浆细胞瘤变易位1表达与糖尿病周围神经病变的相关性研究

目的探讨浆细胞瘤变易位1(PVT1)与糖尿病周围神经病变(DPN)及TGF-β1/Smad通路的关系。方法选取2013年5月至2014年12月于我院内分泌科住院治疗的T2DM患者184例,按照是否合并DPN分为单纯T2DM组(n=86)及合并DPN组(n=98),采用RT-PCR检测外周血单核细胞中PVT1表达量,并分析其与炎症反应因子及TGF-β1/Smad通路相关蛋白的关系。结果DPN组多伦多临床评分系统(TCSS)和密歇根神经病变评分(MNSI)的评分、正中神经运动神经传导速度(MMCV)、腓总神经运动神经传导速度(PMCV)、正中神经感觉神经传导速度(MSCV)及腓总神经感觉神经传导速度(PSCV)低于T2DM组(P<0.05或P<0.01),DM病程、TG、LDL-C、HbA_(1)c、IL-6、IL-8、TNF-α高于T2DM组(P<0.05或P<0.01)。Pearson相关性分析显示,PVT1与DM病程、HbA_(1)c、TG、LDL-C、IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3呈正相关(P<0.05或P<0.01),与TCSS评分、MNSI评分、MMCV、PSCV呈负相关(P<0.05)。结论PVT1与DPN发生相关,其表达量升高与TGF-β1蛋白表达升高及p-Smad2、p-Smad3蛋白磷酸化相关。

LncRNA人浆细胞瘤变体易位1介导miR-148b调控脂多糖诱导巨噬细胞自噬的机制研究

目的目前LncRNA人浆细胞瘤变体易位1(LncRNA-PVT1)在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞自噬的相关机制尚不清楚。文章旨在探讨LncRNA-PVT1介导miR-148b对LPS诱导的巨噬细胞自噬的相关机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,LPS刺激并分别转染PVT1 siRNA、miR-148b mimics、PVT1,分为LPS组(细胞不进行转染)、LPS+si-NC组(转染PVT1质粒阴性对照)、LPS+PVT1 siRNA转染组(转染PVT1 siRNA质粒)、LPS+miR-NC组(转染miR-148b mimics阴性对照)、LPS+miR-148b mimics组(转染miR-148b mimics)、LPS+PVT1-NC+miR-148b mimics组(转染PVT1阴性对照和miR-148b mimics)、LPS+PVT1+miR-148b mimics组(转染PVT1和miR-148b mimics)。同时设置空白组,空白组RAW264.7细胞既不进行LPS处理也不进行转染。采用qRT-PCR检测细胞中LncRNA-PVT1、miR-148b的表达;CCK-8检测细胞活力;免疫荧光染色检测细胞中LC3的表达;ELISA检测细胞中炎症因子水平;双荧光素酶报告系统分析PVT1与miR-148b的靶向关系;蛋白免疫印迹法检测细胞中自噬蛋白表达。结果与空白组比较,LPS组PVT1 mRNA、LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.05),miR-148b、p62表达显著降低(P<0.05)。与LPS组、LPS+si-NC组比较,LPS+PVT1 siRNA组PVT1 mRNA、p62、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05),miR-148b、LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著升高(P<0.05)。CCK-8实验结果显示,与空白组细胞活力(100.00±0.00)比较,LPS组(73.46±3.25)显著降低(P<0.05);与LPS组细胞活力(73.46±3.25)、LPS+si-NC组(74.15±4.42)比较,LPS+PVT1 siRNA组(90.38±2.16)显著升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果表明,PVT1与miR-148b存在靶向关系。与LPS组、LPS+miR-NC组比较,LPS+miR-148b mimics组LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著上调(P<0.05),p62、TNF-α、IL-6水平显著下调(P<0.05);与LPS+miR-148b mimics组、LPS+PVT1-NC+miR-148b mimics组比较,LPS+PVT1+miR-148b mimics组细胞LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著下调(P<0.05),p62、TNF-α、IL-6水平显著上调(P<0.05)。结论脓毒症中LncRNA-PVT1靶向miR-148b抑制巨噬细胞自噬,PVT1可能是脓毒症治疗的潜在研究靶点。

甲状腺癌组织中长链非编码RNA浆细胞瘤变体易位1和微小RNA-195-5p表达及临床意义

目的探究甲状腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤变体易位1(PVT1)和微小RNA(miRNA)-195-5p表达及临床意义。方法荧光实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测江苏省常州市中医医院2017年4月至2020年1月收治的82例甲状腺癌组织、癌旁正常组织及82例甲状腺良性肿瘤组织中lncRNA PVT1和miR-195-5p的表达,分析这两个指标与甲状腺癌患者临床病理参数的关系及其相关性。结果甲状腺癌组织中lncRNA PVT1相对表达量高于甲状腺良性肿瘤组织及癌旁正常组织、而miR-195-5p相对表达量低于甲状腺良性肿瘤组织及癌旁正常组织(均P <0.05)。甲状腺癌组织中,有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的lncRNA PVT1相对表达量高于无淋巴结转移及Ⅰ~Ⅱ期;有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的miR-195-5p相对表达量低于无淋巴结转移及Ⅰ~Ⅱ期(均P <0.05);甲状腺癌组织中lncRNA PVT1表达与miR-195-5p表达呈负相关(r=-0.731,P <0.01)。结论甲状腺癌组织中lncRNA PVT1表达上调,而miR-195-5p表达下调,二者均与淋巴结转移和TNM分期有关,对评估患者病情及确定治疗靶点具有潜在的应用价值。

