浆细胞瘤转化迁移基因1在结直肠癌患者血浆中的表达与临床意义

目的:检测长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation gene 1,PVT1)在结直肠癌患者血浆中的表达并探讨其临床意义。方法:收集90例结直肠癌患者术前血浆、30例结直肠腺瘤患者血浆、42例体检健康者(对照组)血浆及29例配对的结直肠癌患者术后2~3周的血浆标本。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测上述标本的PVT1表达水平,并对29例结直肠癌患者术前、术后进行比较。分析血浆PVT1表达量与结直肠癌临床病理参数的相关性。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血浆PVT1对结直肠癌的诊断效能。结果:与对照组相比,结直肠腺瘤组、结直肠癌组及TNMⅠ/Ⅱ期结直肠癌组血浆PVT1表达水平均显著升高(P均<0.05),且结直肠癌患者术后表达水平较术前明显降低(P<0.01);结直肠癌患者血浆中PVT1表达水平与年龄、性别及肿瘤的部位、大小、分化程度、TNM分期等无相关性(P>0.05);血浆PVT1单独诊断结直肠癌的效能高于常规肿瘤标志物癌胚抗原;PVT1与癌胚抗原联合检测对结直肠癌及TNMⅠ/Ⅱ期结直肠癌诊断价值均高于PVT1、癌胚抗原单独检测。结论:lncRNA PVT1在结直肠癌及癌前病变患者血浆中表达上调,其可作为结直肠癌临床诊断和术后监测潜在的循环分子标志物。

长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1在结直肠癌组织和细胞中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)在结直肠癌(CRC)组织和细胞中的表达及临床意义。方法选取2006年4月至2011年3月在新乡医学院第一附属医院接受手术切除治疗的CRC患者的癌组织和配对癌旁组织标本112例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测CRC组织和癌旁组织中PVT1 mRNA的表达;并分析PVT1 mRNA表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系。培养CRC细胞系LoVo和RKO细胞,待细胞融合度达70%以上时随机分为siPVT1组(转染PVT1干扰序列)和siRNA-对照序列组(转染阴性对照序列),转染后继续培养48 h。采用实时荧光定量PCR法检测LoVo和RKO细胞中PVT1mRNA表达,流式细胞术检测LoVo和RKO细胞增殖和凋亡情况;Transwell分析法检测LoVo和RKO细胞的侵袭和迁移能力。结果CRC组织和癌旁组织中PVT1 mRNA高表达率分别为61.61%(69/112)、44.64%(50/112),CRC组织中PVT1 mRNA高表达率显著高于癌旁组织(χ^2=6.472,P<0.05)。CRC组织中PVT1表达与患者的年龄及性别无关(P>0.05),与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05)。siPVT1组LoVo、RKO细胞中PVT1 mRNA相对表达量均显著低于siRNA-对照序列组(P<0.05)。培养0、24 h时,siPVT1组与siRNA-对照序列组LoVo细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);培养48、72、96 h时,siPVT1组LoVo细胞增殖能力显著低于siRNA-对照序列组(P<0.05)。培养0 h时,siPVT1组与siRNA-对照序列组RKO细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);培养24、48、72、96 h时,siPVT1组RKO细胞增殖能力显著低于siRNA-对照序列组(P<0.05)。siPVT1组LoVo和RKO细胞凋亡率均显著高于siRNA-对照序列组(P<0.05)。siPVT1组LoVo、RKO细胞迁移和侵袭数均显著低于siRNA-对照序列组(P<0.01)。结论PVT1在CRC组织中呈高表达,且与肿瘤的恶性程度有关,沉默LoVo、RKO细胞中PVT1可有效抑制细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。

