物在畜牧业及临床上广泛及不合理的使用,耐药菌株不断出现,革兰阴性菌临床分离株的耐药率大幅上升。菌株的耐药种类很多,近年来最受关注的是耐β-内酰胺类药物的菌株,其对β-内酰胺类药物的耐药机制日趋复杂,其中最主要原因是菌株产生可以特异性水解抗生素的β-内酰胺酶。目前国内外有关奶牛生鲜乳中分离出的肠杆菌耐药性研究越来越受到关注。论文对国内外患乳房炎奶牛的乳中产β-内酰胺酶菌的产酶类型、耐药表型和耐药基因型进行综述,以期为奶牛疾病治疗及生鲜乳中兽药残留安全防控提供参考。

牛病毒性腹泻病毒通用型及分型RT-PCR检测方法的建立及应用

为了建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)通用型及1型(BVDV-1)、2型(BVDV-2)的检测方法,并了解聊城地区BVDV的流行规律,试验根据BVDV-1、BVDV-2 5′端非编码区(5′UTR)基因序列分别设计BVDV通用型检测引物及BVDV-1、BVDV-2特异性检测引物,通过优化RT-PCR扩增条件分别建立BVDV通用型RT-PCR、BVDV-1分型RT-PCR、BVDV-2分型RT-PCR检测方法,并分析3种检测方法的特异性、重复性、符合性,最后采用3种检测方法对聊城地区采集的4 685份临床样品进行病原学检测分析。结果表明:3种检测方法检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛轮状病毒均为阴性,检测灵敏度分别为6.84,1.08,3.03 ng;BVDV通用型RT-PCR检测方法与BVDV-1分型RT-PCR、BVDV-2分型RT-PCR检测方法的符合率均为100%;聊城地区BVDV阳性率为6.51%,其中BVDV-1和BVDV-2阳性率分别为4.50%和2.01%,BVDV-1和BVDV-2混合感染率为0.13%。说明试验建立的BVDV通用型RT-PCR、BVDV-1分型RT-PCR、BVDV-2分型RT-PCR检测方法均具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性,聊城地区普遍存在BVDV的流行,其流行优势基因型为BVDV-1。

广东省鸽毛滴虫流行病学调查研究

为了解广东省规模化肉鸽场鸽毛滴虫流行情况,探明鸽毛滴虫病流行感染规律,本研究采取随机抽样方法以及培养-镜检法,对广东省6个地区的12个集约化肉鸽养殖场鸽毛滴虫感染情况进行调查。共采集到鸽口腔黏液样品462份和环境物料样品247份,结果显示毛滴虫阳性率分别为为30.7%和1.2%。河源地区和佛山地区的鸽毛滴虫感染率较高,分别为60.0%和.50.0%;在不同日龄鸽群中,青年鸽毛滴虫感染率最高(53.3%),乳鸽次之(33.2%),种鸽的毛滴虫感染率最低;不同管理条件中,种鸽引进方式为自繁自养,环境温湿度及时进行调控和用药消毒合理的,毛滴虫感染率较低。对分离到的部分鸽毛滴虫分离株进行基因型分析,结果发现11株鸽毛滴虫的基因型为A型或B型,本研究为鸽毛滴虫病的防控和研究提供了相关临床数据。