浆细胞瘤变异体易位1和MYC基因在泛癌中的表达及生存期预测价值分析

目的:探讨浆细胞瘤变异体易位1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)和MYC基因在泛癌组织中的表达水平,及其对患者生存期的预测价值。方法:从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库获取31种共计10016例癌症患者的临床资料以及转录组RNA测序数据,其中23种癌症组织标本有相应的癌旁正常组织对照。应用t检验比较PVT1、MYC基因在23种癌症组织与癌旁正常对照样本中的表达水平差异。采用Spearman相关性分析PVT1与MYC基因在31种癌症中表达的相关性。应用Kaplan-Meier方法和Cox比例风险模型,分别在31种癌症中分析PVT1、MYC基因的表达水平与患者总体生存期的关系。结果:PVT1的表达水平在19种癌症组织中显著增高(P<0.05);在2种癌症组织中显著降低(P<0.05)。MYC的表达水平在7种癌症组织中显著升高(P<0.05);在6种癌症组织中降低(P<0.05)。相关性分析发现,在约87%(27/31)的癌症类型中,PVT1与MYC基因的表达水平呈正相关(Rho>0,P<0.01)。总体生存期分析表明,PVT1相对高表达在膀胱尿路上皮细胞癌、乳腺浸润癌、肾上腺皮质癌、肾透明细胞癌、乳头状肾细胞癌、低级别胶质瘤、前列腺癌、睾丸生殖细胞肿瘤以及葡萄膜黑色素瘤中与较短的总体生存期显著相关(log-rank P<0.05);MYC基因相对高表达在肾上腺皮质癌、膀胱尿路上皮细胞癌、宫颈鳞状细胞癌、头颈部鳞状细胞癌、乳头状肾细胞癌、卵巢浆液性囊腺癌、胰腺癌以及肉瘤中与较短的总体生存期显著相关(log-rank P<0.05),而在低级别胶质瘤及直肠腺癌中,MYC基因相对高表达组的总体生存期显著长于相对低表达组(log-rank P<0.05)。结论:PVT1在癌症组织中表达升高相比MYC基因而言更具有普遍性。在多种癌症中,PVT与MYC基因的表达相关,提示两者在功能调控中可能存在联系。此外,在9种癌症中,PVT1相对高表达患者的总体生存期较短,而MYC基因的表达情况在不同癌症中对患者总体生存期的影响存在差异。

circPVT1靶向调控miR-195-5p/SOX9轴影响结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化

目的:探究环状RNA浆细胞瘤变体易位1(circPVT1)靶向调控微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养人正常结肠上皮细胞NCM-460、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)至对数期,将SW480细胞分为对照组(正常培养SW480细胞不进行转染)、空载质粒组(转染空载质粒)、circPVT1沉默组[转染circPVT1小干扰RNA(siRNA)质粒]、miR-195-5p过表达组[转染miR-195-5p模拟物(mimics)质粒]、SOX9沉默组(转染SOX9 siRNA质粒)、circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组(转染circPVT1 siRNA和miR-195-5p siRNA质粒)。各组转染相应质粒后培养48 h。荧光定量PCR法检测NCM-460细胞、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)和各组SW480细胞circPVT1、miR-195-5p、SOX9 mRNA的表达;噻唑蓝和流式细胞仪分别检测各组SW480细胞增殖和凋亡;蛋白印迹法检测各组SW480细胞SOX9、凋亡和EMT相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9的靶向关系。结果:与NCM-460细胞比较,SW480细胞、HCT116细胞、HCT29细胞、LOVO细胞、SW620细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达显著升高,miR-195-5p表达显著降低(P<0.05);其中,SW480细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达最高,miR-195-5p表达最低;故选择SW480细胞进行后续实验。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组circPVT1、SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低,miR-195-5p表达显著升高(P<0.05);miR-195-5p过表达组miR-195-5p表达显著升高,SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);SOX9沉默组SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组、miR-195-5p过表达组、SOX9沉默组细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。与circPVT1沉默组比较,circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组miR-195-5p、凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著降低,SOX9 mRNA及蛋白、细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著升高(P<0.05)。circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9存在靶向调控关系。结论:沉默circPVT1可以靶向上调miR-195-5p表达,抑制SOX9表达,进而抑制SW480细胞增殖和EMT进程,促进其凋亡。

