液体浅层培养对猪苓菌丝体生长及其多糖含量的影响

通过液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体,在培养28d后,猪苓菌丝体的鲜重达到最高,而菌丝体干重在21d后增幅不大;培养28d后的培养液pH由接种前的3 9升高到5 0,菌丝体旺盛生长阶段的pH为4 0～4 6;菌丝体中总糖含量在培养14d后达到最大,浅层培养猪苓菌丝体生产猪苓多糖的适宜培养周期约为2周;对从猪苓菌丝体和猪苓菌核中提取的猪苓多糖进行红外吸收光谱比较分析,两者红外光谱图相似,表明多糖的主要组成成分相同,但含量上有差异。

甘蔗组培苗继代增殖的浅层培养

甘蔗组织培养技术的应用为甘蔗品种的快速繁殖和良种推广提供了有效的手段，而浅层培养作为植物组培技术的一种，可为完善甘蔗组培苗增殖培养提供不同的解决途径，在不降低增殖效果的前提下，降低培养基的使用量，从而降低生产成本。本试验在使用相同配方[MS液体培养基（30 g/L的蔗糖＋1 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA）pH 6.0]、不同容量的培养基对甘蔗组培苗进行增殖培养，并观察对比其增殖效果，以确认浅层培养是否具有较好的增殖效果。结果表明：在增殖F2～F5代的培养中，果酱瓶中加入10 mL容量的液体培养基较常用的20 mL容量的液体培养基增殖效果明显。

生姜的液体浅层培养和快繁

在生姜的组织培养和快繁中,采用液体浅层静置培养,显著地提高了试管苗的增殖速度,并且植株生长健壮,根系发达,也提高了试管苗的移栽成活率。

浅层液体培养在生姜脱毒苗快繁体系中的应用

对浅层液体培养与固体培养在生姜脱毒苗继代、生根及移栽过程中进行了比较研究;结果表明浅层液体培养继代增殖系数、生根长度及株高均优于固体培养;根数、生根率在两种培养方式中没有明显差异;来源于浅层液体培养生根的生姜脱毒苗移栽成活率明显高于来源于固体培养基的脱毒苗;使用浅层液体培养节约化学药品成本66.7%以上,同时减少大量用工;据此认为,浅层液体培养更适合于脱毒生姜种苗的大量繁殖。

浅层液体静置培养快繁甘薯脱毒苗

以脱毒甘薯高系14和鸣门金使的试管苗为材料,采用固体培养基S、液体培养基LA与LB进行培养试验,结果显示:浅层液体静置培养的脱毒苗的发育动态比固体培养的要提前5～10d,适宜的增殖周期在20～25d。LA与LB培养基的成本分别比S降低34.82%、58.12%,在大规模育苗中适宜选择LB作为浅层液体静置培养的培养基。

魔芋浅层液体组织培养体系研究

采用不同激素配比的液体和固体培养基对花魔芋进行了组织培养研究。结果表明:浅层液体培养基在花魔芋组织培养时较固体培养基具有褐变率低、愈伤组织生长速度快、平均出芽数高、根粗壮、成本低等优势;初代培养基应选择MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖3.0%+0.1%PVP(pH5.8),出芽培养基应选择MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖3.0%+0.1%PVP(pH5.8),待出芽后转入MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖3.0%+0.1%PVP(pH5.8),二者交替培养可连续批量获取组培苗,生根培养基应选择1/2MS+IAA0.5mg·L-1+蔗糖1.5%+0.1%PVP(pH5.8)。花魔芋愈伤组织继代3次后发现了A型、B型、C型3种愈伤组织,三者在外观、组织结构和分化能力上存在差异,试验和生产上选择A型和B型愈伤组织进行分化培养可得到高效稳定的分化体系。

不同培养方式和pH对草地早熟禾原生质体分裂和生长的影响

以3个草地早熟禾品种午夜Ⅱ号、新格莱德和橄榄球Ⅱ号继代培养20次的愈伤组织为材料,设置不同的pH水平,通过2种培养方式进行了原生质体培养,观测其原生质体的分裂和生长状况。结果表明:3个草地早熟禾品种原生质体最适宜的培养方式为固液双层培养,固液双层培养中液相pH为5.8(新格莱德pH6.0)时原生质体分裂率达最高值,午夜2号42.8%、新格莱德50.1%和橄榄球2号29.4%。基因型的差异对于原生质体培养成功与否有着密切的关系。

龙眼单细胞培养及其体胚发生再生植株

以龙眼松散型胚性愈伤组织(CIII类型)为起始材料,进行了单细胞培养及其体细胞胚胎发生再生植株的研究。结果表明:由CIII类型胚性愈伤组织建立起的分散性良好的悬浮细胞系,经过孔径(φ)为40μm的尼龙网过筛,可以获得单细胞悬浮系;采用液体浅层培养,部分单细胞可持续分裂,并且有规则分裂和不规则分裂2种方式,前者可能直接形成体细胞胚胎,后者则先形成多细胞团再形成体胚;在液体浅层培养中,单细胞可不经转移直接形成子叶形体细胞胚胎;这些体细胞胚胎经过成熟培养后,可萌芽生根再生完整植株。

新疆大无核白葡萄原生质体培养

以大无核白葡萄茎叶切块组织诱导的绿色愈伤组织作材料,在含2％纤维素酶和1％果胶酶的混合酶液25℃暗条件下游离获得原生质,经去除酶液和洗脱提纯,用改良MS培养基等渗和逐代降渗培养,用液体浅层、固液双层及琼脂糖珠包埋等方式培养获得愈伤组织。

