海南崖豆藤提取物HN-1不同种属血浆蛋白结合特性研究

目的:采用超滤法,研究海南崖豆藤抗炎活性成分6-methoxy-8,8 dimethy-3-(2,4,5-rimethoxypenyl)4H,8H-pyrano[2,3-f]chromen-4-one在大鼠,Beagle犬,食蟹猴和人四个种属中的血浆蛋白结合率。方法:采用超滤法结合液相色谱质谱联用(UFLC-MS/MS)检测方法,对HN-1在大鼠,Beagle犬。食蟹猴和人血浆的蛋白结合率进行测定。结果:在0.1,1,5μg·mL^-1质量浓度FHN-1与大鼠血浆的蛋白结合率分別为(98.57±0.55)%、(96.38±0.55)%、(91.06±0.13)%;与Beagle犬血浆的蛋白结合率分別为(99.44±0.28)%、(96.4±0.88)%、(90.42±0.47)%;与食蟹猴血浆的蛋白结合率分别为(99.73±0.38)%、(95.30±0.34)%、(91.53±1.37)%;与健康人血装的蛋白结合率分别为(99.13±0.07)%、(96.30±0.11)%、(92.06±2.06)%。结论:本研究建立的方法简单准确,特异性强。可用于HN-1的血浆蛋白结合率测定:HN-1与各种属血浆蛋白均为高强度结合(>90%),且在已考察范围内,其血装蛋白结合率无明显种属差异。

海南崖豆藤提取物HN-1的体内外代谢研究

应用体外肝微粒体孵育体系,采用超快速液相色谱质谱联用(UFLC-MS/MS)检测方法,研究海南崖豆藤抗炎活性成分6-methoxy-8,8-dimethyl-3-(2,4,5-trimethoxyphenyl)-4H,8H-pyrano[2,3-f]chromen-4-one(HN-1)在大鼠、小鼠、恒河猴、Beagle犬和人5个种属肝微粒体中的代谢稳定性,比较代谢种属间的差异;采用化学抑制剂法确定其在人肝微粒体中的代谢表型。采用UPLC-Q-TOF-MS/MS检测方法,通过比较体外孵育0,60 min的样品,初步推断各种属体外代谢产物;比较粪便、尿液、血浆空白和给药后的生物样品,推测HN-1在SD大鼠体内的代谢产物。结果表明HN-1在各种属肝微粒体中的代谢均较为稳定,其中犬与人的肝微粒体代谢性质最相近;在人肝微粒体中主要经CYP1A1,CYP2D6,CYP3A4 3种同工酶催化代谢;初步推测出HN-1在体内体外的代谢产物,其中包括3个体外代谢产物和5个体内代谢产物,研究结果为HN-1进一步的药理药效研究奠定基础。