衰老髓核细胞中环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1的表达及调控机制

背景:研究发现环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(cyclic RNA plasmacytoma variant translocation 1,circPVT1)与成纤维细胞的衰老有关,但circPVT1与髓核细胞衰老的关系及机制目前尚不清楚。目的:观察circPVT1在衰老髓核细胞中的表达,并探究其可能作用机制。方法:体外培养人髓核细胞,电离辐射(5 Gy,6 d)诱导髓核细胞衰老,qRT-PCR检测细胞circPVT1、let-7 mRNA表达;circPVT1 siRNA、anti-let-7共转染至正常髓核细胞,分为空白组、si-NC+anti-NC组、si-circPVT1+anti-NC组、si-NC+anti-let-7组、si-circPVT1+anti-let-7组,qRT-PCR检测细胞circPVT1、let-7 mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖抑制情况,平板细胞克隆形成实验检测克隆形成数量,SA-β-gal染色检测细胞衰老情况,免疫印迹法检测细胞衰老相关蛋白p21、p27以及let-7靶标HMGA2、KRAS表达,双荧光酶素活性实验验证let-7对HMGA2、KRAS靶向调控关系。结果与结论:①与正常髓核细胞相比,辐射组细胞中circPVT1 mRNA表达降低,let-7 mRNA表达升高,SA-β-gal染色阳性率升高(P<0.05);②与空白组、si-NC+anti-NC组相比,si-circPVT1+anti-NC组circPVT1 mRNA表达降低,let-7 mRNA表达升高,细胞增殖抑制率升高,克隆形成数量降低,SA-β-gal染色阳性率升高,p21、p27蛋白表达升高,HMGA2、KRAS蛋白表达降低(P<0.05);而si-NC+anti-let-7组正好相反(P<0.05);③si-circPVT1+anti-let-7组circPVT1 mRNA表达、克隆形成数量、HMGA2、KRAS蛋白表达高于si-circPVT1+anti-NC组,低于si-NC+anti-let-7组;let-7 mRNA表达、细胞增殖抑制率、SA-β-gal染色阳性率、p21、p27蛋白低于si-circPVT1+anti-NC组,高于si-NC+anti-let-7组(P<0.05);④双荧光酶素活性实验显示HMGA2、KRAS是let-7的靶标;⑤结果表明,抑制circPVT1表达后加速髓核细胞衰老,其机制可能是通过结合let-7进而抑制靶向HMGA2、KRAS蛋白实现的。

变异性浆细胞瘤异位1基因对高糖培养的大鼠心脏成纤维细胞的影响及其机制

目的探讨变异性浆细胞瘤异位1(PVT1)基因对高糖培养的大鼠心脏成纤维细胞(CF)的影响及其作用机制。方法取对数生长期CF并随机分为空白对照组、高糖组、PVT1小干扰RNA(siRNA)组、PVT1 siRNA阴性对照(NC)组(PVT1 siRNA NC组)。空白对照组和高糖组细胞不进行转染,PVT1 siRNA组及PVT1 siRNA NC组细胞分别转染PVT1 siRNA及PVT1 siRNA NC试剂;转染24 h后,高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组细胞用含25 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养,模拟高糖培养条件,空白对照组细胞不作处理。采用天狼猩红染色法观察高糖处理24 h后4组细胞胶原纤维沉积情况。流式细胞术检测高糖处理24 h后4组细胞细胞周期分布情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测高糖处理24 h后4组细胞中PVT1、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))mRNA及微RNA(miR)-93-5p的表达。采用Western blot法检测高糖处理24 h后4组细胞中TGF-β_(1)、Smad2/3、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad7、p21、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达情况。另取对数生长期CF,随机分为未转染组、PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组、PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 NC+miR-93-5p NC组;未转染组细胞不进行转染,PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组细胞转染PVT1 siRNA和miR-93-5p inhibitor,PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组细胞转染PVT1 siRNA和miR-93-5p NC,PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组细胞转染PVT1 NC和miR-93-5p inhibitor,PVT1 NC+miR-93-5p NC组细胞转染PVT1 NC和miR-93-5p NC,转染24 h后,用含25 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基处理5组细胞,模拟高糖培养条件。采用Western blot法检测高糖处理24 h后5组细胞中TGF-β_(1)、Smad7、ColⅠ蛋白表达表达情况。结果与空白对照组比较,高糖组细胞数量增多,红色胶原纤维沉积增加;与高糖组比较,PVT1 siRNA组细胞间隙变大,红色胶原纤维沉积减小;PVT1 siRNA NC组细胞红色胶原纤维沉积与高糖组相近。高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组G_(0)+G_(1)期细胞比例显著低于空白对照组,S+G_(2)+M期细胞比例显著高于空白对照组(P<0.05);PVT1 siRNA组G_(0)+G_(1)期细胞比例显著高于高糖组,S+G_(2)+M期细胞比例显著低于高糖组(P<0.05);PVT1 siRNA NC组G_(0)+G_(1)期细胞比例显著低于PVT1 siRNA组,S+G_(2)+M期细胞比例显著高于PVT1 siRNA组(P<0.05);高糖组和PVT1 siRNA NC组G_(0)+G_(1)期细胞比例、S+G_(2)+M期细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA相对表达量均显著高于空白对照组,miR-93-5p相对表达量显著低于空白对照组(P<0.05);PVT1 siRNA组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA相对表达量显著低于高糖组,miR-93-5p相对表达量显著高于高糖组(P<0.05);PVT1 siRNA NC组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA相对表达量均显著高于PVT1 siRNA组,miR-93-5p相对表达量显著低于PVT1 siRNA组(P<0.05);高糖组和PVT1 siRNA NC组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA及miR-93-5p相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组细胞中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_(1)蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)显著高于空白对照组,p21、Smad7蛋白相对表达量显著低于空白对照组(P<0.05);PVT1 siRNA组细胞中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_(1)蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)显著低于高糖组,p21、Smad7蛋白相对表达量显著高于高糖组(P<0.05);PVT1 siRNA NC组细胞中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_(1)蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)显著高于PVT1 siRNA组,p21、Smad7蛋白相对表达量显著低于PVT1 siRNA组(P<0.05);高糖组和PVT1 siRNA NC组细胞中α-SMA、ColⅠ、p21、TGF-β_(1)、Smad7蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)比较差异无统计学意义(P>0.05)。PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著低于未转染组,Smad7蛋白相对表达量显著高于未转染组(P<0.05);PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著高于未转染组,Smad7蛋白相对表达量显著低于未转染组;未转染组细胞中TGF-β_(1)、Smad7、ColⅠ蛋白相对表达量与PVT1 NC+miR-93-5p NC组、PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组比较差异无统计学意义(P>0.05)。PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 NC+miR-93-5p NC组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著高于PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组,Smad7蛋白相对表达量显著低于PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组(P<0.05);PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 NC+miR-93-5p NC组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著低于PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组,Smad7蛋白相对表达量显著高于PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组(P<0.05);PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组与PVT1 NC+miR-93-5pNC组细胞中TGF-β_(1)、Smad7、ColⅠ蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PVT1基因沉默可促进miR-93-5p/Smad7通路活化,抑制TGF-β_(1)/Smad通路激活,进而抑制高糖培养的CF纤维化进程。