下调环状RNA Hsa-circ-PVT1对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭及血管生成作用机制的影响

目的:探讨环状RNA浆细胞瘤变体易位1(Hsa-circ-PVT1)对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭和血管生成的影响,以及其对微小RNA145(miR-145)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)基因的调控机制。方法:qRT-PCR检测子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1、miR-145表达。双荧光素酶实验检测Hsa-circ-PVT1和miR-145的关系。生物信息数据库TargetScanHuman、miRDB、miRactDB预测miR-145的下游靶点。细胞分组:Hsa-circ-PVT1-inhibitor-NC+miR-145-antagomir-NC+si-MAPK1-NC(NC)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor(inhibitor)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-antagomir(inhibitor+antagomir)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-miR-145-antagomir+si-MAPK1(inhibitor+antagomir+si)、正常细胞(normal组)。EDU检测各组细胞增殖,Transwell小室检测各组细胞侵袭能力;小管形成实验检测各组细胞血管生成能力;Western blot法检测各组细胞中MAPK1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,miR-145表达明显下降,双荧光素酶证实Hsa-circ-PVT1靶向miR-145的表达,miR-145下游靶标为MAPK1。与normal组Y14细胞相比,inhibitor组细胞增殖、侵袭及血管新生的性能明显降低,inhibitor+antagomir组能部分逆转这一抑制作用,而inhibitor+antagomir+si组能部分恢复这一作用,差异均有统计意义(均P<0.05)。结论:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,Hsa-circ-PVT1能靶向miR-145调控MAPK1表达,抑制Hsa-circ-PVT1表达能明显抑制间质细胞的增殖、侵袭及血管生成。

胃癌组织中lncRNA-PVT1、Atg5的表达变化及临床意义

目的探讨长链非编码RNA-浆细胞瘤变体易位1(LncRNA PVT1)和自噬相关基因5(Atg5)在胃癌组织及其癌旁正常组织中的表达变化及意义。方法选择103例胃癌患者,术中取癌组织及其癌旁正常组织,使用实时荧光定量PCR技术检测组织中的LncRNA PVT1和Atg5,同时分析二者与临床病理特征的关系。结果胃癌组织中的LncRNA PVT1和Atg5相对表达量均较癌旁正常组织高(P均<0.05)。胃癌组织中LncRNA PVT1的表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P均<0.05),Atg5表达与分化程度和TNM分期有关(P均<0.05)。胃癌组织中LncRNA PVT1与Atg5的表达呈正相关(r=0.553,P=0.000)。结论LncRNA PVT1和Atg5在胃癌组织中表达升高,可能成为胃癌早期诊断和治疗的标志物。

CircRNA PVT1在恶性肿瘤中的研究进展

环状RNA(circRNA)在恶性肿瘤的发病过程中具有重要影响。由于具有特征性的圆形结构,circRNA对RNA的降解具有较强的抵抗力,可在体液中检测到其表达,因此可将circRNA作为疾病诊断和预后的标志物。circRNA浆细胞瘤变体易位1(PVT1)由PVT1基因的第2号外显子环化形成,可在恶性肿瘤中作为不同微RNA(miRNA)的分子海绵,下调miRNA的表达,诱导其下游致癌蛋白的产生,促进肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移以及耐药等。circRNA PVT1属于非编码RNA,深入研究其在肿瘤中的作用机制,对疾病的诊断、治疗以及患者的预后均具有重要意义。

长链非编码RNA在膜性肾病中的作用研究进展

在基因组非编码基因特异性的RNA分子表达产物中,长链非编码RNA(lncRNA)广泛参与代谢、免疫等关键病理生理过程,与肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等的发生发展密切相关。随着lncRNA种类数量的不断增加,其在肾脏疾病中的作用越来越受到关注。膜性肾病(MN)是我国常见的原发性肾小球肾炎,严重威胁人们的健康和生命。lncRNA,尤其是X非活性特异性转录物、浆细胞瘤变体易位1参与MN的发生发展。但目前关于lncRNA在MN中的作用机制研究较少,深入研究lncRNA在MN中的作用机制,可能为MN的诊断及治疗提供新的治疗靶点。

长链非编码RNA PVT1在妇科癌症中的研究进展

长链非编码RNA(Long non-coding RNAs,LncRNAs)在多种癌症的发生发展中发挥着关键作用。LncRNA PVT1在妇科恶性肿瘤中的重要性引起了人们的广泛关注,主要反映在癌细胞的病理过程和肿瘤的临床进展以及预后方面。本文主要围绕LncRNA PVT1在妇科恶性肿瘤中的表达及调控作用进行综述。探讨LncRNA PVT1在妇科癌症中的临床价值,并提出它可能是一个潜在的生物标志物,可作为诊断或预后的指标,为人们进一步了解妇科恶性肿瘤的发病机制提供新思路。