灵芝液体浅层静置培养高效生产三萜的研究

三萜是灵芝Ganoderma lingzhi中重要的活性物质。本研究采用液体浅层静置培养方式(LSSC)提高灵芝三萜的产量。结果表明,在T25细胞培养瓶中的最佳培养条件为初始培养体积2mL,接种量7.0g(菌体湿重/L),在48h补加2mL培养液,发酵7d,三萜产量可达(32.95±0.51)mg/g,为摇瓶培养最高产量的2.09倍。进一步经不锈钢平盘放大研究发现,三萜最高产量为(65.91±0.84)mg/g,为摇瓶培养的4.19倍。形态学研究表明,浅层静置培养过程中形成的气生菌丝是提高三萜产量的关键因素。与深层液体发酵相比,液体浅层静置培养具有生长快,三萜产量高,发酵过程不需要搅拌等优点,具有良好的工业化应用前景。

猪苓菌丝体多糖对小鼠免疫水平的影响

通过人工液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体,用热水浸提法提取猪苓菌丝体多糖(PPS1),经纯化测定其糖含量,用红外光谱分析鉴定多糖;纯化鉴定的PPS1,通过小鼠进行腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、E玫瑰花环试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验、EAC花环试验等5项免疫学试验初步探讨其免疫药理学作用,同时与猪苓菌核多糖(PPS2)进行比较。试验数据经统计学分析显示,E玫瑰花环试验中PPS1与空白对照组相比差异显著(P<0.05);腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验及EAC花环试验PPS1与空白对照组相比差异极显著(P<0.01);5项免疫学试验PPS1与PPS2相比差异均不显著。结果表明,PPS1能明显提高小鼠的免疫功能。

不同碳源、氮源对蜜环菌生长的影响

[目的]研究碳源、氮源对蜜环菌生长的影响。[方法]选用6种不同碳源和8种不同氮源的培养基,通过测定摇瓶浅层培养后蜜环菌菌球的生物量,探讨不同的营养源对蜜环菌生长的影响。[结果]最佳的培养条件为:在培养温度25℃、振荡器转速为150 r/min的黑暗环境中恒温培养10 d;最适碳源、氮源分别是蔗糖和酵母膏,菌球生物量分别达到(10.60±2.70)和(3.95±3.55)g/L。[结论]该方法为供试蜜环菌的培养基筛选及进一步研究天麻、猪苓的共生特性提供了理论基础。

野薄荷脱毒苗低成本组培快繁研究

[目的]探讨低成本下薄荷脱毒苗的快繁技术。[方法]以脱毒野薄荷试管苗为外植体,以1/2MS为基本培养基,配制不同培养基,对液体培养与固体培养的薄荷脱毒苗继代、生根及移栽过程进行了比较。[结果]浅层液体培养继代增殖系数、根长、根数、生根率均优于固体培养;来源于浅层液体培养生根的薄荷脱毒苗移栽成活率明显高于来源于固体培养基的脱毒苗;与固体培养基相比,采用浅层液体培养可节约成本57.44%,同时减少大量用工。[结论]以30 g/L食用白糖代替蔗糖、以凉开水代替蒸馏水的浅层液体培养更适合于脱毒薄荷种苗的大量繁殖。

蓝莓组培苗三种生根方法效果比较

2015年3—5月,在福建南平采用蓝莓品种‘夏普蓝’继代芽苗为试材,实验比较了蓝莓组培苗三种方法（瓶内固体培养基生根、瓶外生根、瓶内浅层液体培养基生根）的生根效果。选取在＂改良WPM＋ZT 0.25 mg/L＂培养基上经多次继代增殖培养的继代丛生芽苗,高6~8 cm者作为实验材料。结果表明,瓶内浅层液体培养基生根方法的生根率高达70%~90%,同时可降低组培苗生产成本,增加经济效益,移栽过程无需洗苗,不但相对简化了生根环节,也减少了伤苗、伤根的机率,是效果较好的生根方法。

凹叶厚朴茎段愈伤组织诱导中的褐变控制研究

目的研究愈伤组织诱导过程中的褐变问题。方法:将采集的标本进行外植体灭菌法再接种到培养基,在培养基中加抗褐变剂,进行防褐变试验。结果外植体在4℃冰箱冷藏48 h的预处理对褐变有较好的控制效果。在培养基中加入抗褐变剂比加入吸附剂抗褐变效果好,抗褐变剂中Vc的效果最佳,吸附剂PVP比活性炭好。结论培养条件,以低温遮光处理效果较好,光、温两个因素中,凹叶厚朴对光敏感,遮光能有效抑制褐变。液体浅层静置培养10 d后转入固体培养抗褐变的效果比单纯的固体培养效果好。

兜兰无菌播种技术研究

以兜兰自交和杂交的果荚为材料,对不同组合果荚成熟度、暗培养时间及播种方法对兜兰种子萌发的影响进行了研究,结果表明:兜兰无菌播种以授粉120～160 d的果荚暗培养时间35～45 d较好,通过改进的浅层液体培养方法在无菌播种中的创新型应用,萌发率可达到普通播种萌发率的7.6倍。试验结果也显示基因型是影响兜兰种子萌发的重要因素。