PVT1通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化的研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在调控子宫内膜基质细胞纤维化中的病理生理作用及分子机理。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人子宫内膜基质细胞(HESCs)中PVT1、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、转化生长因子-β1(TGF-β1)、SMAD2及SMAD3的表达水平。结果PVT1过表达促进HESCs增殖(P<0.05),而PVT1沉默抑制HESCs增殖(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中上调胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达(P<0.05),而PVT1被敲除时,胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中可以进一步上调TGF-β1/SMAD信号相关基因(TGF-β1、SMAD2、SMAD3)的表达(P<0.05)。当PVT1被敲除时,TGF-β1/SMAD信号相关基因胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。PVT1可诱导HESCs上清液中TGF-β1的产生(P<0.05)。结论PVT1可通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化而产生胶原蛋白。同时,PVT1可能是一个用于治疗子宫内膜粘连的新靶点。

lncRNA PVT1对前列腺癌细胞增殖 及侵袭、迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法传代培养人前列腺癌细胞DU145、人正常前列腺上皮细胞RWPE-1(以下分别称DU145、RWPE-1细胞),采用RT-qPCR法检测DU145、RWPE-1细胞lncRNA PVT1 mRNA表达。将DU145细胞随机分为观察组和对照组,分别转染lncRNA PVT1 siRNA和Negative Control siRNA,经G418筛选获得稳转细胞株,采用RT-qPCR法检测lncRNA PVT1 mRNA表达,采用Western blotting法检测lncRNA PVT1蛋白表达,采用MTT法检测培养12、24、36、48、60、72 h细胞增殖活性,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果DU145细胞lncRNA PVT1 mRNA相对表达量明显高于RWPE-1细胞(t=7.938,P<0.01)。观察组lncRNA PVT1 mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组(t分别为5.053、18.110,P均<0.01)。观察组培养60、72 h时细胞增殖活性均低于对照组同期(P均<0.01),而两组培养12、24、36、48 h时细胞增殖活性比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组穿膜细胞数和细胞迁移率均低于对照组(t分别为6.982、11.782,P均<0.05)。结论前列腺癌细胞lncRNA PVT1高表达,下调lncRNA PVT1表达可抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。

