海地瓜多糖中蛋白含量测定方法比较

比较4种常用的蛋白定量方法来测定海参多糖中蛋白含量,建立海参多糖中蛋白含量的测定方法。氨基酸组成折算出海地瓜多糖中蛋白含量为(5.06±0.31)%,将此结果作为其他测定方法比较的标准。采用4种常用的蛋白定量方法:Folin-酚法、BCA法、考马斯亮蓝法、荧光光度法进行测定,对测定结果进行比较分析。Folin-酚法、BCA法、荧光光度法测定多糖中蛋白含量分别为(4.92±0.20)%、(6.29±0.51)%、(3.88±0.25)%。考马斯亮蓝在反应中不显色,此法检测不出多糖中蛋白。经比较分析,Folin-酚法精确度高,重现性好,测定时间短,操作简便,对仪器要求低,可以准确简便地测定海地瓜多糖中蛋白含量。

海地瓜多糖提取条件的优化和脱蛋白的研究

通过对海地瓜多糖提取工艺的摸索研究,确定采用碱解结合木瓜蛋白酶解的方法提取海地瓜粗多糖,并对所提取的海地瓜粗多糖进行了脱蛋白的研究。结果表明,海地瓜于2倍体积的原料重量的溶剂中加入4%氢氧化钠溶液6℃提取24h处理后再用木瓜蛋白酶水解,能提高粗多糖的提取率。采用L9(34)正交实验设计,确定酶解的最佳条件为:酶解温度55℃、酶解时间4h、加酶量4.8×104U/g、酶解液pH6.5,粗多糖得率可达12.08%。在海地瓜多糖脱除蛋白的实验中,三氯乙酸法(TCA)蛋白脱除率为50.86%和多糖损失率为3.92%优于醋酸钾沉淀法的29.83%和10.85%,其脱蛋白效果理想。