丙酮酸脱氢酶测活方法比较研究

对目前几种丙酮酸脱氢酶测活的方法进行了比较研究。结果表明,在测定丙酮酸脱氢酶活性时,2,6-二氯吲哚酚法灵敏度较高,是一种经济有效的好方法,铁氰化钾法不论从反应时间和现象变化上看都是最差的。但2,6-二氯吲哚酚法不能用于测定丙酮酸脱氢酶复合体活性,这时用辅酶A法较好,其灵敏度也比较高。

神经生长因子细胞测活方法的初步建立

神经生长因子(nerve growth fector,NGF)是神经系统中重要的多肽生长因子,它调控外周交感、感觉神经元和中枢胆碱能神经元的存活和发育,并且对损伤后的部分神经元具有修复作用。神经生长因子经典的生物学活性测定方法是采用8～9天龄鸡胚背根神经节法和PC12细胞法。1996年世界卫生组织(WHO)颁布了新的NGF活性测定的国际标准方法。据此我们初步建立了该方法,该方法具备简便、易行、快速等特点,为NGF活性测定奠定了基础。

一种微量、快速测定植物种子β-淀粉酶活性的方法

针对3,5-二硝基水杨酸(DNS)法的缺点,以对硝基苯酚麦芽五糖(PNPG5)为底物,建立并改进了植物种子β-淀粉酶活性测定的方法。本方法具有微量和快速的特点;进一步通过对4种植物材料种子的酶活性测定以及α-淀粉酶的干扰评估实验,证实了该法可以运用于植物种子β-淀粉酶活性的专一性测定。

纤维素酶测活方法的分析——基于构建统一的工业化纤维素酶测活标准

本实验分析了国内外常用的测活标准IUPAC标准(Ghose,1987)、中国农业行业标准(NY/T 912-2004)及各大公司的企业标准,结果显示采用IUPAC标准推荐的方法测定纤维素内切酶活力和总酶活力操作简单,稳定性、重复性较好.实验进一步对国内生产厂家的一系列产品进行了测定分析,为工业化纤维素酶测活体系的统一奠定了基础.

AMP激活的蛋白激酶的体外测活

AMP激活的蛋白激酶(AMPK)在维持细胞内能量代谢平衡中发挥重要作用。过去20多年,研究者多采用32P标记SAMS多肽的方法体外检测AMPK活性,该方法在操作过程中有辐射危害,会对环境造成放射性污染。该文用化学发光方法代替同位素标记,建立一种新的体外检测AMPK活性的方法,并利用该方法比较小鼠不同组织中AMPK的活性。实验结果表明,建立的体外测活方法能够满足实验需求,小鼠不同组织内源AMPK活性有很大差别。这一方法可为今后研究AMPK的酶学性质和相关作用蛋白提供可靠、有效的帮助。

以ANO1蛋白为靶点的钙激活氯通道调节剂研究进展

钙激活氯通道是广泛存在于人体内的一种阴离子通道,参与分泌、心肌细胞去极化、神经信号传导等多种生理活动。ANO1蛋白是钙激活氯通道的分子基础之一,对ANO1蛋白进行调节能够产生多种药效作用,例如镇痛、治疗痢疾、哮喘、抑制肿瘤等。近10年来发展出许多ANO1蛋白调节剂筛选测试方法,虽然筛选出一系列以ANO1蛋白为靶点的钙激活氯通道调节分子,但是这些分子的药理学作用却并不一致。本文从筛选方法、构效关系、潜在应用前景等多方面对ANO1蛋白调节分子的研究进展进行论述。