LncRNA PVT1调控miR-1207-5p/FMNL2对HL-60细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(LncRNA PVT1)对HL-60细胞生物学行为及柔红霉素敏感性的影响。方法将HL-60细胞分为对照组、miR-NC组、PVT1-siRNA组、miR-1207-5p inhibitor组和miR-1207-5p mimic组。除对照组细胞不处理外,其余各组细胞分别将miR-NC,PVT1-siRNA,miR-1207-5p inhibitor,miR-1207-5p mimic转染到HL-60细胞中。采用萤光素酶检测试剂分析LncRNA PVT1对微小RNA-1207-5p(miR-1207-5p)和同源形成素样蛋白2(FMNL2)的调控作用,CCK-8法检测细胞存活率,改良Matrigel Boyden室测定法测定细胞侵袭性,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞术检测细胞凋亡率,MTT法检测细胞对柔红霉素敏感性,实时逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测miR-1207-5p和FMNL2 mRNA表达水平,免疫印迹(Western blot)法检测FMNL2蛋白表达水平。结果萤光素酶分析结果显示,LncRNA PVT1与miR-1207-5p、miR-1207-5p与FMNL2均存在靶向调节作用;与对照组比较,PVT1-siRNA组LncRNA PVT1表达水平显著降低(P<0.05),miR-1207-5p表达水平显著升高(P<0.05)。与对照组比较,miR-1207-5p inhibitor组细胞存活率、迁移率、侵袭数均显著降低,细胞凋亡率、FMNL2 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);miR-1207-5p mimic组细胞存活率、迁移率、侵袭数均显著升高,细胞凋亡率、FMNL2 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与对照组比较,相同质量浓度(0,0.5,1,2,4,8μg/mL)柔红霉素作用下PVT1-siRNA组HL-60细胞活力均显著升高(P<0.05)。结论沉默LncRNA PVT1可使miR-1207-5p表达增加,从而抑制FMNL2表达,导致HL-60细胞恶性生物学行为概率升高,同时降低细胞对柔红霉素的敏感性。

PVT1通过促进肿瘤干细胞特性介导肺腺癌细胞PC9厄洛替尼抵抗

目的探究浆细胞瘤转化迁移基因(PVT) 1对肺腺癌肿瘤干细胞特性及厄洛替尼抵抗的影响。方法慢病毒介导转染PVT1干扰载体si PVT1-1及si PVT1-2下调肺腺癌细胞PC9中PVT1的表达作为干扰A组及干扰B组细胞,转染对照载体为对照组细胞。实时荧光定量PCR(q PCR)技术检测PVT1、CD133和CD44 mRNA的表达水平,Western印迹检测CD133和CD44蛋白的表达水平。CCK-8法检测细胞对厄洛替尼的半抑制浓度(IC50),方差分析及SNK-q检验比较各组指标间的统计学差异。结果干扰A组及干扰B组PVT1、CD133和CD44 mRNA的表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05)。干扰A组及干扰B组CD133和CD44蛋白表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05)。干扰A组及干扰B组厄洛替尼IC50显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 PVT1可通过诱导肺腺癌细胞干细胞特性的维持促进其厄洛替尼抵抗的发生。

长链非编码RNA-浆细胞瘤转化迁移基因在糖尿病肾脏疾病中的表达及其临床意义的研究

目的 探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)-浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)在糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease, DKD)表达变化并分析其临床意义。方法 选取2019年5月至2021年5月收治的DKD患者76例(DKD组)和2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)患者81例(T2DM组)为研究对象,另选取健康志愿者79名为对照组,使用实时荧光定量PCR法检测纳入对象外周血LncRNA-PVT1表达水平,比较各组纳入对象LncRNA-PVT1表达、肾功能、血糖水平的变化,Spearman相关性分析血LncRNA-PVT1表达与肾功能指标和血糖指标水平关系,受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)分析LncRNA-PVT1表达对DKD发生的预测效能。结果 与对照组相比,DKD组、T2DM组患者的体重指数(body mass index, BMI)、LncRNA-PVT1表达、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA1c)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、尿β2-微球蛋白(microglobulin, MG)、尿α1-MG、尿微量白蛋白/尿肌酐比值(albumin-creatinine ratio, ACR)、尿素氮(urea nitrogen, BUN)、血肌酐(serum creatinine, Scr)、胱抑素C(cystatin C,Cys C)水平均升高(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)水平降低(P<0.05)。与T2DM组相比,DKD组患者的LncRNA-PVT1表达、HbA1c、LDL-C、尿β2-MG、尿α1-MG、ACR、BUN、Scr、Cys C水平均升高(P<0.05),HDL-C水平降低(P<0.05)。LncRNA-PVT1表达与HbA1c、LDL-C、尿β2-MG、尿α1-MG、ACR、BUN、Scr、Cys C水平呈正相关(P<0.001),而与HDL-C水平呈负相关(P<0.001)。LncRNA-PVT1表达对DKD发生预测的曲线下面积为0.907(95%CI:0.862~0.953,P<0.001),截断值为1.830。结论 LncRNA-PVT 1表达在DKD中呈升高趋势且与肾功能、血糖水平存在相关性,还对DKD发生有较高的预测价值。

缺血性疾病患者血清lncRNA PVT1和FOXM1表达水平及联合心脏磁共振延迟强化成像与预后的关系

目的 探讨缺血性疾病患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)和叉头框转录因子M1(FOX M1)表达水平及联合心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像(LGE-MRI)与预后的关系。方法 选取2021年2月-2022年2月我院收治的缺血性心脏病患者118例即为研究组,随访一年根据随访过程中是否发生主要心脏不良事件(MACE),分为MACE组32例,无MACE组86例。同期选择在我院体检健康的志愿者118例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA PVT1的相对表达量。采用酶联免疫吸附试验(E LISA)检测FOXM1水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1对缺血性心脏病患者预后发生MACE的预测价值。结果 研究组患者DBP、SBP、TG、TC、 LDL-C、GLU水平与对照组相比显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,研究组的血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者DBP、SBP、TC、LDL-C水平显著升高, HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。MACE组的LGE-MRI阳性数量显著高于无MACE组(P<0.)05。与LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1单独预测相比,三者联合预测MACE发生的AUC更高(Z=7.221,P<0.001;Z=7.737,P<0.001;Z=7.091,P<0.001)。结论 缺血性心脏病预后发生MACE的患者血清lncRNA PVT1和FOXM1水平呈高表达,二者联合LGE-MRI对MACE的发生有一定的预测价值。

lncRNA PVT1在结直肠癌组织和细胞中的表达及其对顺铂化疗敏感性的影响及机制

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)顺铂(cisplatin,DDP)化疗敏感性的调控作用及其机制。方法:收集2006年4月至2011年3月新乡医学院第一附属医院112例接受手术切除、经病理确诊CRC患者的癌及癌旁组织标本,从中分别选择各30例顺铂敏感、顺铂耐药癌及癌旁组织;人CRC细胞系HT29、SW480、HCT116、RKO和LoVo与正常结肠上皮细胞株NCM460,构建顺铂耐药LoVo/DDP及RKO/DDP细胞。用脂质体2000分别将siPVT1和siNC、LV-PVT1和LV-NC转染或感染LoVo和RKO细胞或者LoVo/DDP及RKO/DDP细胞。qPCR检测CRC组织及细胞中lncRNA PVT1的表达水平。CCK-8法、流式细胞术、WB实验分别检测敲降PVT1或过表达PVT1对CRC细胞的增殖、凋亡及凋亡相关蛋白的表达影响。构建无胸腺裸鼠CRC皮下移植动物模型,观察对移植瘤体细胞生长及顺铂耐药的影响。结果:PVT1 m RNA在CRC组织及细胞中lncRNA PVT1高表达,其表达水平与顺铂耐药呈正相关。敲除PVT1后,显著降低顺铂耐药的CRC细胞的增殖能力并促进其凋亡(P<0.05或P<0.01)、降低耐药相关分子MDR1和MRP1及抗凋亡相关分子Bcl-2的表达而增加了促凋亡相关分子Bax和活化的caspase-3的表达。过表达PVT1后,则促进细胞增殖并减少其凋亡(P<0.05或P<0.01)。体内实验表明,在CRC细胞中过表达PVT1促进顺铂耐药的形成(P<0.05)。结论:敲降lncRNA PVT1表达可显著抑制CRC耐药细胞株的增殖并促进其凋亡,过表达PVT1可明显促进CRC细胞和动物移植瘤体的生长。PVT1通过抑制MDR1和MRP1的表达,调控内源性凋亡通路,进而增强CRC细胞对顺铂的敏感性。

同时下调长链非编码RNA PVT1和MINCR对Raji细胞增殖的影响

目的探讨同时下调长链非编码RNA(lncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)和MINCR(MYC-induced long non-coding RNA)对淋巴瘤细胞株Raji增殖的影响及其可能机制。方法合成靶向PVT1、MINCR的小干扰RNA(siRNA)和无关对照siRNA(SC-siRNA)序列。实验分为PVT1-siRNA组、MINCR-siRNA组、PVT1-siRNA+MINCR-siRNA组、无关对照组和细胞组(未转染的Raji细胞)。将各条siRNA转入Raji细胞后,用实时定量RT-PCR方法检测MINCR RNA表达水平;分别用CCK8法、流式细胞仪、Western blot检测细胞增殖、细胞周期和c-Myc蛋白的表达情况。结果转染MINCR-siRNA后MINCR表达下调,与无关对照组和细胞组相比差异有统计学差异(P<0.05)。PVT1-siRNA联合MINCR-siRNA转染到Raji细胞后,细胞增殖明显受到抑制(P<0.05),细胞周期阻滞于G1期(P<0.05),c-Myc蛋白表达下降(P<0.05),且与单用PVT1-siRNA组、MINCR-siRNA组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论同时下调PVT1和MINCR可以增强对Raji细胞增殖的抑制作用。

浆细胞瘤转化迁移基因1在类风湿关节炎患者诊断中的临床应用

目的评价长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)对RA的临床诊价值。方法选取本院健康体检中心119名健康体检者作为健康对照,收集RA患者158例,同时收集SLE及pSS患者各50例作为疾病对照,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测RA、健康对照及SLE、pSS患者血浆中PVT1的相对含量;分析RA患者血浆中PVT1的含量与RF、IL-6及抗CCP抗体的相关关系。采用t检验、方差分析和Speraman相关性分析。受试者工作特征曲线(ROC)分析PVT1对RA的诊断效能。结果与健康对照组(1.32±1.22)和SLE(1.15±0.83)及pSS(1.46±0.88)相比,RA患者血浆中PVT1的表达量(3.71±2.68)明显增高(t=8.36,P<0.01;t=6.83,P<0.01;t=5.98,P<0.01);相关性分析显示,RA患者血浆中PVT1的表达与RF、IL-6及抗CCP抗体的表达均呈正相关(r=0.41,P<0.01;r=0.38,P<0.01;r=0.40,P<0.01);血浆PVT1在诊断RA的曲线下面积(AUC)为0.79;当PVT1临界值为1.97时,诊断灵敏度为68.27%,特异度为86.45%,此时可达到最大的诊断效能;当PVT1联合RF诊断RA时,AUC则为0.88[95%CI(0.83,0.93),P<0.01],其灵敏度和特异度分别为80.22%和82.73%。结论血浆PVT1对RA具有潜在的诊断价值,可能成为诊断RA的新型标志物,对RA的诊断提供新的临床依据。

LncRNA PVT1靶向miR-423-5p对LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡和哮喘相关炎症因子分泌的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)靶向miR-423-5p对脂多糖(LPS)诱导的支气管上皮细胞(16HBE)凋亡和哮喘相关炎症因子分泌的影响。方法采用1 mg/L的LPS刺激16HBE细胞12 h构建体外炎症模型。实时定量PCR(RT-qPCR)分析模型细胞、哮喘患者血清中PVT1和miR-423-5p表达量。流式细胞术检测细胞凋亡。酶联免疫吸附实验检测IL-4、IL-5、IL-13分泌量。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR分析PVT1和miR-423-5p的靶向关系。采用上述方法检测沉默PVT1或过表达miR-423-5p对LPS诱导的16HBE凋亡和哮喘相关炎症因子分泌的影响。结果哮喘患者血清中PVT1表达水平显著升高,miR-423-5p表达水平显著降低。LPS处理后16HBE细胞PVT1表达量显著升高,miR-423-5p表达量显著降低,细胞凋亡率、IL-4、IL-5、IL-13分泌量显著升高。miR-423-5p是PVT1靶基因,PVT1负调控miR-423-5p表达。沉默PVT1或过表达miR-423-5p后LPS诱导的16HBE细胞凋亡率、IL-4、IL-5、IL-13分泌量显著降低。抑制miR-423-5p表达显著减弱沉默PVT1对LPS诱导的16HBE细胞凋亡率以及IL-4、IL-5、IL-13分泌的影响。结论沉默PVT1通过上调miR-423-5p可抑制LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡和哮喘相关炎症因子分泌。

浆细胞瘤转化迁移基因1在肿瘤中的研究进展

浆细胞瘤转化迁移基因（PVT1）是一个重要的长非编码RNA,在人类基因组PVT1定位于染色体8q24.21.PVT1的异常表达和多态性与人类多种肿瘤如恶性淋巴瘤、乳腺癌、结直肠癌、胰腺癌等密切相关,并能影响肿瘤患者的生存和预后.目前认为其作用机制可能是通过与Myc基因、微小RNA或其他蛋白的相互作用,以及基因多态性等,但还不明确,对PVT1的深入研究有望为肿瘤的诊断治疗提供新靶点.

lncRNA PVT1靶向调控miR-625-5p对高糖诱导心肌细胞损伤的影响及其机制

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)靶向调控miR-625-5p对高糖诱导心肌细胞损伤的影响及其机制。方法 将心肌H9c2细胞分为NG组、HG组分别用5.5、30.0 mmol/L葡萄糖干预,再将30.0 mmol/L葡萄糖干预的心肌H9c2细胞分别转染si-NC、si-PVT1、miR-NC、miR-625-5p、si-PVT1+anti-miR-NC、si-PVT1+anti-miR-625-5p,记为HG+si-NC组、HG+si-PVT1组、HG+miR-NC组、HG+miR-625-5p组、HG+si-PVT1+anti-miR-NC组、HG+si-PVT1+anti-miR-625-5p组。qRT-PCR检测PVT1、miR-625-5p表达量;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测Cleaved-caspase3、Bax蛋白表达;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达水平;双荧光素酶报告实验验证PVT1与miR-625-5p的靶向关系。结果 与NG组比较,HG组PVT1表达量、凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平升高,miR-625-5p表达量降低(P<0.05)。与HG+si-NC组比较,HG+si-PVT1组PVT1表达量、凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平降低,miR-625-5p表达量升高(P<0.05)。与HG+miR-NC组比较,HG+miR-625-5p组miR-625-5p表达量升高,Cleaved-caspase3蛋白、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平降低(P<0.05)。与HG+si-PVT1+anti-miR-NC组比较,HG+si-PVT1+anti-miR-625-5p组miR-625-5p表达量降低,凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白、Bax蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平升高(P<0.05)。结论 PVT1可通过靶向负调控miR-625-5p减轻高糖诱导的心肌细胞凋亡和炎症反应损伤。

p53、PVT1基因联合miRNA-92a检测在评估胃癌患者预后中的价值

目的探讨血清p53、人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)、microRNA-92a(miR-92a)检测在胃癌患者预后评估中的价值。方法选取2012年1月至2017年7月在该院接受治疗的148例胃癌患者,136例慢性萎缩性胃炎患者和60名体检健康者分别作为胃癌组、良性病变组和健康对照组,应用实时荧光定量PCR法检测血清p53、PVT1和miR-92a相对表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线获得3项指标的最佳截断值,Kaplan-Meier法进行生存分析,应用Cox回归模型对影响患者预后的因素进行分析,通过ROC曲线分析p53、PVT1和miR-92a评估胃癌患者预后的价值。结果胃癌组患者血清p53、PVT1和miR-92a相对表达水平较良性病变组和健康对照组均明显升高,良性病变组也明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、N分期胃癌患者外周血PVT1表达情况差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤分化程度胃癌患者外周血p53表达情况差异有统计学意义(P<0.05)。不同TNM分期胃癌患者miR-92a表达情况差异有统计学意义(P<0.05)。148例胃癌患者的中位生存时间为46个月,血清p53、PVT1和miR-92a表达水平低者的中位生存时间均明显长于表达水平高者,肿瘤最大径<4.25 cm、TNM临床分期Ⅰ+Ⅱ期和血小板计数<221.5×109/L者的中位生存时间也明显长于肿瘤最大径≥4.25 cm、TNM临床分期Ⅲ期和血小板计数≥221.5×109/L者,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示肿瘤最大径、TNM分期及血清p53、PVT1和miR-92a表达均是影响胃癌患者预后的因素。ROC曲线分析显示miR-92a、p53、PVT1联合检测预测患者预后的AUC明显高于单独检测。结论胃癌患者外周血p53、PVT1和miR-92a呈现高表达,且其表达水平升高均是影响患者预后的独立危险因素,三者联合检测对胃癌患者预后有一定的预测价值。

PVT1基因在胃癌患者血液中的表达及其临床意义

目的:检测人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)在胃癌患者血液中的表达水平及临床常用肿瘤标志物的含量,探讨PVT1与肿瘤标志物和临床分期分级的关系。方法:采集2015年1月至12月石河子大学医学院一附院收住院的51例胃癌、63例慢性萎缩性胃炎患者与54名正常人外周静脉血,提取血液总RNA。实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测血液中PVT1 mRNA表达水平;电化学发光法检测胃癌患者血清中AFP、CEA、CA19-9的含量。结果:PVT1 mRNA在胃癌、慢性萎缩性胃炎患者血液中的表达量较高,胃癌组与正常组相比PVT1 mRNA表达量差异有统计学意义(t=0.000,P<0.01),慢性萎缩性胃炎组与正常组相比PVT1 mRNA表达量差异也有统计学意义(t=0.000,P<0.01),但是胃癌患者与慢性萎缩性胃炎患者比较其差异无统计学意义(t=0.459,P>0.05)。PVT1 mRNA表达与淋巴结转移有明显相关(r=0.024,P<0.05)。此外,PVT1 mRNA的表达与血清肿瘤标记物CA19-9具有相关性(r=0.429,P<0.01)。结论:PVT1 mRNA在胃癌、慢性萎缩性胃炎患者血液中表达高于正常人,且与CA19-9具有相关性,提示PVT1 mRNA可能成为胃癌早期诊断及预后的分子标志物之一。

长链非编码RNA PVT1在神经胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)在神经胶质瘤中的表达及临床意义。方法采用qRT-PCR方法检测并比较53例神经胶质瘤组织(观察组)及6例正常脑组织(对照组)中LncRNA PVT1的表达量。根据神经胶质瘤组织中LncRNA PVT1的中位表达量分为高表达组与低表达组,分析LncRNA PVT1表达量与临床病理因素的关系。采用Kaplan-Meier法绘制不同LncRNA PVT1表达量的神经胶质瘤患者生存曲线,并分析LncRNA PVT1表达量与神经胶质瘤患者预后的关系。结果观察组LncRNA PVT1的表达量明显高于对照组(P<0.01)。其中高级别胶质瘤(WHOⅢ~Ⅳ级)的LncRNA PVT1表达量明显高于低级别胶质瘤(WHOⅠ~Ⅱ级)(P<0.01)。LncRNA PVT1表达量与神经胶质瘤WHO分级密切相关(P<0.01),与患者年龄、性别、Karnofsky功能状态评分(KPS)评分、肿瘤大小等均无关(均P>0.05)。经log-rank检验,高表达组患者预后较低表达组差,差异有统计学意义(P<0.01)。结论LncRNA PVT1在神经胶质瘤组织中高表达,表达量与神经胶质瘤WHO分级及患者预后密切相关;LncRNA

LncRNA PVT1调控呼吸道合胞病毒感染人胚肺成纤维细胞凋亡的机制

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)人浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染人胚肺成纤维(HELF)细胞损伤的影响。方法本研究纳入于2020年1月一2023年5月在常州市第一人民医院确诊并住院治疗的RSV感染的哮喘患者38例和健康志愿者38名。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测lncRNAPVT1和miR-625-5p表达情况。将HELF细胞分为NC组(未感染)、RSV组(RSV感染)、si-NC+RSV组(转染si-NC+RSV感染)、si-lncRNAPVT1+RSV组(转染si-lncRNAPVT1+RSV感染)、miR-NC+RSV组(转染miR-NC+RSV感染)、miR-625-5p+RSV组(转染miR-625-5p模拟物+RSV感染)、anti-miR-NC+si-lncRNAPVT1+RSV组(共转染anti-miR-NC与si-lncRNAPVT1+RSV感染)、anti-miR-625-5p+si-lncRNA PVT1+RSV组(共转染anti-miR-625-5p与si-lncRNAPVT1+RSV感染)。采用流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫印迹法检测蛋白表达,酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6含量。双荧光素酶报告实验分析lncRNAPVT1与miR-625-5p的靶向关系。结果RSV感染的患者血清和HELF细胞中lncRNAPVT1表达量比健康人血清或对照NC增加(均P<0.05)。RSV感染HELF增加Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达量、TNF-α、IL-6含量、凋亡率(均P<0.05);而这些影响在lncRNAPVT1沉默或miR-625-5p过表达后得到缓解(均P<0.05)。lncRNAPVT1靶向调控miR-625-5p的表达。anti-miR-625-5p+si-lncRNAPVT1+RSV组HELF细胞的Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达量、TNF-α、IL-6含量和细胞凋亡率均高于anti-miR-NC+si-lncRNAPVT1+RSV组(均P<0.05)。结论lncRNAPVT1低表达通过靶向miR-625-5p,抑制RSV感染的HELF细胞凋亡和炎症反应。